Proteiner i plasma och urin Flashcards
1
Q
Vilka typer av strukturer har vi på proteiner?
A
- Primär struktur – aminosyrasekvens
- Sekundär – A-helix, B-struktur
- Tertiär – 3D konfigurering (globulär)
- Kvartär, multi-proteinsammansättningar (ex hemoglobin som är fyra tertiära molekyler)
2
Q
Plasmaproteiner
- Plasmaproteiner är mer stabila och lösliga jämfört med intracellulära proteiner som oftast finns som membranbundna eller som en del av multienzymkomplex
Vad kan ett plasmaprotein stabiliseras av?
A
Kolhydrater t ex
3
Q
Vad kallas den totala uppsättningen av proteiner i plasma?
A
Proteom
4
Q
Vad innebär proteomik?
A
- Storskalig analys av proteiner i biologiskt prov vilket kan ge nya biomarkörer vid t ex sjukdomstillstånd
5
Q
Var sker syntes av plasmaproteiner?
A
Mest i hepatocyterna, kvantitativt dominerande undantag är immunoglobinerna som bildas av B-celler (plasmaceller), viss syntes också av andra celltyper (ex makrofager, endotelceller som ger vWF)
6
Q
Hur sker katabolism av plasmaproteiner?
A
- Sker mest i lever. I hepatocyter sker endocytos av proteiner som sedan deglykosyleras och klyvs till aminosyror med proteinas och peptidas
- Vissa proteiner metaboliseras även av tubuli- och endotelceller (mindre proteiner har kortare halveringstid då de kan filtreras fritt och sedan tas upp igen i tubuli och metaboliseras där)
7
Q
Vad utgör det mesta av de kolloidosmotiska trycket?
A
Albumin (50 %)
IgG, tranferrin, lipoprotein också stora delar av koncentrationen
8
Q
Hur bestäms koncentration av plasmaproteiner i plasma?
A
- Balansen mellan produktionshastighet, sekretion och clearance
- Cellskada och graden av läckage in i plasma
- Exogena faktorer – behandling osv, intravenös västketerapi, kan påverka koncentration av plasmaproteiner (viktigt beakta)
9
Q
- Immundefens
- Inflammation
- Transport/bindning: hemoglobin, albumin, transferrin
- Kolloidosmotiskt tryck – albumin
- Hormoner
- Regulatorisk funktion – enzymer
- Enzyminhibitorer
- Koagulationsfaktorer
Vilken är dessa funktioners gemensamma nämnare?
A
Funktioner av plasmaproteiner
10
Q
Metoder som används för proteinbestämning (känna till)
- Flera olika metoder för att bestämma plasmaproteiner
- Mäta aktivitet – enzymbaserade metoder
- Immunogenictet. immunkemiska metoder (turbidimetri och nefelometri)
- Fysiska egenskaper - kromatografi
Vilka två metoder föreställer bilderna?
A
- Fysiska egenskaper – elektrofores (bilden till höger) som är bra för att se fraktionen av olika proteiner, baseras på laddning (negativt laddade går längst)
-
Immunfixation – första bilden
- kompletterande analys till S/U-proteinprofil som kan utföras på såväl serum som urin. Den används bl.a. för att typ-bestämma nyupptäckta M-komponenter men även för att bekräfta frånvaro/närvaro av mindre M-komponenter
11
Q
Vilka viktiga akutfasproteiner har vi och när stiger de?
A
- Proteiner vars synteshastighet ökar mkt i samband med inflammation då cytokiner (IL-6) stimulerar lever att producera CRP och alfa-1-antikymotrypsin som bägge stiger ovan referens inom 8-10 timmar (T1/2 = < 24h)
- Efter mer än ett dygn stiger orosomucoid, haptoglobin, alfa-1-antitrypsin och fibrinogen (T1/2 = 3-6 dagar
- C3, C4, ceruloplasmin ännu senare
- Ig-reaktion > 3 veckor
12
Q
Vilka viktiga negativa akutfasproteiner har vi?
A
- Albumin, transferrin, transtyretin och minskar
13
Q
Vad kan vi bestämma med hjälp av proteinprofilen?
A
- Lätt till kraftig inflammation kan bestämmas
- Olika mönster på akutfasproteinerna
- Harmoniskt
- Stödjevävnadslinje
- Leverlinje
- Mönster som vid tarmengagemang, kortisonbehandling och/eller sänkt GFR
- Inflammation och samtidig hemolys (mjältengagemang osv)
14
Q
Transtyretin (prealbumin)
- Syntes: lever, också i plexus choroideus
- T ½ ca 1,5 dag
- Binder och transporterar ca 10 % av tyreoideahormoner (T3 och T4), lägre affinitet för tyroxin än TBG (tyroxinbindande globulin), vitamin A transport genom att det binder retinol bindande protein RBP
Indikation?
