Introuction à la pathologie - Cours 5 Flashcards
Qu’est-ce que l’anatomopathologie ou anatomie pathologique?
Une spécialitée médicale technique, humaine et vétérinaire, qui se consacre à l’étude des lésions macroscopiques et microscopiques des tissus pathologiques prélevés sur un sujet vivant ou décédé
Qu’est-ce qu’une lésion?
Altération morphologique d’organe, détectable par un moyen d’observation (macroscopique microscopique)
Qu’est-ce qu’une lésion élémentaire?
Altération morphologique d’une structure isolée
Qu’est-ce qu’un ensemble lésionnel?
Association de différentes lésions élémentaires
Expliquez la démarche anatomo-pathologique
Analyse sémiologique de lésions en comparant le tissu pathologique au tissu normal. Confrontation aux données cliniques, biologiques et d’imagerie pour permettre une interprétation synthétique qui aboutit au diagnostic (certain, probable ou incertain)
Quels sont les buts de la démarche anatomo-pathologique?
Établir un diagnostic lésionnel, apporter des éléments utiles pour établir un pronostic et contribuer à évaluer l’effet de thérapeutiques
Quels sont les rôles de l’anatomopathologiste?
-Élaborer un diagnostic par démarche diagnostique
-Préciser le pronostic, en pathologie tumorale
-Évaluer l’effet de thérapeutiques
Quels sont les différents types de prélèvements?
Cytologie
Prélèvements tissulaires
Qu’est-ce qui est récolté en cytologie?
1- Liquide émis tel urine, expectoration, produit de drain
2- Brossage, raclage de surface de muqueuse FCV, prélèvements buccaux
3- Ponction à l’aiguille de liquide ou de tumeur solide/collaboration avec l’imagerie
4- Empreinte de tranche de section de tumeur solide
Pourquoi utiliser la cytologie?
-Moins coûteux
-Moins invasif
-Intérêt pour le dépistage de masse en pathologie tumorale
Que fait-on lors d’un examen cytopathologique?
Dépistage
Qu’est-ce que la biopsie?
Prélèvement tissulaire limité d’une lésion sur un être vivant
Quelles sont les méthodes de biopsie?
1- Aiguille, trocart, ex rein, foi -> carotte biopsique / imagerie
2- Endoscopie avec pince
3- Chirurgie après anesthésie
Sur quoi repose la valeur de la biopsie?
-Taille
-Nombre
-Zone prélèvée
-Étiquetage des biopsies
-Renseignements cliniques (anamnèse, labo, imagerie…)
Qu’est-ce que la pièce opératoire? D’où vient-elle? Qu’à ton de besoin?
Exérèse partielle ou complète d’un ou plusieurs organes, séparés ou en monobloc
Anesthésie/chirurgie
Repérage avec fils
Renseignements cliniques
Qu’est-ce que l’autopsie?
Examen anatomo-pathologique pratiqué sur un cadavre
Scientifiques à la demande du clinicien, effectuées dans les hôpitaux par le pathologiste
Médico-légales à la demande du coroner (par ordre de justice), en cas de mort suspecte, effectuées à l’Institut Médico Légale
Quels sont les buts de l’autopsie scientifique?
1- Diagnostic si non déterminé en pré mortem
2- Juger de l’efficacité du traitement
3- Établir la cause de la mort :
-Maladie initiale
-Complication du traitement
-Maladie surajoutée
Quelles sont les étapes de la technique d’étude morphologique?
-Réception du prélèvement
-Requête, siège et nature du prélèvement, renseignements cliniques et paracliniques, l’aspect macro, antécédents, hypothèse diagnostique, coordonnées du prescripteur
-Enregistrement
-Fixation
Comment se fait la fixation lors de technique d’étude morphologique?
-Tissu : formaldéhyde toujours, fixateur moléculaire si nécessaire
-Cellules ->(étalement direct ou par cytocentrifugation) puis fixation à l’alcool (cytospray)
Quelles sont les étapes des techniques de prise en charge de la cytologie?
-Réception d’étalements lors de cytoponctions, frottis, écouvillonnages, brossage ou appositions
-Cytocentrifugation sur lame de verre de liquide (naturel, épanchement, lavage)
-Fixation des étalements :
Séchage à l’air pour coloration MGG (May-Grunwald-Giesma)
Application d’un aérosol de laque pour les colorations de papanicolaou (frottis cervico-vaginaux)
-Étalements en cellules monocouches
Quelles sont les étapes pour le traitement des tissus?
-Macroscopie (+/- examen extemporané) et préparations de techniques particulières
-Fixation
-Inclusion en paraffine
-Coupe
-Coloration, habituellement HE ou HES
-Microscropie/études complémentaires
-Autrs techniques “classiques” et plus moléculaires
-Réalisation du compte-rendu
-Archivage
Comment se fait la macroscopique pour l’étude de tissus?
