4. Enzimas de restricción (manual parte 1) Flashcards
Enzimas de restricción
Proteínas que han sido aisladas de muchas bacterias.
¿Para qué sirven las enzimas de restricción?
Son una herramienta de gran importancia para la biología molecular ya
que son capaces de cortar el ADN
¿Cómo cortan las enzimas de restricción el ADN?
Reconocen secuencias específicas de nucleótidos llamadas “sitios de corte o de restricción” (tienen 4-8bp)
¿Otro nombre para las enzimas de restricción?
Endonucleasas, porque los sitios de corte les permiten cortar la doble hebra de ADN
¿Cómo son los cortes de las EdR?
Generalmente son escalonados en el sitio de restricción; o sea, producen fragmentos con extremos complementarios monocatenarios
Extremos complementarios monocatenarios
Extremos adhesivos
Característica de los extremos adhesivos
Siempre son complementarios sin importar la fuente del ADN
¿Para qué sirven los extremos adhesivos?
Permiten ligar segmentos de ADN de organismos diferentes para formar moléculas de ADN recombinante
Ejemplos del uso de las EdR (3)
Construir vectores, como plásmidos, para estudiar genes, producir prot recombinantes o clonar genes para crear organismos transgénicos
¿Es común que se creen extremos romos?
Dejar hebras de ADN monocatenarias no es común, pero sucede cuando la enzima hace el corte en la mitad de la secuencia
¿Las enzimas de restricción producen ADN de igual tamaño?
NO, producen de diferentes tamaños, generando patrones de corte específicos
¿Cómo se observan los patrones de corte?
Se observan mediante electroforesis en gel de agarosa
¿Para qué sirve la electroforesis en gel de agarosa?
Sirven como base para marcadores moleculares que permiten evidenciar diferencias genéticas como los RFLPs
RFLPs
¿Qué significa y para qué se utilizan?
Restriction fragment length polymorphism
Uno de los primeros marcadores utilizados para hacer DNA fingerprinting
La nomenclatura de cada enzima de restricción se basa en:
El nombre de la especie bacteriana de la cual la enzima fue aislada
