Omtenta 2019 Flashcards
Selektivt medie
Är designat för specifik bakteriegrupp
Exempel:
- MSA innehåller en hög salt halt och selekterar för staphylocker som tål detta
- MacConkey innehåller gallsalter vilket hämmar gram+ bakterier och gynnar gram- stavar
Differenterande medie
Selekterar baserande på färgomslag och storlek, är här vanligt med pH indikator.
Exempel:
- Chrom agar
Genrellet ska man tänka på att ej kontaminera sina prov
Bakterier
- Arbete sker utan handskar då man har sett att man är mer oförsiktig med hygien och spridning vid användande av handskar.
- Labbrock
- Spritade/tvättade händer
Virus
- Visir vid risk för stänk
- Handskar
- Labbrock
- spritade hände
Avfall
- Specifik behållare märkt med smittoförände ämnen
- destruktion
A) chromagar platta där bakterier får olika färg samt en blodagar platta för att kunna studera hemolyserande förmåga. Möjligvis även blåagar för att få en selektion av gram+ och gram- bakterie och se om de är en laktosjäsare.
B) 37 grader i CO2 inkubator
C) Vid sår ses ofta staphylocker, jag kan därför göra ett katalas test för att se om de är positivt. Jag kan sedan gå vidare och göra ett koagulas test för att se om de är s.aureus eller övriga KNS. är de övriga KNS kan jag göra ett novobiocintest för att skilja på s.saprofyticus och övriga KNS.
D) MRSA. För detektion av denna görs odling på foxbuljong och pcr av nuc genen. Vid positivt resultat i pcr sker utodlining på chrom agar, sen görs pcr av mecA.
E) staphylock
A) Bakterie koloni blandas i droppe pbs på objektglas och lufttorkas. Först sänks glaset ned i kristallviolett, följt av lugols lösning. När detta görs kommer kristallviolett att komplex bindas till jod. En avfärgning sker sedan med sprit innan en konstrastfärgning förs med safarin.
Gram - : röd
Gram+ : blå/lila
B) syrafasta bakterier kan va svåra att färga, gamla bakterier kan göra att den uppvisar en röd färg fast den egentligen är gram+, tjocka prep och dåligt avfärgat
Artidentifiering
- Svårodlade bakterier eller långsamt växande bakterier
- För att få ökad känslighet
- Identifiering av farliga bakterier (slippa odla upp)
Typing
- Detektion eller analys av resistensgener-virulensgener
- Stamtypning : epedemiologisk analys vid utbrott
MALDI TOF= Matrix assisted laser desorption/ionization - time of flight spectometri
MALDI TOF är en molekylär biologisk metod
Fördel: Billigt och snabbt, många prover kan analyseras samtidigt
Nackdel: Svårt att skilja på bakterie som kan vara närbesläktade och nya arter som till kommer kan resultera i att databasen ej är tillräcklig.
Bakterier med kapsel, mögel och vissa gram+ bakterier är svår preparerade.
Då de krävs framodlade bakterier för analys kan skillnader i odlingsmedier/ursprung ställa till problem
Hepatit b, hepatit c, hiv, syfillis och htlv 1,2
ELISA
Vid elisa coatar man sin platta, prov tillsätts, detektionsantikropp tillsätts sedan substrat och tillsist avläses de hela spektrofotometriskt.
CMIA
Akridinium-märkt konjugat (antikropp/antigen/syntetisk peptid) -> pre-trigger lösn -> trigger lösning
Leder fram till oxidation av akridinium vilket leder till utsänt ljus som kan mätas i RLU=relative light units
TPPA= treponema palladium partikel agglutination
Agglunitations test varvid antikroppar mot syfillisantigen-täckta gelpartiklar mäts i en spädningsserie
Positivt: stark prick
neg: svag prick
- Se hur behandlingen går
- resistensmekanismer mot lkm
Realtids-pcr: påvisar specifk sekvens i dna
RT-pcr: analys av RNA. omvandlas till dna för att genomgå pcr. påvisar närvaro av specfikt rna
proben binder in till målsekvens mellan primers till målsekvens. Bstår av nukleotider med reporter i 5-ände och quincer i 3-ände. Hydrolyseras av polymeraset och reporter och quincer skiljs åt ->ljus
A)Med hjälp av sidescatter får jag ut granulitet och med forward scatter får jag ut storlek. Flouroscensintensiteten ger mig också info
B)Bakterierna märks med flouroscens och oposineras (för att fagocytos ska underlättas). Blodkropparna lyseras och jag får sedan ut en procenhalt på hur många som har fagocyterat.
4g
