Insulinproduktion Flashcards
🧬 Framställning av syntetisk plasmid
• 🔬 cDNA från mänskligt insulin mRNA
• 💻 DNA-sekvensering för insulin-genen
• 🧫 Plasmid som vektor
• ✂️ Restriktionsenzym klipper plasmid
✂️ Klippning med restriktionsenzym
• 🔑 Enzym klipper på specifika ställen
• 🧬 Insulingen klipps ut från cDNA
• ⚡ Skapar klara ändar (sticky ends) för sammanfogning
🔗 Ligation
• 🧬 Insulingen kopplas till plasmiden
• 🔗 DNA-ligas binder samman
• 🧫 Ny plasmid med insulin-gen
💉 Transformation
• 🧫 Bakterier (t.ex. E. coli) tas upp plasmid
• 🔥 Värmechock eller elchock för att öppna bakterier
• 🔬 Plasmid i bakteriecellen
🌱 Uttryck av insulin-genen
• 📡 Bakterien börjar producera insulin
• 💪 Insulin extraheras från bakteriekulturer
🧫 Selektion av transformanter
• 🧬 Plasmid med selektionsmarkör
• 🌱 Antibiotika används för att välja ut bakterier som tagit upp plasmiden
🧬 Produktion av insulin
• 💉 Insulin i stor mängd
• 🔬 Renas och används som läkemedel