Instabilité des microsatellites Flashcards
Quel est le pourcentage de cancer colorectaux associés à un défaut de MMR?
15%
Quel est le résultat d’un défaut dans la voie MMR
Instabilité des microsatellites (MSI)
Pourquoi est-il important de distinguer les tumeurs MSI+ des MSI-?
Importance clinique
Les Pts avec tumeurs MSI+ ont une meilleure survie et répondent différemment à la Tx adjuvante 5FU Important d’identifier les patients avec Syndrome de Lynch
Quel est la fonction du système de réparation par mésapariement de base (MMR)?
Identifier et fixer les mésappariements de base qui surviennent dans le génome
Quelles sont les protéines impliquées?
Les protéines les plus souvent impliquées dans la carcinogenèse du cancer du côlon: MLH1/PMS2 MSH2/MSH6 (hétérodimères)
Et d’autres aussi impliquées dans le MMR: MLH3 MSH3 PMS1 Exo1
Quelle est la fréquence dans le génome des microsatellites?
3%
Si MSI+, due à leur nature répétitive, ils sont très susceptibles d’avoir des erreurs
Mais ils peut également avoir des mutations ailleurs dans le génome créant une instabilité et l’apparition de cancer
Quelles sont les catégories de cancer colorectal MSI+?
1- MMR déficient sporadique (méthylation promoteur MLH1) 2- Syndrome de Lynch (mutation germinale dans 1 des deux gènes MMR ou altération de EPCAM qui cause un silencing épigénétique de MSH2)
3- Cancer colorectal MMR déficient inexpliqué (somatique, screening discordant avec résultat germinal )
4- MMR déficient constitutif (biallélique)
À quelle mutation somatique sont associés les MMR déficient par hyperméthylation du poromoteur de MLH1?
Mutation somatique BRAF V600E
Les MMRd CK20- CDX2- sont asssocié à un pronosctic plus sombre V ou F?
V
Pauvrement différencié
Pronostic non favorable
Le CK7 est variable
MSI-H
À quels cancersle syndrome de Lynch rend-t-il plus vulnérables?
CRC
Endomètre
Petit intestin
Estomac
Uretère
Rein
Ovaire
Cerveau
Prostate
…
Quels sont les gènes mutés dans le syndorme de Lynch?
Mutation germinale
MLH1
PMS2
MSH2
MSH6
EPCAM
Requiert ensuite un “second hit” par perte d’hétérozygocité, mutation ou hyperméthylation
Quel est le % de Pt avec un CRC due à un syndrome de Lynch?
2-5%
Quels Pt doivent être testés?
Critères de Bethesda modifiés (pas très sensibles et encore
moins spécifiques)
Tous les patients avec CCR de moins de 70 ans, peu importe la morphologie
Quels sont les critères de Bethesda modifiés?
- <50 ans
- Présence d’une tumeur synchrone ou métasynchrone d’un autre CRC ou autre tumeur reliée au Lynch peu importe l’âge
- CRC avec phénotype MSI <60 ans
- CRC avec un membre de la famille du 1er degré avec une tumeur reliée au Lynch Dx <50 ans
- CRC avec 2 ou + membres de la famille du 1er degré avec une tumeur reliée au Lynch peu importe l’âge
Quelles mutations germinales sont associées à un LS classique (CRC est le premier Sx à 43-46 ans)?
MLH1
MSH2 mais plus à risque de développer un cancer extra-côlon, Syndrome de Muir-Torre
Quelle mutation peut ne pas démontrer de MSI par PCR?
MSH6
Quelle mutation de LS est associé à un CRC qui apparaît à un âge plus vieux?
PMS2
Décrire la clinique typique d’une tumeur MSI+
Côlon droit
Sporadique Pt âgé, femme
LS <50 ans
Mauvaise réponse 5FU
Meilleur pronostic comparé aux tumeurs CRC MSS de même stade
Décrire l’histologie typique d’une tumeur MSI
Mucineux
Bien ou pauvrement différenciée
Cellules en bagues à chaton ou phénotype médullaire fréquent
Hétérogénéité intra-tumorale commune
Absence fréquente de nécrose sale
Réaction Crohn-like
Lymphocytes intra-tumoraux
Présence d’un adénome festonné sessile à proximité est plus suggestif d’un cas sporadique
Présence d’un adénome tubuleux à proximité est plus suggestif d’un LS
Est-ce que les Pt avec une hyperméthylation du MLH1 et une mutation BRAF V600E ont un meilleur pronostic que ceux sans la mutation BRAF?
Non
Réponse limitée aux inhibiteurs de EGFR
Quelles sont les types de mutations les plus fréquentes dans les gènes de MMR causant un LS?
