Diagnostic de laboratoire des infections Flashcards
Nomme les 3 phases du cheminement diagnostique en microbiologie infectiologie
pré-analytique
analytique (avec survol des cultures)
post-analytique
Décrit la phase pré-analytique
ex: un pt qui consulte avec sx qui suggère une maladie infectieuse
prescription de prélèvements selon le cas (examens, cultures, PCR, sérologie)
les prélèvements nécessite la requête du prescripteur et une double identification du spécimen, ensuite acheminement au lac, il faut aussi connaitre les germes recherchés et celles qui nécessitent une demande spéciale
Vrai ou faux
la qualité du prélèvement pour la culture est indispensable pour un résultat ddx de qualité
vrai (notions de flore pathogène, colonisante, contaminante)
Décrire la phase analytique
examen direct sur prélèvements
pour les cultures bactériennes courantes : ensemencement/incubation, isolement/épuration (pour avoir une culture pure), lecture périodique (au 24h pour les pathogènes usuels)
Comment on identifie les cultures pures
aspect des colonies
hémolyse sur gélose sang (beta, alpha)
test biochimique rapide (ex: catalase, oxydase)
Aspect au gram des colonies
si nécessaire :
-analyse biochimique de l’isolat
-Malditof (spectromètre de masse)
-antibiogramme : évalue la sensibilité des bactéries aux antibios
Décrire la phase post-analytique
émission du rapport final
interprétation finale du médecin prescripteur
(porter attention si liquide stérile à savoir reconnaitre la flore normale)
Nomme les 2 notions d’importance dans le processus analytique
validité du résultat
délai de réalisation analytique
Sur quoi est basée la coloration de Gram
différence de paroi entre Gram + et Gram -
Quelles sont les limites du gram pour la sensibilité
densité bactérienne du prélèvement
résolution optique
présence ou non de paroi bactérienne
type de paroi bactérienne
Les bactéries visibles au Gram peuvent être affectées par quoi notamment
conditions de culture
exposition préalables au antibios
propriété intrinsèque à se décolorer
Nomme quelques utilité du Gram
reconnait rapidement les bactéries possiblement pathogènes
évalue la présence ou l’absence de flore intestinale
évalue la réponse inflammatoire (coloration des globules blancs)
quantifie de façon relative les polynucléaires VS les cellules mononucléose, aide à distinguer infection bactérienne VS virale
Pour les hémocultures reçues cmb de % des bouteilles seront positives dans les premieres 48h d’incubation
90%, résultat positif est jugé critique , appel au médecin prescripteur
Qu’est ce que la coloration d’acido-alcoolo-résistance et à qui s’adresse cette coloration
pour les bactéries dont la paroi est riche en acides mycoliques qui sont difficile à colorer au Gram (BAAR, mycobactéries tuberculeuse et non tuberculeuse)
c’est une coloration où les bactéries résistent à une décoloration par un alcool acidifié
Nomme 2 colorations usuelles qui s’adresse à la recherche de mycobactéries
Ziehl-Neelson (à chaud)
Kinyoun (à froid)
Qu’est ce que Kinyoun modifié
emploi d’un décolorant plus doux, surtout pour la recherche de certaines espèces partiellement acido-alcoolo-résistante
Qu’est ce que l’auramine
des fluorochromes non spécifique qui se lient aux acides mycoliques et résistent à une décoloration par l’alcool acidifié
un résultat positif : donne des bactéries fluorescentes jaunâtres sur fond noirâtre
Dit si on peut rechercher Nocardia et mycobactéries avec Ziehl VS Kinyoun modifié
Mycobactéries : Z: + K: +
Nocardia : Z: - ou +- K: +
Décrit l’immunofluorescence
Ac combinés à un marqueur fluorescent qui se lient à un antigène spécifique, observation au microscope à fluorescence
résultat positif : bactérie vert pomme sur fond noirâtre
Décrire l’utilité de KOH sur des spécimens cliniques
KOH 10% pour digérer la kératine et rendre plus visibles les éléments fongiques mycéliens
Qu’est ce que l’examen sur fond noir
utilise la diffraction de la lumière pour mettre en évidence les tréponèmes, direct au microscope
résultat positif : bactéries brillantes sur fond noir
se fait peu mtn
Qu’est ce que le calcofluor
blanchiment (azurant optique) qui se lie à la cellulose et à la chitine
utilisé dans la détection des champignons et des amibes pathogènes
résultat positif : éléments fongiques blanc bleutés à verdâtre fluorescents sur fond noirâtre
risque de faux positif
décrire le test de détection rapide d’antigènes
plusieurs méthodes développés pour détecter rapidement la présence d’antigènes
Décrire les test biomoléculaires (PCR)
utilisation d’amorce et amplification d’une partie du gÉnome de l’agent microbien à identifier
détection de la portion du génome amplifié
Qu’est ce que la sérologie
mettre en évidence des preuves indirectes de la présence d’un agent infectieux, détection anti-corps dans le sérum, surtout utile pour infection virales et parasitaires
ddx infection aigue ou dépistage immunité
Lorsque l’on effectue un dosage de IgM qu’est ce que cela veut dire
apparition en phase aigue de la maladie
nécessite un seul sérum pour ddx
Lorsque l’on effectue un dosage de IgG qu’est ce que cela veut dire
apparition en phase de convalescence de la maladie
nécessite 2 sérum pour ddx
Différence entrée IgG neutralisants ou non
neutralisants : signe immunité à long terme
non: signe exposition sans immunité
