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Chimie Analytique > HPLC > Flashcards

HPLC Flashcards

1
Q

Principe de la chromatographie liquide: ___________________________.

A

Séparation fondée sur la différence de distribution des espèces entre deux phases non miscibles.

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2
Q

En Chromatographie liquide, la phase stationnaire peut être: ___________, ____________, _____________.

A
  • Polymère moléculaire;
  • Silice vierge ou greffée;
  • Echangeurs d’ions.
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3
Q

En Chromatographie liquide, la phase mobile est ____________ ou ____________.

A
  • Solvant pur;
  • Mélange de solvants purs.
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4
Q

La répartition du soluté entre ces deux phases se fait selon le _______________.

A

coefficient de distribution K

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5
Q

K = ____________________.

A

K = Cs/CM;

Cs: Concentration du soluté dans la phase stationnaire;
CM: Concentration du soluté dans la phase mobile.

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6
Q

La CL peut être, selon la nature de la PS _______________ ou _______________.

A

Sur colonne (Adsorption, partage, échange d’ions, paire d’ions, exclusion);
De surface (CCM, Papier CP).

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7
Q

Chromatographie d’adsorption:
PS: _______________;
PM: ______________.

A

Chromatographie d’adsorption:
PS: Adsorbant polaire (gel de cilice, alumine) ou peu polaire (charbon actif);
PM: Solvant polaire (Méthanol) ou apolaire (Ether).

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8
Q

Chromatographie de partage en phase normale:
PS: _____________________;
PM: _____________________.

A

PS: Phase liquide fixe polaire (propylamine);
PM: Phase liquide peu ou moyennement polaire (isopropanol).

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8
Q

Chromatographie à polarité inversée de phase:
PS: _____________________;
PM: _____________________.

A

PS: Phase liquide fixe apolaire (chaine carbonée C8, C18);
PM: Phase liquide polaire (exemple : acétonitrile).

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9
Q

Chromatographie Appariement d’ion:
PS: _____________________;
PM: _____________________.

A

PS: Phase stationnaire apolaire (exemple : colonnes C8, C18);
PM: Phase éluante contenant le contre-ion.

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10
Q

Chromatographie Exclusion – Diffusion:
PS: _____________________;
PM: _____________________.

A

PS: Phase solide poreuse hydrophile (filtration sur gel) ou hydrophobe (perméation de gel);
PM: Phase liquide aqueuse (filtration sur gel) ou organique (perméation de gel).

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11
Q

Chromatographie Echange d’ions:
PS: _________________________;
PM: ________________________.

A

PS: Solide comportant des groupements fonctionnels ionisés, fixes, porteurs de charges positives ou négatives, et des ions mobiles de signe contraire assurant l’électroneutralité;
PM: Phase aqueuse ionique.

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12
Q

La CLHP dérive de la forme la plus ancienne de la chromatographie liquide ________ dont les performances, en termes de sélectivité et de résolution, ont été améliorées par l’utilisation de phases stationnaires ___________ et une phase mobile sur laquelle est exercée une _________ afin d’obtenir un débit convenable.

A

sur colonne;
très élaborées;
forte pression.

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13
Q

La CLHP fait intervenir des mécanismes d’échange soluté/phase mobile/phase stationnaire basés sur les _________________________.

A

coefficients d’adsorption ou de partage

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14
Q

La conception générale d’un appareil de Chromatographie Liquide Haute Performance (CLHP) comprend les éléments suivants : ___________, __________, ___________, ____________, ____________, _____________.

A

Réservoirs de Solvant;
Pompe;
Injecteur;
Colonne;
Détecteur;
Système de Traitement de Données.

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15
Q

Le volume injecté varie entre __ et ___.

A

10 et µl

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16
Q

Les pompes utilisées sont à haute pression entre __ et ___ barres.

A

50 et 350 barres

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17
Q

La colonne est caractérisée par _________ et __________.

A

longueur et diamètre

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18
Q

La phase mobile en HPLC se caractérise par sa ___________.

A

force d’élution

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19
Q

Le détecteur en HPLC est: _______, ________ ou ________.

A
  • Détecteur UV;
  • Fluoromètre;
  • Réfractomètre.
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20
Q

La colonne est souvent précédée d’une _________, dite ___________, de __ à __ cm, remplie de la même phase stationnaire, ce qui sert à _________________, augmentant ainsi la durée de vie de la colonne principale.

A

précolonne;
colonne de garde;
0.4 à 01 cm;
retenir certaines impuretés.