Mutation non sens ou décalage du cadre de lecture (protéine tronquée ou sa dégradation est augmentée)
En IMHC, on voit une absence de marquage
Expliquer les découvertes de l’IMHC des protéines de MMR?
Décrire le test de PCR pour l’instabilité des microsatellites
5 microsatellites testés
MSI-H Instabilité dans au moins 2 MS
MSI-L Instabilité dans 1 MS
Quels tests peut-on effectuer pour déterminer si une tumeur MMRd est sporadique?
BRAF V600E
Méthylation du promoteur de MLH1
La présence de ces mutations indique un cas sporadique
Quel est le pitfall majeur des tests IMHC et PCR?
La détection de MSH6: MSIL ou MSS
Majeur pour les cancers gynécologiques où une grande proportion de cette mutation est responsable de ces cancers
Quelle mutation est plus fréquemment retrouvée dans les cancers gynécologiques?
MSH6
Dans la technique de détection de la méthylation du promoteur de MLH1, quelle étape importante nous devons faire sur l’ADN?
Traitement au bisulfite de sodium
Si le C est méthylé il va rester un C
Si le C est non méthylé, il va se changer en U
Est-ce que nous pouvons exclure un LS si l’IMHC des 4 protéines démontre leur présence?
Non
5% des patients ont une mutation faux-sens rendant la protéine exprimée mais non fonctionnelle qui est détectable par IMHC
Il est recommandé de référer en génétique si Hx familiale et âge
Quelle est un condition importante sur la lame lors d’un test pour détecter le MSI par IMHC?
Présence de cellules non-tumorales comme contrôle
Avec l’immunohistochimie, toujours s’assurer d’avoir un témoin interne (les noyaux des cellules non néoplasiques devraient être marqués, sauf si mutation germinale bi- allélique)
Est-ce que le phénotype typique des tumeurs MSI+ est toujours présent?
Non
Quels Pt vont avoir un test génétique sanguin pour la recherche de mutation germinale?
La détection par séquençage sur le sang périphérique doit d’abord être orientée (quelques patients tester?, quel gène tester?) pour augmenter l’efficacité et diminuer les coûts
L’IMHC peut d’abord orienter vers quel gène est muté.
Si MLH1 et PMS2 absents: recherche de mutation BRAF (60% des cas sporadiques) et recherche de méthylation du promoteur (70% des cas sporadiques)
Nommer les différents tests pour détecter le LS avant de tester directement les gènes
Tests substituts :
1- Immunohistochimie pour les protéines MMR (MLH1, PMS2, MSH2 ou MSH6
2- L’analyse de l’instabilité des microsatellites par PCR
3- Analyse de la mutation BRAF
4- Test de méthylation de MLH1
Seulement moins de 1/3 des patients (3 à 5% au total) avec perte d’une protéine MMR à l’immunohistochimie est due à une mutation germinale
La localisation typique à droite et le phénotype typique sont associés à quelles mutations?
Le phénotype typique et la localisation à droite sont plus associés au MLH1 et MSH2, moins au MSH6 et PMS
Que doit-on faire si perte de MSH2 par immunohistochimie mais pas de mutation germinale trouvée dans le sang périphérique?
test de mutation germinale de EPCAM ou immuno pour EPCAM (exprimé dans les cellules épithéliales seulement)
La mutation de EPCAM induit une méthylation du promoteur de MSH2 et perte de sa fonction, le 2e hit survient habituellement dans le gène MSH2
Est-ce qu’il est prudent de tester les adénomes des Pt avec un LS?
Dans les adénomes chez les patients atteints d’un syndrome de Lynch, seulement 50% vont présenter une perte de la protéine, la prudence est donc de mise
Est-ce que la méthylation du promoteur de MLH-1 peut être héritée?
Aussi rarement, la méthylation d’un promoteur peut être héritée, ce qui provoque une anomalie à l’immunohistochimie mais sans qu’on ne trouve de mutation germinale dans le gène
Quelle est la corrélation entre le test par IMHC et PCR?
Il existe une très bonne corrélation (plus de 95% de concordance) entre l’immunohistochimie et l’analyse de l’instabilité des microsatellites par PCR donc l’immunohistochimie seule est adéquate dans la majorité des cas
Dans quels cas d’IMHC doit-on demander le test PCR?
Le test d’instabilité peut être demandé dans les cas suivants :
¤ Immunohistochimie difficile à interpréter (souvent MSH6 post chimio)
¤ Forte suspicion clinique de Lynch malgré des immunos normales
Comparer le test IMHC et PCR
Quel est l’algorythme à Québec pour tester les CRC pour l’instabilité des MS?
