določanje holesterola

Question 1

holesterol opis
kje se nahaja

Answer 1

HOLESTEROL ima šibek amfipatični karakter (tako polarn kot nepolaren)
- polarna OH skupina
- hidrofobni sistem 4 obročev + veriga

najdemo ga v:
-plazemskih membranah (do 30 %)
-lipoproteinskih delcih (70% v obliki holesteril estrov)

holesterol je za razliko od lipidov enakomerno razporejen med oba dela lipidnega dvosloja

Question 2

vloga holesterola

Answer 2

-vpliva na fluidnost membran
-prekurzor steroidnih hormonov in žolčnih kislin

Question 3

sinteza, izločanje, transport holesterola

Answer 3

sinteza v jetrih
žolčne kisline predstavljajo edino pot za izločanje holesterola

lipidi se prenašajo po krvnem obtoku v kompleksu s proteini → lipoproteinski kompleksi
različni tipi:
LDL, VLDL transport iz jeter v tkiva (veliko zunanjega holesterola, več LDL v krvi, nalaganje holesterola na stene žil- ateroskleroza)
HDL transport iz tkiv v jetra

Question 4

test za določanje holesterola

Answer 4

Liebermann-Burchardov test

kolorimetrično določanje holesterola
Liebermann-Burchardov reagent (acetanhidrid, H2SO4, etanol) povzroči oksidacijo in tvorbo dvojnih vezi

metoda je relativna → potrebujemo umeritveno krivuljo A620
uporabimo raztopine holesterola z znano koncentracijo

Question 5

9. vaja:
   izolacija lipidov iz jajc

Answer 5

izhodni material: rumenjah
+ kloroform/metanol (ima večjo gostoto kot voda, zato bo organska faza na dnu)
močno mešanje

ekstrakacija lipidov
filtriramo

+ CaCl2 (ioni Ca’2+ pomagajo pri boljši ekstrahaciji nekaterih lipidov
počakamo na ločitev faz, vodno fazo zavržemo

organska faza + kloroform/metanol/voda
vodno fazo zavržemo

organski fazi določimo volumen

+ Liebermann-Burchardov test
slepi vzorec (kloroform) → A620