Examen de la pièce : palpation, mesure, poids, photos, orientation, encrage, coupe, repérage avec quadrillage, prélèvements et mise en cassette
Donnez des exemples de prélèvements pour techniques particulières
-Milieu de culture pour cytogénétique
-Glutharaldéhyde pour ME
-Congélation pour examen extemporané, banques, biologie moléculaire
-Tissu frais pour cytométrie de flux
Qu’est-ce que l’examen extemporané?
Lors de l’acte chirurgical
Réponse rapide en quelques minutes (10-15 minutes)
Incidence sur la conduite de l’acte
Nature inflammatoire ou tumorale
Tumeur maligne/bénigne
Limites
Diagnostic provisoire/préliminaire
Donnez le volume, durée et type de fixateur de le fixation
Crucial
-Volume : 10 fois la pièce
-Durée : fonction de la taille, 2 à 5 h pour une biopsie et 24-28h pour une pièce opératoire
-Type de fixateur : formol 10% tamponné
Dans quoi fait-on l’inclusion?
Bloc de paraffine
Comment se fait l’inclusion-coupe-coloration?
Paraffine
Coupe au microtome, de 2 à 5 micromètre d’épaisseur
Coloration standard HE+/-S : hématoxyline, éosine, +/- safran
Montage entre lame et lamelle
Quels sont les types de colorations spéciales?
Surcharge
Matrice extracellulaire
Agents infectieux
Histo-enzymologie
Hybridation in situ
Nommez des exemples de coloration spéciale pour la surcharge
PAS : glycogène
Perls : Fer
Nommez des exemples de coloration spéciale pour la matrice extracellulaire
Weigert : fibres élastiques
Nommez des exemples de coloration spéciale pour les agents infectieux
Grocott : champignon
Nommez des exemples de coloration spéciale pour l’histo-enzymologie
Immunohistochimie : mise en évidence (mee) d’antigènes cellulaire ou extra cellulaires à l’aide d’anticorps
Immunogluorescence directe : mee de dépôts d’immunoglobulines et de compléments, microscope à fluorescence
Nommez des exemples de coloration spéciale pour l’hybridation in situ
Mee d’ADN ou ARN à l’aide de sondes nucléiques
Que montre le trichrome ?
Le collagène en bleu
Que peux-on faire en immunohistochimie particulièrement?
Un double marquage
Quelles autres techniques peut-on utiliser pour détecter des points d’intérêt autre que la coloration?
-Cytogénétique : FISH (détection du nombre de copie d’un segment chromosomique donné)
-Microdissection pour analyse moléculaire ciblée
-Tissu array pour valider, sir de nombreuses tumeurs regroupées en un bloc, des marqueurs
-Microscopie électronique
-Cytométrie de flux (sur cellules en suspension)
Qu’utilisons-nous en FISH?
Une sonde de dysjonction
Qu’est-ce qu’il y a sur les compte-rendus?
-Prescripteur : renseignements cliniques
-Description des lésions
-Diagnostic
-Éléments pronostiques
-Classifications internationales
Quels sont les objectifs cliniques de la tumorothèque en pathologie moléculaire?
Permettre un diagnostic moléculaire ou cytogénétique immédiat ou différent, en complément de l’histopathologie pour le bénéfice direct du patient
Quelles tumeurs sont visées lors de la tumorothèque?
-Lymphomes
-Myélomes
-Sarcomes
-Tumeurs pédiatriques
-Tumeurs cérébrales
-Tumeurs colo-rectales (<60ans)
-GIST (gasto intestinal stomal tumorale)
-Tumeurs broncho-pulmonaires
Comment fait-on la fixation en formaldéhyde et l’inclusion en paraffine pour la tumorothèque?
Tissu fixé en formal 6-24h
Tissu formolé et inclus en paraffine > 10-20 ans, risque de dégradation de l’ADN en très petits fragments avec un risque d’échec des PCR
-FISH, PCR, séquencage de l’ADN
-Extraction d’ARN de tissu formolé, plus difficile aussi de favoriser fixateur moléculaire
À qui s’appliquèrent le protocole rigoureux de congélation?
Oncologue
Chirurgien (initier la prise en charge de l’échantillon)
Pathologiste
Quelles sont les nécessités du protocole de congélation?
Bonne coordination pour éviter la dégradation des acides nucléiques de l’échantillon
Intervalle de temps entre recueil du prélèvement et son conditionnement (congélation ou immersion dans RNA later/fixateur moléculaire) doit être le plus court possible (moins de 30 minutes)
Comment peut-on assurer la qualité des tests moléculaires en congélation?
Éviter les faux négatifs ou positifs (toujours vérifier ce qu’on donne via examen en congélation ou bloc miroir de paraffine)
-Étude pathologie moléculaire :
But diagnostique
But pronostique
But thérapeutique (thérapie ciblée)
Suivi de la maladie résiduelle
Expliquez l’assurance-qualité en pathologie et archivage
L’assurance-qualité s’impose, à la fois institutionnelle et inter-institutions
Reste des pièces reçues éliminé après signature du compte-rendu mais blocs conservés
Archivage : blocs adultes 10 ans, pédiatriques 50 ans
