T2_Diagnóstico laboratorial em Micologia ★ Flashcards
O que é a Micologia?
Estudo dos fungos
Quais fungos são exclusivamente leveduras?
- Candida spp.
- Cryptococcus spp.
Quais fungos são exclusivamente bolores?
Oportunistas
Aspergillus spp. (septados com conídos - cabeça aspergilar)
Mucormicoses (não septados com esporângios)
* Rhizopus spp
* Mucor spp
* Rhizomucor spp
* Lichtheimia spp.
Superficiais (todos, menos a Malassezia)
* Hortea werneckie
* Trichosporon spp.
* Piedra Hortae
Todos os cutâneos (hifas septadas)
* Microsporum
* Trichophyton
* Epidermophyton
No slide (AULA T2_Inf23/24): Geotrichum, Neoscytalidium e Onychocola
E os dimórficos podem ter a fase filamentosa (e infetante), quando expostos ao ambiente e condições adversas
Sistematização de fungos
Como podemos dividir os bolores?
Quais são os fungos com Conídios em cacho?
- Fusarium
- Scedosporium
- Sarocladium (ex.: Acremonium)
Quais são os fungos com Conídios em cadeia?
- Penicillium
- Verticillium
- Purpureocillium
- Paecilomyces
- Rasamsonia
Caracteriza o diagnóstico de Infeções fúngicas em doentes oncológicos
O diagnóstico das IFI no doente oncológico passa pelos mesmos tipos de testes do doente não oncológico…
No entanto, existem algumas particularidades em relação a alguns testes que têm valor diagnóstico diferente… E porquê?:
Por um lado, ao facto de certos doentes oncológicos apresentarem neutropenias acentuadas, pelo que estes doentes terão maior carga fúngica e maior probabilidade de disseminação
Por outro lado, nalguns destes doentes está recomendada profilaxia antifúngica e quando esses antifúngicos são anti-bolores, o valor dos testes para detectar bolores também se altera
Qual é o exame que COMPROVA a existência de fungos? Tem limitações?
O exame histopatológico é aquele em que vemos o fungo dentro dum tecido e vemos a respectiva reacção tecidular. E isto é o ideal porque é um diagnóstico COMPROVADO (desde que seja dum local normalmente estéril) Ou seja, não há dúvida que a causa é um fungo. E isto em qq doente.
Agora há um problema: NÃO DIZ QUAL É O FUNGO
Qual é a amostra ideal para o exame histopatológico de uma infeção fúngica?
Amostra do tecido infetado, à partida com uma reação inflamatória concomitante. - Biópsia é o ideal
Obtens um único exame cultural positivo, no qual cresceram fungos, qual é a conclusão que tiras?
Quando nós isolamos um fungo em cultura (quando semeamos uma amostra de um doente e recuperamos um fungo em cultura), se nós só tivermos esse teste positivo nós nunca poderemos garantir que esse fungo não foi apenas um fungo que contaminou a placa, ou não foi o fungo que no processo de colheita quando nós abrimos o recipiente para colocar a nossa amostra não tenha caído um esporo que depois foi semeado juntamente com a amostra e que veio a revelar um teste positivo.
Portanto não podemos excluir uma contaminação em qualquer fase do processo. Isto se apenas o exame cultural for positivo.
Mas quando eu vejo ao microscópio um fungo dentro de um tecido com uma reação inflamatória de resposta a esta invasão eu tenho a certeza que essa infecção é causada pelo fungo porque eu estou a vê-lo dentro do tecido.
Nas situações em que os fungos colonizantes estão a superfície das nossas estruturas cutâneas ou mucosas e não estão dentro do tecido, não invadem. Invadir é um sinónimo de doença invasiva, portanto verificar por microscopia essa invasão dá-me um comprovativo inequívoco da origem micológica. Estas amostras nem sempre são possíveis de colher porque muitas vezes os doentes têm situações clínicas muito graves em que há uma grande debilidade, défice de plaquetas… e não é possível fazer este tipo de testes, e portanto nós nem sempre conseguimos ter esta amostra tão privilegiada que é uma biópsia.
As vantagens deste exame histopatológico é dizerem-nos com segurança que aquela infecção é fúngica.
Quais os mecanismos patogénicos dos fungos
- Colonização e doença - o fungo está no nosso organismo, isto é, coloniza-nos e depois multiplica-se e causa doença.
- Micotoxicoses - fungos produtores de toxinas; são as toxinas que, ao ser ingeridas, causam doença.
Ex: amatoxina (amanita phalloides), alcaloides do centeio (Claviceps purpúrea) - Hipersensibilidade
As infeções fúngicas são geralmente infeções _______ que vão aparecer, normalmente, em doentes _______.
oportunistas
imunocomprometidos
Quais as patologias associadas aos fungos?
