Chap 10 : RMN Flashcards
C’est quoi les 3 types de noyaux en RMN ?
I = 0 donc inactif
I = 1/2 actifs parfait
I > 1/2 moment quadrupolaire qui rend l’etude difficile
Def de delta, J et effet NOE
Delta = deplacement chimique : reflete l’environnement électronique des noyaux
j = couplage scalaire : effet des noyaux proches dans la structure
EFFET NOE : noyaux proche dans dans l’espace soit < 5A
V correspond a quoi ?
Fréquence de résonance specifique a chaque noyaux tres utile mais depend du champ B
De quoi depend le déplacement chimique ? 2
Nature des groupements chimiques auquel le H est associé
Du repliement de la protéine
C’est quoi le couplage scalaire homonucleaire J
Effet de protons proche dans une structure qui sont séparés par moins de 3 liens chimiques
Donne des contraintes d’angle de torsion
Qu’est ce qu’on peut faire pour simplifier un spectre ?
On change les H20 en D20
C’est quoi les deux principales expériences utilisées en RMN ?
COSY
TOCSY
C’est quoi le spectre COSY
Couplage J si protons sont séparés par 2 ou 3 liens chimiques
2 transformees de fourier
C’est quoi le spectre TOCSY ?
Un couplage scalaire J ou chaque H d’un système est corrélé a tous les autres H de ce système
Chaque AA represenre un ou plusieurs systèmes de spins indépendants
Quels sont les acides amines qui ont des systemes de spin identiques et donc des patrons identiques (5) ? On les différencie a quoi du coup ?
Asp ; cys ; met ; Glu et Gln
A leur déplacement chimique
3 limites de la RMN homonucleaires COSY et TOCSY ?
Pas efficace pour des petites valeurs de J
Pas efficace pour les grosses protéines
Les signaux se recouvrent dans les spectres
Les 3 avantages d’un marquage heteronucleaire ?
Transfert de magnetisation par J plus efficace
Meilleure resolution des signaux (décomposition en plan de plusieurs dimensions)
De plus grosses prot peuvent etre etudier
Qu’est ce qui est necessaire dans des etudes heteronucleaires ?
Des proteines marquées
Comment on marque les protéines ?
Expression bact de prot recombinante dans des milieux qui contiennent que les protéines marquees
2 flex de la RMN heteronucleaires ?
Spectres a plusieurs dimensions corrélant plusieurs noyaux
En absence de structure les déplacements chimiques peuvent permettre de determiner la structure secondaire de la protéine