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21
Q

Caractéristiques du gel de silice: _______________, ______________, ____________, _______________.

A
  • Solide amorphe ayant pour formule de composition SiO2(H2O)n;
  • Polymère inorganique réticulé;
  • Comporte des groupements silanols « Si–OH » lui conférant un caractère acide (polaire);
  • Comporte des pores de tailles différentes.
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22
Q

Le gel de silice est préparé sous forme de _____________ ou ____________.

A
  • Microparticules sphériques;
  • Monolithes poreux.
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23
Q

Le monolithe poreux de gel de silice forme ___________________.

A

une seule pièce dans la colonne même

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24
Les microparticules sphériques sont de petites particules, généralement avec un diamètre constant de __ à __ micromètres.
1 à 12 µm
25
Les microparticules sphériques en terme de porosité: __________________ ou ________________.
- Pores de diffusion répartis dans la totalité de la particule; - Particules poreuses en surface avec un noyau non poreux.
26
Avantages du gel de silice en HPLC: ___________, ____________, __________, _____________, ____________, _____________.
- Grande surface spécifique: matériau poreux donc grande surface d'échange; - Grande résistance mécanique; - Faible taille des particules; - Répartition granulométrique très étroite; - Particules sphériques (reproductibilité de remplissage); - Réactivité avec des groupements silanols (possibilité de modification chimique et donc de greffage et donc obtention de phases stationnaires de sélectivités différentes).
27
Défauts du gel de silice en HPLC: ______________ et ______________.
- Rétention des solutés basiques par échange d'ions due au caractère acide des silanols (Pics en trainée); - Solubilisation de la silice en milieu alcalin pH > 7.
28
Le gel de silice est ___________et n’est pas très utilisé tel quel en chromatographie.
très hydrophile
29
Afin de le rendre hydrophobe, le gel de silice subit des modifications qui consistent à lui greffer des molécules ________ à sa surface (fixation sur les groupements ____________).
organiques; silanophiles.
30
La méthode de greffage la plus utilisée est : La ___________.
silinisation
31
La silinisation est une réaction entre une ___________ et les groupements silanols du support de silice avec formation d’une liaison chimique covalente dite __________.
organosilane; pont siloxane.
32
Selon la nature du radical R de l'organosilane greffé, on distingue: ________________ et __________________.
Phase stationnaire polaire (-diol, -cyanopropyl, -aminopropyl...); Phase stationnaire apolaire (-alkyl, phényl...).
33
La phase stationnaire polaire est retrouvée en chromatographie liquide_______________.
Partage en phase normale
34
La phase stationnaire apolaire est retrouvée en chromatographie liquide_______________.
partage en phase inverse
35
Exemples de phases stationnaires greffées: _________, _________, _________, ___________, ______________.
Aminopropyle (-(CH2)3 - NH2): Forte polarité; Cyanopropyle (-(CH2)3 - C≡N): Polarité moyenne; Octyle -(CH2)7-CH3: Apolaire (colonne C8 ou RP8); Octadécyle -(CH2)17-CH3: Apolaire (colonne C18 ou RP18); Phényle - (CH2)n - C6H5: Apolaire.
36
La colonne C18 est utilisée dans __% des analyses en chromatographie liquide de partage.
80
37
Pour la phase mobile en HPLC, on utilise un mélange binaire constitué de ___________ et ____________.
Solvant A faible: peu ou pas élutif; Solvant B ofrt: Plus élutif que le solvant A.
38
Solvants faibles utilisés: En NPC: _______________; En RPLC: ______________.
En NPC: Apolaire ou peu polaire (Hexane); En RPLC: Eau ou phase aqueuse tamponnée.
39
Solvants forts utilisés: En NPC: _______________; En RPLC: ______________.
En NPC: Plus polaire que le solvant A (DIchlorométhane); En RPLC: Acétonitrile, Méthanol, Tétrahydrofuranne.
40
Evolution lors de la NPC: ______________puis _______________puis_______________.
Molécules apolaires; Molécules moyennement polaire; Molécules fortement polaires.
41
Evolution lors de la RPLC: ______________puis _______________puis_______________.
Molécules fortement polaires; Molécules moyennement polaire; Molécules apolaires.
42
Les Interactions soluté – solvant en HPLC: ___________, _____________, _____________.
- Forces intermoléculaires dipôle –dipôle; - Liaisons hydrogènes; - Liaisons ioniques (plus énergétiques).
