TP Gènes et génomes Flashcards
qu’elle enzyme coupe l’ADN
enzyme de restriction
site de restriction
séquence nucléotidique spécifique palindromique (un palindrome = séquence d’ADN symétrique )
LIEU DE COUPE DE L’ADN
qu’obtient t’on quand l’ADN est coupé
fragment de restriction
electrophorèse
séparation des fragment d’ADN selon leur taille
piste de marqueur de poids moléculaire
ensemble de fragment d’ADN de taille connue
ADN linéaire
1 fragment de restriction en plus que 1 site de restriction
Exemple: 1 site de restriction → 2 fragments de restriction
ADN circulaire
même nombre de site et de fragment de restriction
pour séquencer un fragment d’ADN on …
on réalise une polymérisation d’ADN in vitro
Southern blot
électrophorèse d’ADNc, dénaturation+ hybridation avec sonde ADN*
c’est quoi ADNc
ADN complémentaire obtenue par réverse transcription des ARNm
Northern blot
électrophorèse des ARNm + hybridation avec une sonde d’ADNc*
La sonde ADNc monobrin fluorescente s’hybride avec l’ARNm, complémentaire du gène recherché
Western blot
électrophorèse des protéines + hybridation avec un Ac*
l’anticorps anti-protéine X (fluorescent) spécifique s’hybride avec la protéine recherchée X
hybridation in situ:
hybridation entre un ARNm dans la cellule et une sonde
But: déterminer dans qu’elle cellule s’exprime le gène X, dans une coupe ou un embryon
immunofluorescence
localise une protéine X au sein d’une cellule en injectant un anticorps fluorescent anti-protéine X
mutagenese et comparaison des phénotypes mutant et sauvage
Principe: muter un gène X par mutagenèse. la mutation affecte une gène X qui code pour une protéine X a fonction X
comparer le phénotype du mutant avec le phénotype sauvage en déduire la fonction de la protéine X non muté
