Komplementsystemet Flashcards
Tillhör komplementsystemet medfödda eller adaptiva immunsystemet?
En del av vårt medfödda immunsystem
Verkar som en brygga mellan det medfödda och adaptiva immunsystemet
Vilka tre huvudfunktioner har komplementsystemet?
3 huvudfunktioner ⇒ 1) identifier, 2) proinflammation, 3) eliminera
Vad består komplementsystemet av?
Komplementsystemet består av >30 proteiner
Vissa är lösliga
Andra membranbundna
Beskriv alla steg i den klassiska vägen!
Klassiska vägen= Antigen- Antikropp komplex
Aktiveras av antigen-antikropp komplex
C1 är ett lösligt protein och består av 3 subenheter ⇒ C1q, C1r och C1s
C1q är unik och kan binda in till antikroppen.
Den kan endast binda in till antikroppen om den är i ett komplex med ett antigen. ⇒ Detta då FC-delen ändras när antikroppen binder antigen.
⇒ Detta ger en autoaktivering av C1r som då klyver C1s.
⇒ C1s blir ett aktit enzym som klyver C4 och C2.
⇒ Det bildas då C4a och C4b samt C2a och C2b.
C4bC2a bildar då ett komplex som kallas C3 konvertas.
C4a och C2b är proinflammatoriska peptider.
⇒ Detta gör att C3 kan klyvas till C3a och C3b.
Vad aktiverar den klassiska vägen?
Klassiska vägen= Antigen- Antikropp komplex
Beskriv alla steg i lektinvägen!
Lektinvägen= Kolhydrater på patogener
MASP= ett proteinkomplex
Känner igen kolhydratstrukturer på mikrober, tex MBL
MBL flyter runt i plasma som ett komplex med MASP
När MBL binder in till kolhydrater sker en aktivering av MASP komplex som då klyver C4 och C2.
⇒ Bildas C4a och C4b samt C2a och C2b
⇒ Bildar C3 konvertas
C3 konvertas klyver C3 till C3a och C3b.
Vad aktiverar lektinvägen?
Kolhydrater på patogener.
Beskriv alla steg i den alternativa vägen!
Alternativa vägen = Patogener eller apoptotiskt material
Behöver inga antikroppar eller lektiner för aktivering
C3 är ett väldigt instabilt protein.
Består av esterbindningar som hydrolyserar automatiskt.
C3 klyvs hela tiden till C3a och C3b i små mängder ⇒ Det finns konstant små mängder i blodet.
På våra egna celler finns det regulatoriska komplementproteiner, både i löslig form och membranbundna. ⇒ Dessa inaktiverar C3a och C3b så att de inte kan skada våra egna celler.
⇒ Patogener däremor saknar förmåga att regler KOMPLEMENT.
⇒ På dessa patogener fastnar dessa komplementfaktorer och de kan ej nedregleras.
När C3b blivit stabilt och accumulerats på patogener tillräckligt kommer faktor B.
Faktor D som är ett annat lösligt protein klyver faktor B till faktor Ba och Bb som är den alternativa vägens C3 konvertas.
!! Ett annat C3 konvertas men med samma funktion.
Komplement reglerande proteiner saknas på bakterier men finns på våra friska celler.
Vad aktiverar den alternativa vägen?
Patogener eller apoptotiskt material.
Vad har C3a för funktion?
C3a= proinflamamtorisk
Hur bildas C5 konvertas?
C3b= binder till C3 konvertas och bildar C5 konvertas
Vad gör C5 konvertas?
C5 konvertas= klyver C5 och initierar bildning av MAC
C4b och C3b = opsonisering
Vilka faktorer är anafylatoxiner (proinflamamtoriska peptider)?
Anafylatoxiner= proinflammatoriska peptider
C3a
C4a
C5a
Vilka faktorer är opsoniner?
C3b
C4b
Ge exempel på några komplementreceptorer
CR1-CR4
C3aR
C5aR
Vad kan binda in till komplementreceptorer?
