dosage des hormones

Question 1

conditions pré-analytiques

Answer 1

• Le patient (à jeun, debout/couché, diète préalable, stress, exercice physique, heure de prélèvement)
  -Prélèvement
  (type de tube, contenant spécifique)
  -Traitement du prélèvement (sur glace, traitement spécifique)

Question 2

prélèvements qui requiert le jeune

Answer 2

GH, insuline, glucose

Question 3

prélèvement cortisol

Answer 3

entre 8 et 16

pas de stress

Question 4

transport prélèvement

Answer 4

• sang est métaboliquement actif
• acheminer le plus rapidement possible
• glace: éviter dégradation de petits peptides ou arrêt du métabolisme
• consommation ou production des substances à doser

Question 5

méthodes analytiques

Answer 5

• chimiques (mesure changement d’absorption)/enzymatiques
• immunologiques
• chromatographie

Question 6

mesure magnésium

Answer 6

-fait réagir magnésium avec calmagit, forme un complexe qui absorbe à 520nm et qui est proportionnel à la quantité de Mg

Question 7

mesure protéines

Answer 7

protéines réagissent avec un colorant (rouge de pyrogallol)

lecture à 600nm

Question 8

méthode enzymatique: glucose

Answer 8

utilise hexokinase pour former G6P. G6P va réagir avec G6Pdéshydrogénase pour former du NADH qui va absorber à 340 nm

Question 9

avantages méthodes chimiques/enzymatiques

Answer 9

• automatisées: rapides
• simples/ très spécifique
• grande reproductibilité
• standardisation: souvent dispo

Question 10

limites/interférences méthodes chimiques/enzymatiques

Answer 10

• concentration mmol/l ou g/l (méthodes pas très sensibles)
• T
• présence d’un substrat de structure proche ou qui absorbe à la même longueur d’onde
• hémolyse (bris des gr, peut interférer avec lecture photomètre)
• bilirubine élevée (pigment vert qui peut influencer mesure chimique

Question 11

immunoessais

Answer 11

• utilisation d’un complexe Ag-Ac pour mesurer une molécule
• molécule à doser doit avoir au moins un Ac qui la reconnaît
• concentration: micromole, nmole, pole

Question 12

taille suffisante pour générer la production d’un ac

Answer 12

• hormones (pas toutes)
• protéines
• médicaments

Question 13

antigène

Answer 13

toute substance qui peut réagir avec un ac

Question 14

épitope

Answer 14

petite région à surface de la molécule qui peut être reconnue par un Ac:

• une molécule peut avoir plusieurs épitoges (grosse molécule)
• reconnues par plusieurs Ac

Question 15

spécificité

Answer 15

capacité de l’ac à reconnaître un seul Ag (malgré la présence de molécules similaires)

Question 16

réaction croisée

Answer 16

si l’ac reconnaît également des Ag de structures proches de l’Ag cible

Question 17

sensibilité/limite de détection

Answer 17

le plus faible signal détecté différent du zéro

Question 18

limite de quantification (ou sensibilité fonctionnelle)

Answer 18

le plus faible signal détecté mais dont la variation est sous un certain seuil (ex: <20%)

• précision suffisante pour que le signal émis soit fiable
• méthodes de mesures doivent être en haut de leur limite de quantification

Question 19

hormones stréroïdes

Answer 19

cortisol, androgènes, œstrogènes, aldostérone, vitamine D

Question 20

hormones peptides/protéines

Answer 20

ADH, ACTH, GH, IGF1, FSH, LH,hCG, TSH, PTH, calcitonin, prolactine, insuline, peptide C, glucagon, AMH, Thyroglobuline

Question 21

autres hormones (aa)

Answer 21

T3, T4, cathécolamines

Question 22

V/F taille des hormones à influence sur la mesures en labo

Answer 22

V

Question 23

types d’immunoessais avec marqueurs

Answer 23

-compétitifs
==> petites molécules
==> 1 seul Ac
-non-compétitif: immunométriques (sandwich)
==> molécule de PM >3000uma
==> 2 Ac

Question 24

Immunoessais compétitif avec séparation

Answer 24

• compétition entre Ag marqué (Ag*) et antigène à doser
• Ac en concentration limitante
• signal inversement proportionnel à l’Ag à doser (courbe sigmoïde)
• aux extrêmes: erreur plus grande
• doit pouvoir saturer Ac avec marqueurs

Question 25

immunoessais compétitifs sans séparation (pas besoin de laver le libre du lier)

Answer 25

-plusieurs stratégies pour éliminer la phase de séparation EMIT: enzyme multiplied immunoassay technique -signal proportionnel à l'Ag à doser -on a un Ag à doser, Ac et un Ag conjugué avec une enzyme (permet de révéler le signal) -compétition entre Ag libre du patient et Ag lié à l'enzyme. Si l'Ag du patient lie l'Ac, activité de l'enzyme sera conservée et mesurée -en absence d'antigène dans l'échantillon, Ac se lie à l'Ag de l'enzyme et activité enzymatique est diminuée. -courbe proportionnelle

Question 26

Essais immunométriques non-compétitif ("sandwich")

Answer 26

- excès d'Ac - Ag en sandwich entre 2 anticorps - signal proportionnel à la quantité d'Ag à doser - implique séparation

Question 27

types de marqueurs

Answer 27

-radio-isotopes (RIA, IRMA): peu couteux et peur sensible toxicité/gestion des déchets. technique manuelle -enzymatique: phosphatase alcaline, peroxydase, B-galactoside ($) -fluorescence ($) -chimiluminescence ($)

Question 28

chromatographie et spectrométrie de masse

Answer 28

-séparation de molécules selon caractéristiques physico chimique (on peut moins se tromper qu'avec les Ac

Question 29

spectrométrie de masse quelles hormones?

Answer 29

- petites molécules: T3-T4, catécholamine - Structures proches: hormones stéroïdiennes - plusieurs isoformes: vit D

Question 30

avantages spectrométrie de masse

Answer 30

- spécificité exceptionnelle | - sensibilité élevée

Question 31

limites spectrométrie de masse

Answer 31

- coûteux - temps technique long - délicate: contamination facile

Question 32

possibilité d'interférence: effet crochet

Answer 32

- excès d'Ag/Ac - tellement d'Ag que sature tous les types d'anticorps et on peut pas faire sandwich car Ac de capture est aussi saturé. on obtient 0 - méthode immunométrique en 1 seule étape - Ag sature les 2 types d'Ac - Signal émis plus faible que la concentration réelle - Impossible à prédire - Dilution: signal augmente

Question 33

Ac hétérophiles

Answer 33

- Ac qui réagissent avec un large spectre d'Ag - peuvent réagir avec un large spectre d'Ag - peut faire des faux positifs Ou des faux négatifs

Question 34

forme macro

Answer 34

macroprolactne: prolactine liée à une immunoglobuline, non active, immunoréactive solution: précipitation de la forme macro