När ses sänkta nivåer?
När ses höjda nivåer?
A
- Indikation – malnutrition och minskad levercellsmassa
-
Sänkta nivåer
- Malnutrition (sjunker ju mkt snabbare än albumin), inflammation, leversjukdom (minskad levercellsmassa), östrogenbehandling, tyreoideasjukdom och njursjukdom (med ökad proteinförlust)
-
Höga nivåer
- Behandling med glucokortikoid, androgen, aspirin och vid kronisk njurpåverkan (CKD).
15
Q
Albumin (äggvita)
- Syntesen i lever regleras i första hand av det kolloidosmotiska trycket (när det sjunker stiger produktion)
- T ½ 20 dagar, relativt stabilt protein jämfört med andra plasmaproteiner. Albumin i plasma 36-48 g/L medan lymfa 10-30 g/L
- Negativt laddad och repelleras i glomeruli
- Katabolismen sker via pinocytos i olika vävnader med degradering till aminosyror
- Funktion: upprätthåller det kolloidosmotiska trycket (står för 80 %). Har låg MW men hög plasmakoncentration. Transportprotein (ex fettsyror, billirubin, Ca, Cu, Zn, många farmaka)
Indikation?
När sjunker albumin?
När ökar albumin?
A
- Indikation – Ingår i vätskebalansstatus (sjunker vid övervätskning), sjukdomar med proteinförlust/ påverkad proteinsyntes, oklara ödem
-
Sänkta nivåer
- Inflammation, dålig nutrition, leverpåverkan, ökad katabolism, syntesdefekt, proteinförluster, ödem och ascites
-
Ökade nivåer
- Koncentration ökar upp till 10% vid stående ställning då vätska tar sig extravasalt (ligg vid provtagning, vid dålig hydrering och förlängd tonicum applikation
16
Q
Haptoglobin
- Syntes i levernSyntes är stimulerad av inflammation,
- T ½ ca 5 d
- Glykoprotein med 2 lättta (alfa), och tunga (beta) kedjor, Variabilitet i alfakedjor ger olika fenotyper. Olika typer (Hp1-1, Hp 1-2, HP 2-2) varav vissa bildar polymerer
- MW Hp 1-1 98 kDa
- Funktion: binder hemoglobin irreversibelt och komplexet elimineras av hepatocyter (t ½ ca 10-30 min (haptoglobin skyddar njurar och spara järn), vid mer hemoglobin (hemolys ex) i plasma sjunker haptoglobin mkt (ev till omätbara nivåer)
Höjda nivåer vid?
Sänkta nivåer vid?
A
-
Höjda nivåer
- Inflammation, gäller framför allt bindväv/stödjevävnad (led/muskel), kan kvarstå 1-2 veckor efter att inflammation klingar av
-
Sänkta nivåer
- Hemolys, intravasalt eller extravasalt (till ej mätbara koncentrationer)
- Processer som engager lever och mjälte
- Barn upp till 13 års ålder kan ha normalt låga värden
17
Q
Orosomukoid
- Glykoprotein med hög halt av kolhydrat (slemmigt protein), syns ej vid elfores (färgas inte)
- Syntes: levern, kan ske i lymfocyter också, MW 45 kDa
- Funktion: inte helt känd, binder vissa basiska LM, nedreglering av immunrespons och trombocytaggregation
Indikation?
Stiger vid?
Sjunker vid?
A
- Indikation: kartläggning av inflammatoriska aktiviteter
-
Stiger vid
- Inflammation (aktufasprotein), tillsammans med haptoglobin och fibrinogen vid inflammation i stödjevävnad (muskler och leder)
- Glukokortokoider (kortisonbehandling)
-
Sjunker vid
- Proteinförlust i tarm eller njurar (nefrotisk syndrom), filtreras mer än albumin
- Levercirros (nedsatt leverfunktion)
- Östrogentillförsel (P-piller) – ej patologiskt
18
Q
Transferrrin
- Syntes i lever, beroende på järntillgång
- T ½ 8 dagar
- Transportprotein för Fe3+ (två st), transporterar järn med mkt hög affinitet (fritt järn är toxiskt), normalt mättad med Fe till ca 1/3 (transferrinmättnadsgrad) vilket sjunker vid järnbrist men transferrin ökar vid järnbrist
- MW 80 kDa
- Receptorer för komplexet finns på många celler, framför allt erytropoesens celler och på cellerna till trofoblastvilli i placentra, finns även löslig i plasma, bra mått på erytropoetisk aktivitet
Indikation?
