BCM 1521 - 4 Flashcards

1
Q

Quel solvant organique est utilisé pour précipiter l’ADN?

A

De l’éthanol ou de l’isopropanol

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2
Q

Une ADN est est chargé positivement ou négativement?

A

négativement

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3
Q

Comment sépare-t-on l’ADN des protéines?

A

Mélanger du phénol à la solution aqueuse où les acides nucléiques vont se trouver dans la phase aqueuse et les protéines dans la phase phénolique.

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4
Q

Quel gel utilise-t-on pour purifier les acides nucléiques?

A

Les gels d’agaroses

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5
Q

Qu’utilise-t-on pour neutraliser les nucléases retrouvées dans les cytosol or whereever?

A

Du EDTA

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6
Q

Quel colorant est utilisé pour colorer des électrophorèses d’ADN?

A

bromure d’éthidium

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7
Q

En ordre croissant de rapidité quel forme de plasmide se déplace le plus vite en électrophorèse. (3)

A

Circulaire < supercoiled < linéaire

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8
Q

Quel échangeur d’ions est utilisé pour purifier de l’ADN?

A

Échangeur d’anions

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9
Q

Qu’est-ce que les chromatographies d’affinité purifie comme nucléotides?

A

Les ARNm grâce à la queue poly(A)

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10
Q

Quel soluté est utilisé pour former un gradient pour l’ultracentrifugation d’ADNs?

A

chlorure de césium

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11
Q

Quelle unité est utilisé en centrifugation?

A

Les Svedbergs (S)

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12
Q

Sur quel facteur la centrifugation différentielle se base?

A

La taille des organelles/ ou macromolécules

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13
Q

Qu’est-ce qu’une centrifugation avec gradient de densité?
Comment cela impacte la centrifugation?

A

Il s’agit d’un centriguation où la solution possède un certaine concentration en sucrose ou en chlorure de césium.

Cela augmente le pouvoir de résolution de la centrifugeuse.

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14
Q

Dans quelles types d’ultracentrifugations les gradients de densités peuvent être appliqués? (2)

A
  1. Ultracentrifugation zonale
  2. Ultracentrifugation en gradient de densité à l’équilibre (isopyscnique)
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15
Q

Sur quel facteur l’ultracentrifugation zonale se base?
Comment cela est appliqué dans la purification de protéines?
Quel soluté utilise-t-on?

A
  • Elle se base principalement sur la masse, alors il devient possible de séparer les protéines selon leur masse.
  • succrose
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16
Q

Sur quel facteur se base l’ultracentrifugation isopyscnique?
Quel soluté utilise-t-on?

A
  • La densité
  • Chlorure de césium
17
Q

Dans une ultracentrifugation isopyscnique, jusqu’où les particules se déplaces-t-elles?

A

Jusqu’à l’endroit où la densité de la solution = densité de la particule

18
Q

Pourquoi l’on ce sert de l’ultracentrifugation isopyscnique

A

Pour séparer des macromolécules qui possèdent une game de densité.
(acides nucléiques (plasmide vs ADN génomique et ARN totale) vs ribosomes et polysomes vs virus vs organites)

19
Q

Qu’est-ce que les RPM?

A

Rotations par minutes

20
Q

Qu’est-ce que les RCF?

A

Relative Centrifugal Force
Elle est exprimé en “g”