43
La polarité d’un solvant s’exprime par : ________________ et _________________.
* L’énergie libre d’adsorption du solvant « εo »; * Sa polarité selon Snyder « P’ ».
44
L'énergie libre d'adsorption entre en jeu en ____________________.
chromatographie d’adsorption
45
La force éluante de la phase mobile varie avec l’__________________ qui permet de contrôler la rétention des solutés.
énergie libre d’adsorption « ε0 »
46
Plus ε0 est élevée, plus la phase mobile est ____ et plus le facteur de rétention « k » est ______.
élutive; faible.
47
L’indice le plus utilisé pour décrire quantitativement la polarité d’un solvant en chromatographie liquide est l'énergie libre d'adsorption. (V/F)
F: Indice de polarité de Snyder.
48
L'indice de Snyder est basé sur des mesures de solubilité de la substance étudiée dans 3 solvants et permet de déterminer les paramètres suivants: _____________, ________________, _________________.
χe : Mesure le pouvoir accepteur de protons par rapport à l’éthanol; χd : Mesure le pouvoir donneur de protons par rapport au dioxanne; χn : mesure les interactions dipôle – dipôle par rapport au nitrométhane.
49
L’indice de polarité est une mesure numérique des _______ de différents solvants.
polarités relatives
50
Pour chaque solvant on a : χe + χd + χn = __.
1
51
L’indice de polarité varie de -2 pour les ___________, très peu polaires jusqu’à 10,2 pour _____ qui est très polaire.
fluoroalcanes; Eau.
52
Il faut trouver un compromis entre la viscosité de la phase mobile et la ____________ afin d’avoir une bonne résolution.
perte de charge (Pression)
53
Le ou les solvants constituant la phase mobile ne doivent pas absorber aux longueurs d’onde de travail. (V/F)
V
54
Chaque solvant est caractérisé par son ________qui est la longueur d’onde minimale à laquelle il peut être utilisé.
« cut off »
55
L’acétonitrile n’absorbe pas à des longueurs d’onde supérieures à ___ nm.
200
56
La caractéristique principale des solvants au point de vue purement chromatographique est: _______________.
Pouvoir élutif
57
Le pouvoir élutif dépend de la polarité de la phase mobile et des solutés. (V/F)
V
58
Plus il y a d’interactions entre le soluté et le solvant, plus le pouvoir élutif de ce dernier sera _____ et plus l’élution des solutés sera _________.
élevé; rapide.
59
Il existe deux modes de travail en HPLC: ___________ et ___________.
Mode isocratique; Mode à gradient d’élution.
60
Dans le mode isocratique, la composition de la phase mobile reste inchangée. (V/F)
V
61
Caractéristiques du mode à gradient d’élution: ___________, ___________, ____________, _____________, _______________.
-La composition de la phase mobile change au cours de l’analyse; -La composition initiale est choisie pour séparer les solutés les plus rapidement élués; -La force d’élution est augmentée pour éluer les solutés avec une sélectivité optimale; -La composition finale est choisie pour éluer l’ensemble des solutés dignes d’intérêt; -Possibilité d’augmenter la force éluante pour éliminer les solutés très retenus pouvant conduire à des contaminations.
62
Les détecteurs quasi-universels utilisés en HPLC: ____________ et _____________.
* Réfractomètre; * Détecteur à diffusion de la lumière.
63
Les détecteurs spécifiques en HPLC: ______________, _____________ et ______________.
* Spectrophotomètre UV Visible; * Spectrofluorimètre * Détecteurs électrochimiques (ampérométrique, coulométrique conductimétrique).
64
La chromatographie liquide peut être mise en œuvre dans les monographies, sous les rubriques : ____________, ____________, _____________.
- Essai : pour la limitation de la teneur en impuretés d'une substance; - Dosage : pour le dosage du principe actif; - Identification (Rarement).
65
Dans une monographie, la description du système chromatographique doit comprendre les indications suivantes: _____________, __________, ____________, ____________, _____________, _____________, ____________, _____________.
- Dimensions de la colonne (longueur et diamètre intérieur); - Nature de la phase stationnaire (dans le détail); - Composition et débit de la phase mobile; - Programme d'élution; - Température de la colonne (si elle diffère de la température ambiante ou est réglée à l'aide d'un thermostat); - Méthode d'injection (si cette précision est importante); - Volume d'injection; - Méthode de détection.
66

Chimie Analytique (18 decks)

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