Genética Forense + Coleta de Vestígios Flashcards
Como é formando o DNA?
– Unidade básica do DNA: Nucleotídeo (carboidrato,
grupo fosfato e base nitrogenada);
– bases nitrogenadas se emparelham de maneira específica:
– Adenina (A) emparelha-se com Timina (T);
– Citosina (C) emparelha-se com Guanina (G).
O que são Microssatélites (Short Tandem
Repeats - STRs)?
-Sequências simples de DNA que se repetem em tandem (lado a lado) ao longo do genoma.
-São caracterizados por uma unidade de repetição curta de 2 a 8 pares de bases que são repetidas até 100 vezes.
– Ex: Uma sequência STR pode ser algo como “AGATAGATAGAT”, onde “AGAT” se repete três vezes. Outro indivíduo pode ter
“AGATAGATAGATAGAT” (quatro repetições).
Qual a importância dos Microssatélites (Short Tandem
Repeats - STRs)?
Altos níveis de heterozigozidade, Dispersão uniforme, Alto nível de reprodutividade, Possibilidade de genotipagem por métodos rápidos e simples
-Genética forense
-Teste de Paternidade
-é baseada no fato de que a probabilidade de duas pessoas terem o mesmo número de sequências repetidas é extremamente pequena
Quais são os Tipos de Amostras Biológicas Utilizadas na genética forense?
– Sangue;
– Saliva;
– Cabelo;
– Sêmen;
– Ossos;
– Dentes;
– DNA de contato;
Qual foi a descoberta do professor Dr. Alec Jeffreys, em 1984 que mudou a genética forense?
professor de genética da Universidade de Leicester no Reino Unido descobre que o DNA contém sequências que se repetiam (VNTRs);
VNTRs → repetição em tandem de número variável ou
minissatélites
O que aconteceu no caso de Colin Pitchfork?
Primeiro caso criminal solucionado no Reino Unido através do DNA (VNTRs usando RFLP)
Quem é melhor para análise de DNA os STRs ou VNTRs;
São os STRs. A tecnologia PCR-STR é o padrão internacional para a identificação humana e investigação de vínculos genéticos.
O que é o CODIS?
O CODIS é um índice de apontadores que auxiliam os laboratórios criminais dos Estados Unidos da América na comparação e partilha de perfis de DNA.
Quando se inicou o laboratório de genética forense em Sergipe?
2020
Como se faz a constatação de semêm?
– Manchas de sêmen fluorescem quando expostas à luz UV;
– A fonte da fluorescência são compostos não proteicos presentes no sêmen;
– A detecção de fluorescência é um indicativo;
● Luz forense 400-500nm azul, óculos laranja → Fluoresce
Esperma, urina, Fibras etc.
● Teste imunocromatográfico para detecção de PSA e semelogenina
– Útil em indivíduos oligozoospérmicos,
azoospérmicos e vasectomizados;
O que são luzes forenses?
-São equipamentos baseados na emissão de luz que, na presença de filtros ajustáveis, emitem luzes em faixas de comprimento de onda específicos, permitindo a detecção de vestígios invisíveis a olho nu.
-A fluorescência é um fenômeno físico-químico no qual um objeto absorve a luz de determinado comprimento de onda e emite uma cor diferente
-revelar sêmen e saliva
Como se faz constatação de sangue humano?
Teste imunocromatográfico para detecção de sangue humano;
– Detecção de hemoglobina humana;
– Sofre interferência do luminol;
– Efeito hook (excesso de antígeno que impede a ligaçäo simultânea dos anticorpos em uma mesma molécula de antígeno);
- Luminol não interfere no DNA mas interfere na reação de identificação de sangue humano;
Qual é o banco de perfil genético brasileiro?
Rede Integrada de Bancos de Perfis Genéticos (RIBPG)
Como se da a coleta de sangue para extração de DNA?
sangue seco ––> swab úmido,
sangue úmido —> swab seco;
– Corte ou remoção da superfície;
Não enviar sangue em tubo vacutainer;
– Componentes podem inibir a PCR;
● Ex.: Citrato de sódio, heparina, EDTA.
Como se da a coleta Saliva para extração de DNA?
● Swabs de algodão umedecidos com água destilada ou solução salina estéril e passados suavemente sobre a área da amostra (ex.: borda de um copo).