HIV/SIDA:
* Pneumonia por Pneumocistis jiroveci
* Meningoencefalite por Cryptococcus neoformans
* Histoplasmose causada pelo Histoplasma
Doença pulmonar:
* DPOC e ASMA - Aspergillus → aspergilose broncopulmonar alérgica e aspergilose pulmonar crónica
* Tuberculose (nas “cavernas tuberculosas”) – Aspergillus
Neoplasias
* Aspergilose invasiva por Aspergillus
* Candidíase invasiva por Candida Albicans
Quais as características gerais dos fungos?
4
- Células eucarióticas, heterotróficas
- Parede celular com quitina
- Membrana celular com ergosterol
- Têm dois tipos de reprodução – sexuada e assexuada; o mais frequente é a reprodução assexuada.
Qual a morfologia das leveduras?
3
- unicelulares
- redondos ou ovais
- gram + (coloram com Gram)
Qual a morfologia dos bolores/fungos filamentosos? (5)
- pluricelulares
- constituídos por hifas (Nota: hifas é nome que se dá aos filamentos)
- ao conjunto de hifas dá-se o nome de micélio
- as hifas podem ser septadas ou não septadas/cenocítica (mucormicetes)
- produzem esporos em condições adversas.
Qual a morfologia dos dimorfos?
Transitam de uma forma para a outra dependendo das condições de crescimento (variam em função da temperatura, CO2 e outros fatores…).
- Em meios ricos → forma de levedura – ex: no homem
- Em meios pobres → forma filamentosa – ex: na natureza, em temp. ambiente.
Como é que os fungos dimorfos são adquiridos?
No meio ambiente por inalação na sua forma filamentosa; no corpo humano vão alterar para levedura e é nessa forma que vão depois causar patologia
Filamentoso = infecioso
Levedura = patogénico
Como é a reprodução das leveduras?
Assexuada
Gemulação: A célula mãe emite um prolongamento que dará origem à célula filha.
ou
Clamidosporos: são estruturas de resistência, constituídas de reserva nutritiva e membrana bastante espessa, permitindo resistir aos fatores externos, semelhantes aos esporos.
O que são pseudo-hifas?
Na gemulação, a nova célula não se separa, dando origem a uma gémula alongada (estrangulada na zona do septo)
Como se distinguem as hifas das pseudo-hifas?
▪ Nas hifas os lados são paralelos, enquanto que nas pseudo-hifas não.
▪ As pseudo-hifas são estranguladas na zonas dos septos.
Como é a reprodução dos bolores?
Podem ter:
Esporos sexuados: resultam da fusão de 2 gâmetas
ou
Esporos assexuados:
* Esporangiosporos (fungo não septado): quando produzidos dentro de uma estrutura sacular
* Conídios (fungo septado): quando livres
Extensão da hifa: reprodução sexuada; fusão de hifas de dois micélios diferentes
Qual é a particularidade dos esporos?
Só são produzidos em condições adversas.
Para identificar bolores temos de cultivar em meios pobres para induzir a formação de esporos, pois cada bolor tem um tipo de esporos caraterístico que nos vai permitir fazer a identificação
Como é que os bolores são adquiridos?
São adquiridos geralmente no meio ambiente por inalação de esporos; no corpo humano encontram-se na forma filamentosa
Infecioso = esporo
Patogénico = filamentoso
Quais são os tipos de amostras utilizadas no diagnóstico fúngico? Quais é que são as amostras específicas para a micologia?
4 + 3
Sangue, LCR, urina, biópsia
Específico = unha, cabelo, escama cutânea (colhe-se à periferia porque é a zona mais ativa)
Como é que se colhe a unha para amostra fúngica?
- Fazer limpeza prévia das unhas, escovando com água e sabão.
- Cortar com tesoura e desprezar a parte descolada da unha
- Com lâmina de bisturi, raspar as áreas mais profundas e pulverulentas
- Colocar este material entre lâminas e vedá-las com fita adesiva.
Os fungos crescem em anaerobiose ou aerobiose?
Aerobiose (nunca em anaerobiose)
Quais são os tipos de exame direto que podemos usar em micologia?
- A Fresco
- Hidróxido de potássio (KOH)
- Tinta da China (Método de Burri)
Podemos ainda usar Gram
Como é feito o exame de hidróxido de potássio? Para que amostras?
Usa-se em amostras de grande celularidade (unha, escama, cabelo, biópsia)
Cobre-se a amostra com KOH (hidróxido de potássio) e este vai dissolver a queratina, obtendo-se assim uma amostra mais fina, facilitando a visualização das estruturas do fungo.
Como é feito o exame de tinta da china? Para que amostras?
Usa-se no LCR, urina ou sangue
Numa lâmina coloca-se 1 gota amostra + 1 gota tinta China, e cobre-se com a lamela
A tinta da china vai corar o LCR (ou outra amostra) de preto, permitindo destacar a cápsula do Cryptococcus.
Quais são os cut-offs diagnósticos do Galactomannan, na população em geral?
Quais são os cut-offs de screening do Galactomannan, no doente neutropénico?
