Proteiner Flashcards
Vad finns det för olika proteinstrukturer?
Primär = aminosyrasekvens Sekundär= Alfa-helix, beta-flak Tertiär= 3D konfigurering (globulär) Kvartär= Multiprotein sammansättning
Vad är den stora skilnaden mellan plasmaproteiner och intracellulära proteiner?
Plasmaproteiner är mer stabila och lösliga jämfört med intracellulära proteiner som oftast finns som membranbundna eller som del av ett multienzymkomplex.
Plsmaproteiner är mer oxiderade och har högre halter av kolhydrater (glykoproteiner)
Jämvikten är långsam mellan intravasala och extravasala rummen
Daglig omsättning för plasmaproteiner är lägre jämfört med extravasala proteiner
Förklara orden plasma, proteom och proteomik!
Plasma innehåller en komplicerad blandning av tusentals proteiner
Proteom är den totala uppsättning proteiner som finns i plasma
Proteomik innebär storskalig analys av proteiner i ett biologiskt prov
Var syntetiseras plasmaproteiner?
Huvudsakligen i hepatocyter
Makrofager, endotel
Var sker katabolismen av plasmaproteiner?
Sker mest i levern
Vissa proteiner utsöndras i urin
I hepatocyter= endocytos av proteiner som sedan deglykolyseras och klyvs till aminosyror med proteinas och peptidas.
Vad har plasmaproteiner för funktion?
Transport= Hem, albumin, transfferin
Kolloidosmotiska= ffa albumin
Hormoner= insulin, TSH, ACTH, PTH, GH
Regulatoriska= enzymer
Immundefens= Ig, komplementsystemet
Enzyminhibitorer= AAT, antitrombin, C1-esterasinhibitorer
Koagulation/fibrinolys= Proteiner som är involverade i koagulationens reglering och i fibrinolytiska systemet.
Vad är en Biuretreaktion?
Biuretreaktion= kopparjoner bildar i en alkalisk lösning ett violett komplex med proteiner i proportion till förekommande antal peptidbindningar.
BCG + albumin ⇒ grön färg (färgbindningsmetod)
Mäter reaktvitet
Vilka metoder används för att påvisa
Kemiska egenskaper
Aktivitet
Immunogenicitet
Fysiska egenskaper
Kemiska egenskaper= Absorption av UV
Aktivitet= enzymbaserade metoder
Immunogenicitet= immunokemiska
Fysiska egenskaper= elektrofores, kromatografi
Kombination av 2 metoder= immunofixation
När används turbidimetri/nefelometri?
För kvantitativ bestämning av proteiner i plasma, urin och andra kroppsvätskor
Reaktion mellan antigen och antikropp bildar ett komplex
Man mäter sedan grumligheten
Vad är skillnaden mellan turbidimetri och nefelometri?
Ljusspridning= Nefelometri
Ljushämmning= turbidimetri
Vad finns det för problem med nefelometri och turbidimetri?
Grunlighet i plasma ⇒ Typ Lipemi
Antigen excess
Kryoglobulin
Hur genomförs en elektrofores av plasmaproteiner?
Proteiner är positiva och negativa beroende på aminosyra och kolhydratsammansättning
Nettoladdningen är pH beroende
Vandringshastigheten i ett elektriskt fält avgörs av nettoladdning och buffertens jonstyrka
⇒ Vandringshastigheten är också beroende av stödmedlets ytladdning vilken ger upphov till sk elektroendosmos (buffertströmning i motsatt riktning).
⇒ Agarosgel har liten elektroendosmos
Agarosgel har en porstorlek på ca 150 nm vilket är optimalt för plasmaproteiner
Måttligt hög elektroforetisk upplösninng är optimal i kliniskt arbete
⇒ Efter elektroforesen färgas gelen ( Acid violet) och torkas.
== albumin, alfa1, alfa2, B, Y»_space;
Ge exempel på plasmaproteiner som ska mätas kvantitativt
Transtyretin Albumin Alfa-1 antitrypsin Haptoglobin Orosmucoid Transferrin Ceruloplasmin Fibrinogen CRP Procalcitonin Immunoglobuliner
Beskriv kort det du kan om akutfasproteiner!
