Cellanalys Flashcards

1
Q

Primär immunbristsjukdom

A

Medfödd genetisk sjukdom orsakad av någon komponent i immunsystemet saknas/inte fungerar.

Exempel:

  • Common Variable ImmunoDeficiency (CVID)
  • Kronisk granulomatös sjukdom (CGD)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Sekundär immunbristsjukdom?

A

immunbristsjukdom som förvärvats under livet

Exempel:

  • AIDS
  • immunbrist vid cellgiftsbehandling
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Autoimmun sjukdom?

A

sjukdom som orsakas av att immunsystemet aktiveras av och reagerar mot kroppens egna molekyler (självantigener = autoantigener)

Exempel:

  • MS
  • ledgångsreumatism
  • Graves sjukdom
  • SLE
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Allergi?

A

Tillstånd orsakat av att immunsystemet aktiveras av och reagerar mot ofarliga molekyler i omgivningen eller födan (allergener)

Exempel:

  • Nässelutslag
  • Hösnuva
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hur kan immunbristsjukdom, autoimmun sjukdom och allergier diagnostisers?

A

Immunologisk metodik (immunoassays)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Vad är immunoassay?

A

En immunoassay är en laboratoriemetod som används för att detektera eller kvantifiera en molekyl med hjälp av den specifika bindningen mellan antikropp och antigen.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Immunologiska metoder som används inom klinisk immunologi?

A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

ge exempel på cellanalyser inom klinisk mikrobiologi

Nämn också specifik någon analys+metod som görs vid transplantation, autoimmunitet samt vid allergi.

A

Cellanalyser används ffa för diagnos av:

  • immunbristtillstånd
  • uppföljning av patienter som genomgår immunterapi
  • diagnostik av överaktivitet i immunsystemet (autoimmunitet, allergi).
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Beskriv cellanalys

  • Vilket matrial analyserar man främst ifrån? exempel på nått mer som kan användas
  • Hur kan du separera immunceller från röda blodkroppar före analys?
A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Varför behöver man ibland isolera olika typer av immunceller? Hur kan detta göras?

A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

2 Olika typer av cellanalyser används, vilka är dem?

Vilken metod används främst för respektive analys typ?Vad gäller den ena analysen kan du analysera detta:

  • Analys av upptag av bakterier
  • Analys av celldelning
  • Analys av aktivering
  • Analys av effektormolekyler

Vilka metoder används här?

A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Funktionella cellanalyser kräver ofta att immuncellerna aktiveras i provröret

Olika immunceller kan aktiveras på olika sätt. Hur aktiveras:

  • Monocyter/makrofag
  • B-cell
  • t-cell
A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Berätta om ELISPOT

  • Vad står de för?
  • Hur får du ut ditt resultat?
  • vad används de till?
    *
A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Exempel på olika ELISPOT-analyser som görs för kontroll av b-cells defekter och immunodefekter?

Hur coatar du din platta vid resp analys?

A

Analys av antal B-celler i ett prov som producerar IgG, IgA eller IgM för diagnostik av patienter med B-cellsdefekter

  • Plattor coatade med anti-IgG/A/M antikroppar

Analys av antal B-celler i ett prov som producerar IgG/A/M-antikroppar specifika för mikroorganism eller vaccin (tex stelkrampstoxoid) för diagnostik av patienter med B-cellsdefekter

  • Plattor coatade med vaccinantigen

Analys av antal T-celler i ett blodprov som producerar en viss cytokin efter stimulering (tex IFN-γ) för diagnostik av patienter med immundefekter

  • Plattor coatade med anti-IFN-γ antikroppar
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Analys av fenotyp och funktion hos immunceller används ffa för att:

A

diagnosticera immunbristtillstånd och följa upp patienter som genomgår immunterapier.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

För att analysera funktionen hos immunceller måste de ofta:

A

isoleras och stimuleras så att de aktiveras i provröret.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

För att diagnosticera T-cellsdefekter kan (celldelning):

A

T-celler stimuleras med antigen eller substans som aktiverar många T-celler och celldelningen kan mätas mha inkorporering av radioaktivt tymidin i DNA.

18
Q

För att diagnosticera B-cellsdefekter kan (antikroppsproduktion):

A

B-cellerna kan stimuleras och antigenspecifik antikroppsproduktion kan analyseras mha ELISPOT.