Ökar vid?
Sjunker vid?
A
- Indikation – utredning av oklar anemi, misstanke om hemokromatos (tillsammans med serumjärn)
-
Ökar vid
- Järnbrist, östrogen, anabola steroider
-
Sjunker vid
- Inflammation, malnutrition
- Långvarig alkoholkonsumtion ger ett kolhydratfattigt transferrin (CDT)
19
Q
Vad förmedlar bilden?
A
- Långvarig alkoholkonsumtion ger ett kolhydratfattigt transferrin (CDT)
20
Q
Ceruloplasmin
- Syntes i levern, mindre syntes sker även i makrofager och lymfocyter
- T ½ ca 4-5 dagar
- Funktion: transportprotein för koppar (ca 95 % av plasma Cu), oxidering av Fe2+ till Fe3+ som sedan binder transferrin
Indikation
Stiger vid?
Minskar vid?
A
- Indikation: utredning av oklar leversjukdom eller neurologiska symptom
-
Stiger vid
- Inflammation, levercellsskada och olika neoplastiska tillstånd, och östrogenpåverkan (p-piller, graviditet)
-
Låga värden
- Mb Wilson, kopparbrist, Menkes syndrom, malnutrition, malabsorption
21
Q
Fibrinogen
- Syntes i lever, glykoprotein
- T ½ ca 3-5 dagar
Stiger vid?
Minskar vid?
A
-
Stiger vid
- Inflammation, ffa bindvävsskada, kan kvarstå 3-4 veckor t ex operativa ingrepp, nefrotisk syndrom (kan då även tappa ut fibrinogen), kroniska infektioner, graviditet och östrogenterapi
-
Minskar vid
- Ökad konsumtion, fibrinolytiska läkemedel, grav levernedsättning
22
Q
Var syntetiseras CRP, hur lång är halveringstiden och vilken är dess funktion?
A
- Syntes i lever
- T ½ 19 h
- Okänd fysiologisk funktion, indirekt aktivering av komplementsystemet (klassiska vägen)
23
Q
Hur snabbt efter en inflammation ökar CRP?
A
6-8 h
24
Q
C-reaktivt protein (viktigt)
- Syntes i lever
- T ½ 19 h
- Okänd fysiologisk funktion, indirekt aktivering av komplementsystemet (klassiska vägen)
- Receptorer för CRP finns på T-lymfocyter
- En tidig inflammatorisk markör (6-8 h), ökar kraftigt
Indikation?
Stiger vid?
A
-
Indikation: använda ffa vid differentiering mellan bakterier och virus vid febrila tillstånd samt behandlingsuppfölning av bakteriell infektion
- Sällan över 50 vid virus
-
Stiger vid
- Inflammatoriska sjukdomar inklusive maligniteter (ibland) men även vid vävnadsskada orsakad av trauma eller operation
29
Q
Immunoglobuliner
- Varje antikroppsbildande cellklon syntetiserar immunoglobinermolekyler av en och samma struktur och med specifik antigenbindande förmåga
- Normalt finns ett mkt stort antal
- 5 olika Ig-klasser (G, A, M, D och E), dessa är tunga kedjor
- Kappa eller lambda lätta kedjor
Vilka av Ig-klasserna är monomerer, bildar dimer och pentamer?
A
- IgA kan bilda dimer och IgM kan bilda pentamer (patienter med höga nivåer av IgM får hög viskositet)
30
Q
Immunoglobuliner
- Varje antikroppsbildande cellklon syntetiserar immunoglobinermolekyler av en och samma struktur och med specifik antigenbindande förmåga
- Normalt finns ett mkt stort antal
- 5 olika Ig-klasser (G, A, M, D och E), dessa är tunga kedjor
- Kappa eller lambda lätta kedjor
- IgA kan bilda dimer och IgM kan bilda pentamer (patienter med höga nivåer av IgM får hög viskositet)
Subklasser av IgG är mest intressanta, står för 80 %, finns IgG1-4, vad är viktigt att tänka på i detta avseende?
A
Kan ha normal nivå av IgG men kan ändå ha brist av t ex IgG2, viktigt att testa subklasser
31
Q
Hur ser vi skillnad på polyklonal och monoklonal stegring av immunoglobuliner?
A
- Polyklonal (olika kloner) - vid elektrofores ses att IgG är lite olika då inget band ses längst ner utan mer utstruket (se pekare på bild)
- Monoklonal - vid elektrofores ses tydligt band (M-komponent) vilket tyder på att samma klon gör samma typ av immunoglobuliner (ex vid malignt myeolom), ses också tydlig topp (spike på bilden)
34
Q
-
Immunoglobuliner stegring
- Polyklonal
- Kraftig selektiv IgG-stegring kan ses ??
