T4_Diagnóstico laboratorial em Virologia Flashcards

1
Q

Qual a colheita de amostra em virologia que não se faz em bacteriologia?

A

Zaragatoas

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Q

Quais as colheitas de amostras possíveis?

A

Zaragatoas
Serologia
Fezes em recipientes esterilizados (coprocultura)
Aspiração de secreções

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3
Q

Para que quadros clínicos usamos zaragatoas?

A

Zona de vesículas da varicela ou herpes - requer pressão para rebentar vesícula
COVID 19 - fazer aspiração da nasofaringe levaria a aerossóis

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4
Q

Para que quadros clínicos usamos serologia?

A

Miocardite & pericardite
Contudo, a serologia não é o melhor método para o diagnóstico agudo (os anticorpos demoram a surgir) MAS biopsia/colheita de derrame pericárdico é invasivo/não há derrame

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5
Q

Para que quadros clínicos usamos coprocultura?

A

Diarreias

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6
Q

Para que quadros clínicos usamos aspiração?

A

Infeções do trato respiratório

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7
Q

É possível diagnosticar uma pneumonia pneumocócica através de uma zaragatoa da nasofaringe? E nas infeções respiratórias virais?

A

Não porque somos frequentemente portadores de pneumococos
Sim porque não somos portadores e aquando de uma infeção respiratória baixa, os vírus estão presentes em todo o aparelho respiratório

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8
Q

Como é feito o transporte de amostras?

A

Até 48h
4ºC (refrigerado não congelado)
Normas de segurança (ex. COVID19 coloca-se tubo com secreções dentro de contentor dentro de outro contentor)

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9
Q

Quais os métodos de diagnóstico utilizados?

A

Exame cultural/isolamento = efeito citopatogénico nas células do laboratório
Pesquisa de Ag
Deteção do genoma
Serologia

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10
Q

Qual o método de diagnóstico não utilizado?

A

Microscopia eletrónica - só usado na investigação, não no diagnóstico

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11
Q

Qual o método de diagnóstico pouco utilizado? 2 exemplos de utilização para este método

A

Citologia = pesquisa de efeito citopatogénico do vírus nas células do doente (exame cultural é nas células do laboratório)
Papanicolau -> visualizar coilócitos causados pelo HPV
CMV -> visualizar células muito aumentadas

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12
Q

Em que meio é que os vírus não crescem? Porque?

A

Gelose sangue porque são parasitas intracelulares obrigatórios. Só crescem em cultura de células

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13
Q

Como é feito o exame cultural?

A
  1. Semear a amostra (ex: urina, LCR)
  2. Se a amostra tiver vírus, os vírus entram nas células e provocam alterações celulares - efeito citopatogénico do vírus.
  3. Visualização das alterações num microscópio invertido (tem as objetivas por baixo e permite ver o frasco inteiro e o efeito citopatogénico nas células da cultura celular)
  4. Confirmamos o resultado num microscópio de fluorescência
    Efeito citopatogénico = rastreio
    Imunofluorescência direta = confirmatório
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14
Q

Quais as vantagens do exame cultural?

A

Isolamento das estripes
Específico (imunofluorescência)

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15
Q

Quais as desvantagens do exame cultural?

A

Laborioso
Demorado
Perigoso

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16
Q

Qual a aplicação principal de exames de cultura?

A

Laboratórios de referência para estudos epidemiológicos

17
Q

Qual o princípio da pesquisa de Ag?

A

Deteção de Ag de vírus por métodos imunoenzimáticos, imunocromatográficos, imunofluorescência ou imunoperoxidase.
Atualmente por imunocromatográficos

18
Q

A pesquisa de Ag é utilizada principalmente para?

A

Vírus respiratório & gastroenterites

19
Q

Quais as vantagens da pesquisa de Ag?

A

Rápido (15-30min)
Económico
Não requer treino por parte do técnico
Boa especificidade

20
Q

Quais as desvantagens da pesquisa de Ag?

A

Pouca sensibilidade
Possível ter teste negativo e infeção (relacionado com pouca sensibilidade)

21
Q

Quais as principais formas utilizadas para a deteção do genoma?

A

Amplificação de ácidos nucleicos
PCR & RT-PCR

22
Q

Qual a diferença entre PCR e RT-PCR?

A

PCR = normal (vírus de DNA)
RT-PCR = transcriptase reversa logo usado para vírus de RNA

23
Q

O que é o multiplex PCR?

A

Pesquisa na mesma reação vário alvos em simultânea

24
Q

Qual o tipo de infeção mais mortal? (não necessariamente com maior mortalidade mas que mata mais pessoas por ano)

A

Infeção respiratória

25
Q

Como é que se aumenta a sensibilidade nas amostras respiratórias nos adultos?

A

Colher amostras respiratórias baixas porque as superiores tem menos sensibilidade

26
Q

Quais as vantagens da deteção do genoma?

A

Sensibilidade
Especificidade
Deteção simultânea de vários vírus
Deteção de carga viral

27
Q

Quais as desvantagens da deteção do genoma?

A

Custo
Risco de contaminação

28
Q

Quais os métodos mais utilizados na serologia hoje em dia?

A

ELISA
Quimioluminescência

29
Q

Qual a utilidade dos métodos serológicos?

A
  • Infeção crónica - HIV, hepatites… é bastante útil!
  • “Estado imunitário/infeção antiga” - serve para determinar as IgG: quando temos IgG
    significa que a pessoa já teve contacto com o vírus. O facto de ter IgG não significa necessariamente que os anticorpos conferem imunidade vitalícia.
    NOTA: agudo não porque Ac demoram a aparecer