19
Q

ELISPOT-tekniken kan användas för:

A
  • analys av immuncellers funktion
  • analys av t-cellsdefekter
  • analys av b-cellsdefekter
  • detektion av celler som producerar cytokiner eller andra effektormolekyler
20
Q

Vad är flödescytometri?

  • Vad står de för?
  • Vad står facs för?
  • Hur fungerar analysen
  • När är den bra att använda
  • när används den kliniskt
A

Flödescytometri:

Flow= flöde cyto=cell metri=analys/mätning

FACS= flouorescens activated cell sorting

  • Automatiserad analys, kan analysera flera egenskaper samtidigt
  • Väldigt bra metod för att kunna särskilja olika immunceller och studera dess form och funktion.
  • I klinisk immunologi används de för att konc bestämma proteiner i lösning och analysera immunceller

Funktion: Celler/partiklar analyseras baserat på ljusspridning och flouroscens. Ofta används flourokrom inmärkta antikroppar med specifika ytmolekyler för att skilja immuncellerna åt.

EX: CD3 på t-celler, CD19/20 på b-celler

*Kan analysera och sortera

21
Q

Exempel på flödescytometriska analyser?

A
22
Q

hur fungerar en fluorokrom?

Vad kan de användas till

A
23
Q

Genom att använd flera olika antikroppar märkta med olika fluorokromer samtidigt möjliggör?

  • Ytmarkörer
  • intracellulära markörer
  • Kombination
A

att analysera olika celltyper och deras funktion samtidigt.

24
Q

Flödescytometri

beskriv arbetsflödet

A
25
Q

Flödescytometerns olika delar:

A
26
Q

Flödescytometri – metodprincip

  • Hydrodynamisk fokusering
  • Varje cell genererar?

​Flödescytometer mäter:

  • Forward scatter
  • Side scatter
  • Flouroscensintensitet
  • en prick =
A
27
Q

Datanalys mha olika typer av FACS-plottar vid flödescytometri

vad heter de olika plottarna?

A
28
Q

skillnaden på dataanlyserna?

A
29
Q

Exempel på flödescytometriska metoder?

  • cellanalys
  • analys av proteiner i lösning
A
30
Q

beskriv ett Fagocytostest – ”Phagotest”

när görs de?

A

vid immunbristtillstånd

31
Q

Flödescytometrisk analys av intracellulär cytokinproduktion, berätta

A

Genom att stimulera t-celler i provet mha exempelvis antigen så att många t-celler aktiveras kan vi analysera cytokinproduktion hos individuella hjälpar t-celler.

De möjliggör att uppskatta frekvensen antigenspecifka celler

32
Q

berätta om Kulbaserad flödescytometrisk multiplexanalys av cytokiner (detektion av aktiverade t-cellers cytokin produktion)

A
33
Q

berätta om Flödescytometrisk cellsortering

A

Cellerna placeras i olika vätskedroppar (1 cell/droppe). Varje vätskedroppe får olika laddning beroende på vilka flourokromer som detekterats på cellen.

Dropparna sorteras med hjälp av elektromagneter

34
Q

Flödescytometri gör det möjligt att?

A

automatiskt analysera och sortera ett stort antal celler eller partiklar i vätskelösning på kort tid.

35
Q

I flödescytometern passerar celler eller partiklar:

A

en laserstråle en och en och ljusspridning och fluorescens från varje cell/partikel detekteras.

36
Q

Ljusspridning ger information om:

A

cellens storlek och granularitet

37
Q

Fluoroscens från fluorokrommärkta antikroppar kan ge information om

A

cellens identitet och funktion

38
Q

Flödescytometri används för att bestämma med (fenotypisk analys):

A

antal och frekvens av olika immunceller i blodet (fenotypisk analys).

39
Q

Genom att använda fluoroscerande bakterier kan fagocyternas förmåga att

A

fagocyternas förmåga att fagocytera analyseras.

40
Q

Genom att permeabilisera cellmembranet kan

A

intracellulära molekyler såsom cytokiner analyseras

41
Q

Florecensmärkta kulor kan bla användas för att

A

räkna antalet celler i ett prov samt för att analysera koncentrationen av olika proteiner (såsom cytokiner och antikroppar)