FACS-labb Flashcards
FACS analysprincip
Flödescytometri är en teknik för att sortera ut en önskad cellpopulation ur en heterogen massa av dissocierade celler.
Celler som ska sorteras ut färgas in med antikroppar riktade mot kända cellantigen. När cellerna passerar en laser kan de sedan separeras utifrån storlek, intern komplexitet och fluorescens.
Vad räknas som positivt/negativt är en utmaning vid FACS analys. Hur löser du det?
Autofluorescens blir en utmaning vid facs hur löser du den?
En utmaning är Ospecifik inbindning
- Fc-receptorer
- döda celler
Hur löser man detta?
en utmaning är dubbletter (celler som sitter ihop).
hur löser man detta?
hur löser du detta?
Vad är autofluoroscens?
Vilka celler har detta?
Cellernas egna naturliga fluorescens
• Neutrofiler och monocyter
- Makrofager/DCs
- In-vitro stimulerade celler
Vilken typ av cell är mest flouroscerande?
Granulocyter
vad menas med spectral overlap?
Våglängder överläppar och läcker in i varandra -> problem