Begrepp 5- GMM och pGLO- transformation Flashcards
Genetiskt modifierad mikroorganism (GMM)
Mikroorganism med ändrat DNA för nya egenskaper
Transformation
Process där celler tar upp främmande DNA.
Plasmid
Liten, cirkulär DNA-molekyl som kan överföras mellan bakterier.
pGLO-plasmid
Plasmid med GFP-gen och antibiotikaresistens.
GFP (Green Fluorescent Protein)
Fluorescerande protein från maneter, används som markör.
Antibiotikaresistensgen
Gen som gör bakterier motståndskraftiga mot antibiotika.
Arabinospromotor (araC)
Reglerar GFP-uttryck beroende på sockerarten arabinos.
Kompetenta celler
Bakterier behandlade för att lättare ta upp DNA.
Heat shock (värmechock)
Snabb temperaturändring som hjälper DNA-upptag.
Selektionsplatta
Agarplatta med antibiotika för att identifiera transformerade bakterier.
Agarplatta
Näringsmedium för odling av bakterier i laboratorium.
Reporter-gen
Gen (ex. GFP) som visar om transformation lyckats.
Rekombinant DNA
DNA från olika organismer sammanfogat i labb.
Elektroporation
Metod där elektriska pulser gör cellmembranet genomträngligt.
Bioteknisk tillämpning av GMM
Användning av GMM inom medicin, jordbruk och industri.
Rekombinant plasmid
En rekombinant plasmid är en syntetisk plasmid där ett främmande DNA har infogats, vilket används för att uttrycka eller studera gener i celler.
Plasmid
En plasmid är ett litet, cirkulärt DNA-molekyl som finns i bakterier och ibland i andra organismer, och som kan replikeras självständigt från kromosomalt DNA.
Isolering av insulin-genen
Insulin-genen (genet för humant insulin) isoleras från människans DNA med hjälp av restriktionsenzym.
Klippning av plasmid
En plasmid, en liten cirkulär DNA-molekyl, klipps med samma restriktionsenzym för att skapa kompatibla ändar där insulin-genen kan sättas in.
Införande av insulin-genen
Den isolerade insulin-genen sätts in i den klippta plasmiden genom en ligeringsreaktion, där enzymet DNA-ligas används för att binda samman DNA-strängarna.
Transformation
Den rekombinanta plasmiden införs i en bakteriecell (oftast Escherichia coli) genom en process som kallas transformation, där bakterien tar upp den nya plasmiden.
Selektiv odling
Bakterier som framgångsrikt tagit upp plasmiden selekteras genom odling på en agarplatta med antibiotika. Bakterier utan plasmiden kommer inte att överleva.
Expression av insulin
De transgena bakterierna odlas i en lämplig näringslösning, och insulin-genen uttrycks, vilket gör att bakterierna börjar producera insulin.
Isolering och rening av insulin
Insulin extraheras och renas från bakterierna genom olika metoder, såsom affinitetsrening eller gel-filtrering, för att få fram rent humaninsulin.
Kvantitativ analys
För att säkerställa att insulinproduktionen är korrekt, analyseras den producerade insulinet med tekniker som HPLC (High-Performance Liquid Chromatography).
Rekombinant DNA-teknik
Teknik som används för att förena DNA från olika källor, vilket möjliggör skapandet av GMM.
Antibiotikaresistensgen
– En gen som ofta används som selektionsmarkör i GMM för att identifiera mikroorganismer som har genomgått genetisk modifiering.
Biosäkerhet
Åtgärder och riktlinjer för att säkerställa att GMM inte orsakar oönskade effekter på miljön eller människors hälsa.
Fermentering
Bioprocessen där GMM används för att producera produkter som alkohol, antibiotika eller enzymer genom jäsning.
Biosyntes
En biologisk process där GMM används för att syntetisera kemikalier, läkemedel eller andra produkter, vilket utnyttjar mikroorganismers biologiska funktioner.
