Practicum 13

Question 1

Waarop is serologische diagnostiek gebaseerd?

Answer 1

OP het aantonen (kwalitatief en/of kwantitatief) van specifieke antilichamen tegen een bepaalde infectieziekte die gevormd zijn in het serum van een patiënt. Serologisch onderzoek wordt met name toegepast in de diagnostiek van infectieziekten. Niet alleen de aanwezigheid van antilichamen kan worden gemeten in het serum, ook de hoeveelheid antilichamen is aan te tonen.

Question 2

Hoe druk je de hoeveelheid antilichamen uit?

Answer 2

In het begrip titer. Dit is de hoogste verdunning van het serum waarin nog antilichamen worden aangetoond.

Question 3

Wat toon je aan als je een significante titersteiging aantoont?

Answer 3

Het lichaam is bezig met de productie van antilichamen.

• De aanwezigheid van antilichamen in een enkel monster kan ook gevolg zijn van eerdere infectie
• Ook na vaccinatie worden antilichamen gevormd
• Testen kunnen positief zijn door de aanwezigheid van maternale antilichamen in het jonge dier

Question 4

Hoe voer je gepaarde sera uit?

Answer 4

Het eerste serum wordt afgenomen tijdens de acute fase van ziekte en een tweede serum van hetzelfde dier wordt 2 tot 4 weken later afgenomen. Dit betekent dat men lang moet wachten op de uitslag. Andere namen voor het eerste serummonster: preserum of acute fase serum. Andere namen voor het tweede serummonster: postserum of reconvalescente serum.

Question 5

Wat is de rol van IgM?

Answer 5

De aanwezigheid van de IgM subclasse is een aanwijzing voor een recente infectie of vaccinatie. Deze verschijnen het eerst na een primaire infectie en dalen tot lage titers binnen enkele maanden na infectie. Bij de diagnostiek van de ziekte van Weil (leptospirose) maken we onder andere gebruik van detectie van IgM antilichamen.

Question 6

Hoe kun je gevaccineerde dieren onderscheiden van geïnfecteerde dieren?

Answer 6

Door het gebruik van markervaccins of DIVA (differentiating infected and vaccinated animals) vaccins.

Question 7

Waarop berusten serologische methoden?

Answer 7

OP e reactie van antilichamen in het serum tegen bekende antigenen waarbij de reactie op verschillende manieren wordt aangetoond.

Question 8

Waarvan zijn de relatieve gevoeligheden van serologische reacties afhankelijk?

Answer 8

De hoeveelheid antilichamen die noodzakelijk zijn voor een zichtbare reactie.

Question 9

Noem een aantal serologische methoden

Answer 9

• Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
• Hemagglutinatie inhibitietest (HI)
• Serum Neutralisatietest (SN)
• Immunofluorescentietest (indirect, IFA)
• Agargel precipitatietest (AGP) / Immunodiffusie

Question 10

Welke drie parameters zijn van belang om de betrouwbaarheid van een testresultaat te bepalen?

Answer 10

1. Sensitiviteit
2. Specificiteit
3. Prevalentie van de aandoening

Question 11

Sensitiviteit:

Answer 11

percentage positieve dieren dat ook als positief wordt herkent, zegt iets over het percentage vals negatieven. Vals negatieven worden meestal veroorzaakt door onvoldoende sensitiviteit. De hoeveelheid antilichamen in het monster is lager dan de detectiegrens.

Question 12

Detectiegrens

Answer 12

de kleinste hoeveelheid van een agens of antistof die een bepaalde test nog in een bepaalde hoeveelheid monster kan detecteren.

Question 13

Specificiteit:

Answer 13

percentage negatieve dieren dat ook als negatief wordt herkent, zegt iets over het percentage vals positieven.

Question 14

Gouden standaard:

Answer 14

een andere test waarmee het werkelijk positief of negatief zijn van een dier wordt bepaald.

Question 15

Prevalentie:

Answer 15

het gedeelte van de populatie dat op een bepaald moment de bewuste ziekte of infectie heeft. Dit bepaald de trefkans van de bepaling.

Question 16

Positief voorspellende waarde:

Answer 16

het percentage van de dieren met een positieve uitslag dat ook werkelijk positief is.

Question 17

Negatief voorspellende waarde:

Answer 17

het percentage van de dieren met een negatieve uitslag dat ook werkelijk negatief is.

Question 18

Door welke ziekteverwekkers kan niesziekte worden veroorzaakt? Wat zijn de verschijnselen?

Answer 18

Meerdere soorten ziekteverwekkers. Belangrijkste: Calicivirus, Feline Herpes Virus en bepaalde bacteriën (onder andere Bordetelle bronchiseptica). De ziekteverschijnselen zijn zeer gelijk en er is vaak sprake van een menginfectie. Ontstoken gen, niet willen drinken en eten, niezen, kwijlen. In de praktijk ga je opzoek naar meerdere verwerkkers via bijvoorbeeld PCR of virus/bacteriekweek of een reactie van de gastheer op de aanwezigheid van het agens.

Question 19

Hoe werkt ELISA?

Answer 19

Op een plaat wordt een virus(antigeen) gecoat waaraan eventuele antilichamen zullen hechten. Vervolgens wordt het serum van de patiënt er overheen gedaan. Er wordt gewassen. Dan worden anti-antilichamen er aan toegevoegd. Ook deze worden weggewassen. Daarna wordt substraat toegevoegd. In het geval van een positieve test vindt vervolgens een kleurreactie plaats.

Question 20

FIV

Answer 20

= Feline Immunodeficiëntie Virus. Dit is een Lentivirus dat kattenaids veroorzaakt. Dit is een persisterende infectie die niet kan worden overwonnen. FeLV kan daarentegen wel worden overwonnen.

Question 21

Hoe werkt de diagnostiek van FIV?

Answer 21

Sneltest waarmee je binnen 15 minuten weet of er antistoffen tegen het agens in het bloed van e patiënt aanwezig zijn.

Question 22

Hoe werkt de SNAPtest voor FIV en FeLV?

Answer 22

Er wordt getest naar FIV antilichamen en naar FeLV antigenen. Er moet een negatieve controle zichtbaar zijn en een positieve controle. Kijk in de bijsluiter wat het moet zijn.

Question 23

Welke conclusie kun je trekken met betrekking tot een positieve uitkomst voor FIV van een ELISA van een individuele kat in Nederland?

Answer 23

De prevalentie in de populatie is erg laag. Hierdoor is de kans dat een positieve test vals positief is groter dan de kans dat de test werkelijk positief is.

Question 24

De ziekte van Weil (leptospirose) is een…

Answer 24

Zoönose! Kan bij honden en mensen bij onvoldoende behandeling leiden tot de dood.

Question 25

VMDC

Answer 25

Veterinair Microbiologisch Diagnostisch Centrum