מערכת הקריספר בשירות הרפואה

Question 1

תכונה של תאי גזע
ממוח עצם-

Answer 1

יכולים להתחלק ולהתמיין
לכל תאי מערכת החיסון ותאי מערכת הדם

Question 2

מקור לתאי גזע
של מערכת הדם

Answer 2

מוח עצם
דם טבורי

Question 3

באיזה סוג של מחלות גנטיות ניתן לטפל באמצעות
gene therapy?

Answer 3

מחלות מונוגניות

Question 4

Gene therapy – Ex vivo

Answer 4

תיקון מחוץ לגוף.
הוצאה של תאים,תיקונם,והחזרתם לגוף.

Question 5

Gene therapy – in vivo

Answer 5

תיקון בתוך הגוף.

Question 6

Gene therapy – gene addition

Answer 6

לוקחים גן תקין ועושים לו אינטגרציה לגנום.
הגן יעבור ביטוי.

חיסון-לא בהכרח מביא את הגן לביטוי כפי שהטבע רצה.

Question 7

Gene therapy – gene editing

Answer 7

שיטה שמאפשרת גם לטפל במחלה וגם להיות תחת רגולציה.

Question 8

איך עריכה גנטית מתרחשת?
קריספר 1.0

Answer 8

משתמשים במספרים מולקולריות החותכות את הדנ”א ויוצרות שבר דו גדילי, קרוב לאיזור שרוצים לתקן.
כעת השבר יכול להיות מתוקן על ידי מנגנונים טבעים של הגוף

Question 9

מהם המנגנונים הטבעים של הגוף שמאפשרים לי לתקן את השבר הדו גדילי שיצרנו בעריכה גנטית?

Answer 9

nonhomologous end joining

רקמבינציה הומולוגית

Question 10

מה קורה בעת תיקון השבר הדו גדילי על ידי
nonhomologous end joining
בעריכה גנטית?

Answer 10

באיזור השבר תהיה מחיקה/הוספה של כמה נוקלאוטידים.
יכול לגרום לפגיעה בפעילות הגן.

Question 11

תרופה שבה יש שימוש בתיקון השבר הדו גדילי על ידי
nonhomologous end joining
בעריכה גנטית?

Answer 11

תרופה לאנמיה חרמשית. מחיקה של הגן בטא גלובין.
במקביל יש הפעלה של גן הגיבוי גמא גלובין

Question 12

מה קורה בעת תיקון השבר הדו גדילי על ידי
רקומיבנציה הומולוגית
בעריכה גנטית?

Answer 12

האינפורמציה התקינה מועתקת מכרומוזום הומולוג תקין, וכל אלמנטי הרגולציה נשמרים.

Question 13

ממה בנוי קיספר?

Answer 13

מחלבון
cas9

guideRNA

Question 14

תפקידו של
cas9

Answer 14

החלבון היוצר את השבר הדו גדילי

Question 15

תפקידו של
guideRNA

Answer 15

להוביל את חלבון
CAS9
למקום הנכון

Question 16

אילו מספרים מולקולריות היו לפני קריספר?

Answer 16

שימוש בדומיין חלבוני שידע לייצר שבר דו גדילי.
טכנולוגיה שיותר קשה לפתח.

Question 17

Catalytically dead Cas9 (dCas9)

Answer 17

מבטלים את היכולת של
CAS
לבצע שבר דו גידלי.
או שניתן להנדס אותו כך שיוכל ליצר שבר רק בחד גדיל.
הוא עדין מחובר לגייד רנא ולכן ניתן לנווט אותו למקום מסוים בגנום.

Question 18

CRISPR 2.0-Base Editors

Answer 18

ביצוע של שבר חד גדילי, המאפשר להחליף נוקלאוטיד פגום בנוקלאוטיד תקין.

Question 19

CRISPR 2.0-Base Editors
איך מתרחש

Answer 19

קריספר חותך רק בגדיל אותו רוצים לתקן.
במהלך התהליך יש איחוי של
Deaminase
ל- CAS9.

Question 20

באמצעות שיטת
CRISPR 2.0-Base Editors
איזה בסיסים ניתן להחליף?

Answer 20

C
(U)
הופך ל
- T

A
(I)
ל-
G

Question 21

עריכה של דנא
עריכה של רנא
בהחלפת נוקלאוטיד יחיד

Answer 21

CAS9

CAS13-עם אנזים
ADAR

Question 22

CRISPR 3.0 -Prime Editors

Answer 22

יצירה של שבר חד גדילי.
באמצעותו מיצרים החלפה של מקטע מסוים במקטע אחר.

האינפורמציה שמכילה את התיקון נמצאת ברנא
בקצה 3.
ולכן ה-
CAS9
מחובר לאינזים רוורס טרנסקריפטאז

Question 23

שימוש ב-
Catalytically dead Cas9 (dCas9)
ללא שבר דנ”א

Answer 23

ניתן לצמד את
CAS9
לדומיינים שיכולים לבצע שינויים אפיגנטיים-
בלי לשנות את מקטע הדנ”א.
עידוד /עיכוב שיעתוק
מניעת ביטוי ווריאנטים.
מניעה של גנים רעילים.

Question 24

למה ניסיון לתקן את מחלת אנמיה חרמשית על ידי עריכה גנטית בקירספר לא צלח-

Answer 24

יש guide
רנ”א שמתפרק מהר בתאי הגזע

Question 25

דרך התמודדת עם הבעיה שמנעה תיקון של מחלת אנמיה חרמשית על ידי קריספר-

Answer 25

סנתוז בצורה כימית גייד רנ”א ובקצה מודפיקציות שמונעות את הפירוק על ידי נוקלאזות

Question 26

מי הם גנים
RAG1+2?

Answer 26

יוצרים חלבונים שעובדים כקומפלקס החותך את הדנא
בהתפתחות תאי
T ו- B
, וזה מאפשר את יצירת המגוון האדיר של
TCR,
תאי
B
והנוגדנים.

Question 27

מה קורה כאשר יש מוטציה ב-
RAG1+2

Answer 27

SCID-מפתחים
אין להם מערכת חיסון

Question 28

היכן נמצא האיזור המקודד של
RAG1+2?

Answer 28

כל האזור המקודד של הגנים הללו נמצא על אקסון אחד,

Question 29

מהו הטיפול שניתן כאשר יש מוטציה בגן של
RAG1+2?

Answer 29

חיתוך של תחילת האקסון, הכנסת אקסון המקודד לחלבון התקין, כך שהאזור עם המוטציה יידחף אחורה.
בשיטה זו-
שומרים על אלמנטי הבקרה של הגן.

Question 30

Off-target activity

Answer 30

במקום שה
GUIDE RNA
ינווט לאזור המוטציה הוא מנווט לאזור אחר בגנום שמאוד דומה לאתר המטרה

Question 31

Off-target identification by GUIDE-Seq analysis

Answer 31

שיטה שמאפשרת לי לגלות מהו האיזור שבו נוצר שבר דו גדילי עקב הקריספר.

בה מכניסים מולקלת דנא קטנה דו גדילית, והיא נתפסת בשבר שיצרנו על ידי.
NHEJ