Chap 10 : RMN Flashcards

1
Q

C’est quoi les 3 types de noyaux en RMN ?

A

I = 0 donc inactif

I = 1/2 actifs parfait

I > 1/2 moment quadrupolaire qui rend l’etude difficile

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2
Q

Def de delta, J et effet NOE

A

Delta = deplacement chimique : reflete l’environnement électronique des noyaux

j = couplage scalaire : effet des noyaux proches dans la structure

EFFET NOE : noyaux proche dans dans l’espace soit < 5A

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3
Q

V correspond a quoi ?

A

Fréquence de résonance specifique a chaque noyaux tres utile mais depend du champ B

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4
Q

De quoi depend le déplacement chimique ? 2

A

Nature des groupements chimiques auquel le H est associé

Du repliement de la protéine

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5
Q

C’est quoi le couplage scalaire homonucleaire J

A

Effet de protons proche dans une structure qui sont séparés par moins de 3 liens chimiques
Donne des contraintes d’angle de torsion

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6
Q

Qu’est ce qu’on peut faire pour simplifier un spectre ?

A

On change les H20 en D20

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7
Q

C’est quoi les deux principales expériences utilisées en RMN ?

A

COSY
TOCSY

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8
Q

C’est quoi le spectre COSY

A

Couplage J si protons sont séparés par 2 ou 3 liens chimiques
2 transformees de fourier

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9
Q

C’est quoi le spectre TOCSY ?

A

Un couplage scalaire J ou chaque H d’un système est corrélé a tous les autres H de ce système
Chaque AA represenre un ou plusieurs systèmes de spins indépendants

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10
Q

Quels sont les acides amines qui ont des systemes de spin identiques et donc des patrons identiques (5) ? On les différencie a quoi du coup ?

A

Asp ; cys ; met ; Glu et Gln
A leur déplacement chimique

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11
Q

3 limites de la RMN homonucleaires COSY et TOCSY ?

A

Pas efficace pour des petites valeurs de J

Pas efficace pour les grosses protéines

Les signaux se recouvrent dans les spectres

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12
Q

Les 3 avantages d’un marquage heteronucleaire ?

A

Transfert de magnetisation par J plus efficace

Meilleure resolution des signaux (décomposition en plan de plusieurs dimensions)

De plus grosses prot peuvent etre etudier

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13
Q

Qu’est ce qui est necessaire dans des etudes heteronucleaires ?

A

Des proteines marquées

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14
Q

Comment on marque les protéines ?

A

Expression bact de prot recombinante dans des milieux qui contiennent que les protéines marquees

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15
Q

2 flex de la RMN heteronucleaires ?

A

Spectres a plusieurs dimensions corrélant plusieurs noyaux

En absence de structure les déplacements chimiques peuvent permettre de determiner la structure secondaire de la protéine

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16
Q

C’est quoi les spectres NOESY ?

A

Bah Etude des correlations de NOE ou deux protons sont proches moins de 5 A

17
Q

Est ce que les interactions NOE restreignent bcp la conformation de la chaine peptidique en reliant les H eloignes dans la structure primaire ?

A

Ouiiiii

18
Q

Combien y’a de classes de contraintes chez les NOES

A

4
1.8-2.7 : tres intense
1.8-3.3 : moyen
1.8-5 : faible
3-6 : tres faible

19
Q

Quels sont les correlations entre l’angle de torsion phi et la valeur de couplage J pour feuillet B et helice alpha ?

A

Feuillet beta : phi = -125 et J = 9,8 Hz
Helice alpha : phi = -55 et J = 4 Hz

20
Q

Quelles sont les contraintes que doivent suivre les structures ?

A

Donnees RMN
structure covalente
Force d’interaction

21
Q

Dans les calculs de structures quels sont les critères d’acceptabilité (2) ? Et leur représentation ?

A

Énergie basse et petits nb de violations des contraintes

Representees comme une superposition qui minimise la RMSD (definit la précision)

22
Q

Qu’est ce qui permet de valider les structures en RMN?

A

Commenen cristallographie c’est le diagramme de Ramachandran

23
Q

4 avantages de la RMN

A

Methode a l’etat liquide

Bien pour les petites prot par cristalisable

Top pout etudier le repliement et les sites de liaison d’un prot

Bcp d’info sur la dynamique

24
Q

3 limites de la RMN

A

Petite prot seulement

bcp de purification

Pas d’infos sur les ions metaliques et les mol d’eau

25
Q

C’est quoi RMN HSQC

A

pour voir la correlation entre le proton amide et l’azote du mm groupe NH quoi

26
Q

A quoi sert RMN HSQC ?

A

Etude du repliement proteines
Site de liaisons chez les proteines