Anafylatoxiner bilder in till dessa komplementreceptorer och rekrytear inflammatoriska celler
Komplement receptor 1 finns på erytrocyter. Kan binda upp C3b och C4b och inhibera deras effekter så att komplementsystemet inte blir överaktivt.
Hur bildas MAC?
MAC = Membrane attack komplex
Bildas en transmembranös kanal i cellmembranet
C5 konvertas
⇒ C5 konvertas klyver C5 så vi får C5b
C5b deponerar på membranet, sedan binder C6, C7 och C8 in till komplexet. Det bildas då ett litet hål i membranet.
⇒ C9 i stora mängder deponeras runt C8 så att hålet i membranet vidgas ⇒ Osmotisk obalans och lysering av cellen.
Vad finns det för komplementregulatoriska proteiner?
Interagerar med medfödda och adaptiva immunsystemet
Interagerar med flera olika cellsorter
Spridning från lokal till systemisk effekt
Regleras mha olika proteiner i olika steg ffa i den termnala vägen
Klassiska vägen= C1-inhibitorer ⇒ Inhiberar C1q
C4 bindning protein C4BP= Agerar på klassiska och lektinvägen ⇒ Degraderar C4b
Faktor H= Utövar effekt på alternativa vägen och terminala vägen. ⇒ Hämmar C3b
DAF= Bryter ner C3 och C5 konvertas
Vilka komplementregulatorer reglerar den klassiska vägen?
C1 inhibitorer ==> inhiberar C1q
Vilka komplementregulatorer reglerar den klassiska vägen och lektinvägen?
C4 binding protein C4BP ==> Degraderar C4b
Vad gör faktor H?
Hämmar C3b. Utövar effekt på alternativa och terminala vägen.
Vad gör DAF?
Bryter ner C3 och C5 konvertas.
På vilka indikationer görs en komplementutredning?
Invasiva bakteriella infektioner Meningokockinfektion SLE aHUS Glomerulonefrit PNH Angioödem
Förklara hur
Funktion vs koncentration, Ca2+/Mg2+, akutfasreaktion, tid och temperatur påverkar diagnostik av komplementsystemet.
1) Funktion vs koncentration
Man kan ha normala nivåer av C1 inhibitor men nedsatt funktion! Vad vill vi undersöka?
2) Ca2+/Mg2+
Klassiska och lektinvägen kräver närvaro av Ca2+ och Mg2+ för aktivering.
Alternativa vägen kräver endast Mg2+
Man inhiberar komplementsystemet genom att binda upp Mg2+ och Ca2+. När man sedan vill undersöka specifika vägat tillsätter man Ca2+ och/eller Mg2+.
3)Akutfasreaktion?
4)Tid och temperatur
Max 24 h i -4 ℃. Högre temperaturer aktiverar komplementsystemet. Man bör frysa provet i -70 ℃ direkt efter provtagning.
Vilka metoder används för att undersöka komplementsystemet?
ELISA Flödescytometri Immundiffusion Hemolytiska assays Nefelometri/turbidimetri
Hur gör man ett hemolystest?
Komplementfunktion: Hemolystest
Analysera mängd hemolys som sker när man exponerar erytrocyter från får eller marsvin för patientens serum.
Man kan använda hemolystest för att undersöka funktion hos klassiska och alternativa vägen.
Klassiska= Man har erytrocyter från får som man bundit IgM till. Sedan tillsätter man patientserum.
Alternativa vägen= Man använder erytrocyter från marsvin som ej har antikroppar.
⇒ Sedan tillsätter man patientserum och kontrollerar hemolysen.
Marsvin saknar faktor H (faktor H inhiberar den alternativa vägen).
Faktor H kräver närvaro av sialinsyra på cellmembranet och om erytrocyter inte har sialinsyta kan de ej binda faktor H.
I supernatanten mäter man hemolys med spektofotometri och därefter graderas hemolysen
CH50 ⇒ Den spädning som krävs för att ge 50% hemolys
Vad mäter ett hemolystest?