- Kan också ses selektiv stegring av IgA eller ex IgM som tyder på andra sjukdomar
- Vid elektrofores ses att IgG är lite olika då inget band ses längst ner utan mer utstruket (se pekare på bild)
- Polyklonal
När ses kraftig stegring av IgG?
A
SLE, tumörsjukdom, Sjögrens symptom
36
Q
Immunoglobuliner stegring
Monoklonal ökning (M-komponent), alltid patologisk
- Vid elektrofores ses tydligt band (M-komponent) vilket tyder på att samma klon gör samma typ av immunoglobuliner (ex vid malignt
När kan denna ses?
A
- Myelom
- Mb Waldenström
- Vid andra lymfom och blodmaligniteter
- Vid amyloidos
37
Q
Multipelt myelom
- Malign tumörsjukdom i benmärgen orsakad av klonal proliferation av plasmaceller
- I Sverige rapporteras ca 660 fall/ år
- Vanligen insjuknar äldre personer (över 65 år), sporadiska fall i 20-års åldern
- Sjukdomen är något vanligare hos män än kvinnor
Vad ses hos 90 % av dessa?
A
M-komponent ses hos 90 % av patienterna, oftast IgG eller IgA
- Sedan får man fylla på med vad som talar för myelom
- Hyperkalcemi (skelett bryts ner), anemi (tar över platsen för hematopoes), njurpåverkan (Bence-Jones urinemi orsakar skada)
- Ökad halt B-celler i benmärg
- Röntgenologisk lokal skeletturkalkning
- Ökad halt plasmaceller i benmärg (som ofta har patologisk morfologi)
- Stor M-komponent (IgG >15 g/L, IgA eller IgM > 10 g/L
- Signifikant Bence-Jones proteinuri
43
Q
Vad tyder nr 2, nr 5 och nr 10 på?
A
- Bilden visar normal; 1, 2, 3, 4, nr 5 har mkt albumin/transferrin vilket tyder på glomerulär proteinuri, nr 10 visar lite albumin men mkt små proteiner vilket tyder på tubulär proteinuri
48
Q
Vad innebär Bence-Jones proteinuri?
Hur kan vi konstatera detta?
När kan vi se detta?
A
- Utsöndring av mononukleala fria lätta kedjor (kappa eller lambda) i urinen
- Kappa/pambda < 1 eller > 4
- Monoklonalt band i urinelektroforesen (M-komponent)
- Dessa filtreras i tubuli och orsakar skada i höga halter i tubuli
- Kan ses vid light chain-myelom och även vid MGUS (låga nivåer)
49
Q
Vad tyder denna bild på?
A
Bence-Jones proteinuri
- Utsöndring av mononukleala fria lätta kedjor (kappa eller lambda) i urinen
- Varpå man kan titta i elektrofores eller proteinfraktionering
- Monoklonalt band i urinelektroforesen (M-komponent)
55
Q
Vad är detta?
A
- Friska fynd, tubuliceller, övergångsepitel (litet antal ok), hår, klädfibrer, sperma, hyalina cylindrar som är genomskinliga (protein i tubuliceller)
56
Q
Vad är detta?
A
- Erytrocyter (Musse Piggöron), kommer från njure (ej från urinvägar), färdats så pass långt att de fått konstigt utseende
- Detta tyder på patologi (glomeruonefrit, inflammation i glomeruli, vaskulit)
57
Q
Vad tyder detta på i urinsediment?
A
Infektion
58
Q
Vad är detta?
A
- Krystaller vid komplement (utfällningar, hög koncentration av något, t ex Ca2+)
59
Q
När ser vi dessa?
A
Endast vid glomerulonefrit
61
Q
Vad tänker du om tidsförlopp och cellcylindrar?
A
- Beroende på tidsförlopp kan cellcylindrar vara
- Grovgranulerade (mer kornigt), mer i början av sjukdomen
- Fingranulerade (talar för att cellen brutits ner, sjukdomen är i senare förlopp)
- Vaxcylinder (indikerar mer långt gången sjukdom) – bilden
62
Q
En klasskompis hävdar att det även vid tubulär proteinuri förekommer lätta immunoglobinkedjor i urin, men det låter ju konstigt (och han fick faktiskt IG på senaste tentan), så detta kan du förkasta eller?
A
Nej, för det första kanske han hade en dålig dag på tentan och för det andra kan det förekomma polyklonala lätta immunoglobulinkedjor i urin
