Interacciones proteína-proteína y métodos para verlas Flashcards
cómo se clasifican las interacciones de las proteínas?
- entre dominios de una misma cadena polipeptídica
- entre dominios de diferente cadena polipeptídica
- en complejos formados entre proteínas dependientes
métodos para evaluar interacciones proteína - proteínas
Rayo x
ELISA
Doble híbrido Y2H
Microarreglo de proteínas
Microscopia electrónica
Inmunofluorescencia
FRET
cómo funciona la técnica de doble híbrido en levadura?
- FT separado en dominio de unión a DNA y dominio de activación
- dominio + proteína
- interacción —> transcripción del gen reportero
cómo funciona FRET?
proteínas se marcan con fluoróforos aceptores y donadores
interacción = fluorescencia
ventajas de FRET
se puede medir el tiempo de interacción entre proteínas
qué determinan las modificaciones postraduccionales?
actividad
localización
interacciones con otras proteínas
función de la fosforilación
activación/desactivación de actividad enzimática
tirosina, serina, treonina
función de la acetilación
estabilidad de proteínas
regulación de la interacción proteínas-DNA (histonas)
función de glicosilación
adición de carbohidratos a una proteína —> mejora solubilidad y estabilidad
función de la metilación
regulación de la transcripción
función de la acilación (modificiación de lípidos)
localización
anclaje de membrana
función de ubiquitinación
señal para degradación de proteínas
para qué es el western blot?
técnica de detección de proteínas
en qué consiste la western blot?
separación de proteínas por medio de gel de electroforesis —> membrana + ac específico —> su unión es detectada usando un marcador radioactivo