Proteiner vars synteshastighet kan mer än dubblas vid akutfasreaktioner
CRP, alfa 1 antikymotrypsin, serumamyloid A, alfa1-antitrypsin, orosmucoid, haptoglobin, C3, C4, C4b-bindande protein samt fibrinogen
Tidsförlopp vid akut inflammation
CRP och alfa 1-antikymotrypsin stiger snabbast. Passerar referensgränsen 8-10 h oh T1/2< 24 h.
⇒ Ca 1 dygn senare börjar de andra akutfas proteinerna stiga (orosmucoid, haptoglobin, alfa1-antitrypsin, fibrinogen) T1/2= 3-6 dagar.
C3, C4, Ceruloplasmin ökar långsammare de följande dagarna.
Eventuell Ig reaktion sker efter ca 3 veckor.
Akutfasproteiner stiger i olika grad, kan stiga till > 100x normalt värde (tex CRP). Andra som C3, C4, cereloplasmin stiger mindre.
⇒ Olika inflammationer ger olika respons på samma protein. (tänk CRP vid bakteriell vs viral infektion).
Negativa akutfasproteiner
Albumin, prealbumin, transferrin
Vad är transtyretin?
När är det indikerat att ta ett sådant prov?
Syntetiseras i levern men även i plexus choroideus
halveringstid= 2 dagar
Binder och transporterar ca 10% av T3 och T4. Lägre affinitet för tyroxin än TBH
Vitamin A transport genom att det binder retinol bindande protein RBP
Indikation:
Något känsligare för malnutrition och minskade levercellsmassa än albumin.
Sänkta nivåer syns vid svält och fasta, inflammation, leversjukdom, östrogenbehandling, tyreoideasjukdom och vid ökad förlust
Höga nivåer syns vid behandling med glukokortikosteroider, androgen, aspirin och vid kronisk njurpåverkan (CDK)
När ska man ta ett albumin? När sjunker och när stiger albumin?
Relativt stabilt protein
Syntes i levern styrs av det kolloidosmotiska trycket
Katabolismen i levern sker via pinocytos i olika vävnader med degradering till aminosyror
Funktion=
Upprätthålla det kolloidosmotiska trycket (80%). Har låg MW men hög plasmakoncentration.
Transportprotein (bilirubin, CA2+, Cu, Zn, farmaka)
Metod= immunokemisk, färgbindningsmetoder
Sjunker= Inflammation Dålig nutrition Leverpåverkan Ökad katabolism Syntesdefekt Proteinförluster Ödem och acites
Ökar =
Stående ställning
Dålug hydrering
Förlängd tonicum applikation (typ dropp)
När stiger och sjunker haptoglobin? Vad är haptoglobin?
Haptoglobin
Syntes sker i levern
Syntes stimuleras av inflammation
Glykoprotein med 2 lätta alfa och 2 tunga beta kedjor
⇒ Variabilitet i alfa kedjor ger olika Hp fenotyper
Olika typer Hp 1-1, 1-2, 2-2 varav vissa bildar polymerer
Funktion= Binder hemoglobin irreversibelt och komplexet elimineras av hepatocyterna
Haptoglobin skyddar njurar och sparar järn
Sjunker:
Hemolys
Process som engagerar lever och mjälte
Barn upp till 13 år kan ha normalt låga värden
Stiger:
Inflamamtion, kan kvarstå i 1-2 veckor efter att inflammationen avtagit.
Vad är orosmucoid? När sjunker och stiger det?
Vilken analysmetod?
Syntes i levern
Ej helt känd funktion ⇒ Binder vissa basiska läkemedel
Nedreglering av immunrespons och trombocytaggregation
Stiger:
Inflammation (tillsammans med haptoglobin och fibrinogen vid inflammation i stödjevävnad)
Glykokortikoider och cushing
Sjunker:
Proteinförlust i tarm eller njurar (nefrotiskt syndrom)
Lever cirros
Östrogen tillförsel
Immunokemisk metod
