6.2 PCR (Diapositivas) Flashcards
¿Qué hace el cofactor MgCl2?
Aumenta la velocidad y eficiencia de la reacción
¿Para qué sirve el agua de PCR?
La reacción se debe llevar a cabo en una solución acuosa
¿El agua de PCR es agua destilada?
Nope, el agua de PCR es ultra-pura; no tiene DNAsas
¿Qué es el master mix?
Solución todos los componentes para hacer la PCR, menos el DNA molde
¿Para qué sirve el control positivo?
Indica cómo debería verse el resultado
¿Para qué sirve el control negativo?
Indica si hay contaminación
¿El master mix se hace sólo para la cantidad de tubos que se van a utilizar?
No, se prepara para un tubito extra
Termociclador
Cambia la temperatura por ciclos
Describa los ciclos de PCR
1-Desnatur inicial
2-CICLOS REPETITIVOS: Desnat, Hibrid, Elong.
3-Elogación final
La amplificación es…
Exponencial
Alu
¿En qué animales hay, y para qué sirve?
Hay miles de copias en los primates
Sirve como marcadores de evolución
Aplicaciones del PCR (5)
Diagnóstico prenatal Estudios forenses Estudios microbiológicos Detección de enfermedades Estudios filogenéticos
Tipos de PCR (3)
RT-PCR
qPCR
PCR multiplex
RT-PCR
Para hacer la amplificación se realiza una transcripción inversa, se usa para estudios de ARN
qPCR
PCR tiempo real, permite cuantificación de la cantidad existente de una secuencia específica de ADN o ARN