KomplementFUNKTION
Hur testar man komplementsystemet med agarosgelmetod?
Ararosgelmetod
Agaros med tillsatta erytrocyter
Man gör små hål i gelen där man tillsätter patientserum
⇒ Sedan mäter man hemolys och jämför med positiv kontroll
Semi kvantitativ metod
Normal? Nedsatt?
⇒ Går att utvärdera enskilda faktorer också.
Hur kan man använda nefelometri för att undersöka komplementsystemet?
Mäter koncentrationen.
Tillsätt antikroppar mot komplementproteiner ⇒ Bildas ett immunkomplex
Ljusspridning ⇒ Ju fler immunkomplex det bildas desto mer ljusspridning
Mäter koncentrationen
Hur kan man använda ELSIA för att undersöka komplementsystemet?
Mäter enskild pathway för sig
3 brunnar och varje brunn är coatad med något som aktiverar de olika vägarna
⇒ Man tillsätter patientserum
⇒ Visar hur bra de olika vägarna fungerar
Vad är aHUS? (överaktivt komplementsystem)
aHUS
Atypitsk hemolytiskt uremiskt syndrom
Auto antikroppar mot regulatoriska proteiner eller genetiska mutationer i dessa
Tex autoantikroppar mot faktor H eller muterad faktor B eller I.
⇒ Det ger kroniskt överaktivt komplementsystem
Trombotisk mikroangiopati
Låga trombocyter
Hemolys
Organskada
Soliris (celizomab) är en monoklonal antikropp mot C5 som hämmar den terminala vägen.
Vad är PNH; Paroxysmal nokturn hemoglobinuri? Överaktivt komplement
PNH; Paroxysmal nokturn hemoglobinuri
Mutation i GPI membranöst protein
Kan inte binda GPI-bindande proteiener (däribland DAF)
⇒ Ingen inhibition av komplement mot egen vävnad
Intravaskulär hemolys
Även leukocyter och trombocyter angrips
Ökad trombosrisk
Soliris kan ha en hämmande effekt här
Vad är HANÖ Heriditärt angioödem? Överaktiv komplement
HANÖ Heriditärt angioödem
Återkommande svåra episoder av angioödem
C1 inhibitorbrist eller normal nivå av C1 inhibitorer som däremot har nedsatt funktion.
⇒ Ger stegring av bradykinin som ökar kapillär permeabilitet
C1 inhibitrer är centrala för hämning av bildning av bradykinin.
Återkommande svåra episoder av angioödem
C1 inhibitorbrist eller normal nivå av C1 inhibitorer som däremot har nedsatt funktion.
⇒ Ger stegring av bradykinin som ökar kapillär permeabilitet
C1 inhibitrer är centrala för hämning av bildning av bradykinin.
Beskriv kort om komplementbrist!
Sänkt serumnivå av komponenter i klassiska vägen (C1q, C2, C4)
⇒ Kopplat till autoimmuna sjukdomar (SLE, sjögren, glomerulonefrit)
Följa sjukdomsförlopp
Brist på C1q/C4/C2 gör att housekeeping av apoptotiska celler rubbas ⇒ Predisponerar för autoimmunitet
Hur reagerar komplementsystemet vid systemisk aktivering? Vad kan man få för värden då?
När komplement aktiveras systematiskt förbrukas komplementfaktorerna så att de enskilda komponenterna tex C3, C4 och B minskar i koncentration. På samma sätt minskar den hemolytiska funktionen. Samtidigt som de intakta komponenterna sjunker bildas fragment och komplex (aktiveringsprodukt) ⇒ Dessa kommer öka i koncentratioen.
Vad kan komplementbrister öka risken för? (infektioner)
C2 brist ger ökad risk för ingektioner med kapslade bakterier
C3 brist ger upprepade infektioner med kapslade bakterier
Brist i terminal pathway (C5-C9) ger upprepade svåra Nisseria infektioner
Properdin brist ger fulminat Nisseria meningit/ gonnoré.