● Objetos pequenos, como bitucas de cigarro ou chicletes, coletar o objeto inteiro, colocando-o em um envelope de papel para evitar contaminação.
Como se da a coleta Células Epiteliais – DNA de toque (trace DNA)?
● Swabs secos ou levemente umedecidos devem ser utilizados para coletar células epiteliais de superfícies onde o suspeito ou vítima pode ter tocado.
● Passar o swab em movimentos circulares sobre a superfície.
Como se da a coleta de cabelos para extração de DNA?
● Uso de Pinças Estéreis:
● fita adesiva específica para capturar fios;
Como se da a coleta de semêm para extração de DNA?
2 swabs de cada sítio de coleta;
● Se for coleta da região anal, umedecer levemente o swab com água destilada;
– Coletar swab bucal da vítima, bem como do parceiro consentido, caso exista;
Como se da a coleta de ossos e dentes para extração de DNA?
● Dentes inteiros com raízes intactas são preferidos
para análise de DNA porque as células da polpa
dentária contêm DNA nuclear.
● Priorizar ossos longos (como fêmur ou úmero)
● Utilizar ferramentas estéreis para a coleta;
Como se da a coleta das unhas para extração de DNA?
● Utilizar swab esteril sob cada mão, identificando-o (mão esquerda, mão direita)
● Se possível, recortar a extremidade das unhas das mãos com tesoura descontaminada ou bisturi;
Como coletar e enviar material genético de Cadáver de morte recente que esteja inteiro e não fragmentado?
● Amostra recomendada – Sangue (swab);
● Introduzir e esfregar os swabs no sangue das cavidades internas ou de grandes vasos;
● Ou utilizar cartão de coleta (FTA) – Aspirar sangue das cavidades internas ou de grandes vasos com uma seringa e transferir para cartão de coleta;
● Não enviar sangue em tubo vacuttainer;
Como coletar e enviar material genético de Cadáver de morte recente que esteja fragmentado
● Amostra recomendada – Sangue (swab), músculo esquelético;
● Músculo esquelético de tecidos profundos (ex.: Quadriceps femoral), coletar aproximadamente 2cm3
Como coletar e enviar material genético de Cadáver em decomposição
● Amostra recomendada – Cartilagem, dentes e ossos;
● Dentes – Coletar 02 (dois) dentes íntegros, preferencialmente molares e/ou pré-molares, sem sinais de tratamentos odontológicos ou cáries;
● Osso longo – preferencialmente fêmur, realizar corte em janela na face anterior do terço proximal do osso;
● Não realizar coleta de músculo em cadáver em decomposição
Como coletar e enviar material genético de Cadáver carbonizado
● Amostra recomendada – Sangue,músculo esquelético, swab da bexiga, dentes e ossos;
Como coletar e enviar material genético de Ossadas?
● Dentes – Coletar 02 (dois) dentes íntegros, preferencialmente molares e/ou pré-molares, sem sinais de tratamentos odontológicos ou cáries;
● Osso longo – preferencialmente fêmur, realizar corte em janela na face anterior do terço proximal do osso;
Melhor forma de presrvar material genético depois de coletado?
Evidência biológica é melhor preservadaquando armazenada a frio (freezer) e seca (cabine de secagem);
O que pode interferir na obtenção de DNA durante a PCR?
● Hemoglobina
● Corante índigo (denim)
São removidos na fase de extração
Como se dá a extração do DNA na etapa de extração após a lise de células epiteliais?
Purificação por membrana ou bead magnético
Como se dá a quantificação do DNA, apos a sua extração?
Método utilizado – Real-time PCR - Criado por Kary Mullis
– Detecta presença de inibidores
– Avalia degradação
– Informa concentração de DNA autossômico e do cromossomo Y
O luminol é comumente utilizado na cena de crimes para detectar sangue invisível a olho nu. Como o luminol reage na presença de sangue?
Produzindo uma luz azul intensa em ambiente escuro
O luminol é comumente utilizado na cena de crimes para detectar sangue invisível a olho nu. Como o luminol reage na presença de sangue?
Produz um azul intenso a partir de processo oxidativo e requer um
ambiente escuro para que seja visualizado adequadamente;
– A reação dura no máximo alguns minutos;
– Reagente pode ser borrifado na cena do crime;
