LAB England Flashcards
- Hur är människans genom organiserat?
46 kromosomer (23 par), varav 22 autosomer och 1 könskromosompar (XX hos kvinnor, XY hos män).
- Vad är en allel och hur påverkar den fenotypen?
En allel är en variant av en gen. Dominanta alleler uttrycks i enkel uppsättning, recessiva kräver två kopior.
- Vad är en autosomal recessiv egenskap?
En egenskap som endast uttrycks om individen är homozygot recessiv (aa), t.ex. sickelcellanemi.
- Hur bestäms en individs genotyp vid sjukdomar som sickelcellanemi?
Genotypen (AA, Aa, aa) avgörs genom DNA-analys, där endast aa ger sjukdomen.
- Varför används PCR i experimentet?
PCR amplifierar DNA, vilket gör det möjligt att analysera specifika genvarianter.
- Varför krävs restriktionsenzymet BamHI?
PCR-fragmenten är lika stora (6500 bp). BamHI klyver endast allelen d, vilket möjliggör separation vid gelelektrofores.
- Hur fungerar gelelektrofores för att skilja genotyperna?
Klippt DNA (dd) ger två band (2500 bp + 4000 bp), oklippt DNA (DD) ger ett band (6500 bp), och heterozygot (Dd) ger tre band.
- Hur kan du bestämma en individs genotyp utifrån gelelektrofores-resultat?
Jämförelse av bandmönstret med DNA-Ruler avgör om individen är DD, Dd eller dd.
- Vilken roll har loading dye vid elektrofores?
Gör DNA synligt, förhindrar att det flyter bort och fungerar som markör vid migration.
- Varför är det viktigt att koppla elektroforesen korrekt (+/-)?
DNA är negativt laddat och vandrar mot den positiva elektroden.
- Varför används Toluidine blue och etanol vid färgning?
Toluidine blue binder till DNA, etanol sköljer bort överskottsfärg för tydligare band.
- Hur kontrollerar du att analysen är korrekt?
Jämför varje DNA-band med standard-DNA-linjalen och säkerställ förväntade bandmönster.
- Vad kan ett oväntat resultat, t.ex. individ 14, indikera?
Misstag i pipettering, enzymfunktion, mutationer eller förväxling av prover.
- Hur skulle en mutation i restriktionsstället påverka analysen?
Om BamHI inte kan klyva d-allelen, skulle dd likna DD och ge falskt resultat.
- Hur skulle ett fel vid PCR påverka resultaten?
Misslyckad amplifiering ger inget band, vilket kan misstolkas som ett negativt prov.
