3.2 Extracción de ADN (diapositivas) Flashcards
¿Por qué se usan sales en la precipitación?
Porque las sales tienen cationes como Na o K que permiten reducir la repulsión entre las cargas negativas de las moléculas de ADN y permiten que todo el ADN precipite en conjunto
Funciones del ADN (3)
1-Almacenar información genética
2-Replicación y herencia
3-Expresión del código genético
¿Cómo se almacena la información genética?
En cómo están dispuestas las bases nitrogenadas
¿Cómo se expresa el ADN?
A través de intermediarios como el ARN
¿Por qué se estudia el ADN? (5)
1-Estudios genómicos 2-Evolución (genes homólogos) 3-Mutaciones 4-Diagnóstico y tratamiento de enfermedades 5-Biofarmacéuticos y nanotecnología
¿Es más fácil obtener ADN de una célula procariota o eucariota?
Procariota, porque en las eucariotas hay doble membrana que atravesar, incluso las células de las plantas se necesita romper la pared celular
Tipos de lisis (3)
Mecánica
Química
Enzimática
¿Con qué se realiza lisis química?
Se realiza con el jabón o detergente
¿Con qué se realiza lisis enzimática?
Proteinasa K
¿Con qué se realiza lisis mecánica?
Se congela o se aplasta la muestra
¿Con qué y cómo se precipita el ADN?
Con el etanol frío, el cual es hidrofílico y por eso deshidrata el ADN. El etanol tiene carga negativa, entonces no se va mezclar con el ADN (hidrofóbico) y por eso permite que precipite.
¿Qué es la resuspensión?
Conservar el ADN en agua u otro líquido (depende de la situación)
Las técnicas de extracción de ADN dependen de…
tipo de muestra, costo, tiempo, simplicidad, automatización
Absorbancia
Cantidad de luz que absorbe una muestra
Nanodrop ¿qué es?
Espectrofotómetro que mide la absorbancia dentro del espectro UV hasta el espectro visible (con 1-2ul de muestra)