Virus Flashcards
¿Qué es un virus?
Partícula formada por ADN o ARN en el interior de una cubierta proteica
Parásito intracelular obligado cuyo metabolismo depende de un huésped
¿Cómo invade un virus a una célula?
- El virus se acopla a una célula
- Atraviesa la membrana plasmática e inyecta el ARN o ADN en la célula
- El ácido nucleico viral se replica a costa de la célula hospedante
- El ácido nucleico viral se agrupa en nuevas partículas virales y abandona la célula, que puede quedar destruida
Ensamblaje de los virus
Directamente a partir de ADN y proteínas, a diferencia de las células
Fases de la replicación viral
Extraceular (virion): no posee enzimas y no se reproduce
Intracelular: existen principalmente como ácidos nucleicos que se replican y que inducen al metabolismo del hospedero para sintetizar componentes del virión
Tropismo
Capacidad de un virus de infectar o dañar un tipo de células, tejidos o especies de organismos específicas
¿Cómo se da el tropismo?
Se determina a la proteína de superficie capaz de unirse a un componente definido de la superficie de la célula hospedadora
Virulencia
Capacidad de un virus de crecer, ser invasivo, infectar células vulnerables, evadir el sistema inmune, alterar procesos celulares y causar daño tisular
Célula permisiva
Puede soportar el ciclo de la vida completo del virus; soporta la infección productiva
Célula no permisiva
No permiten la replicación del virus, pero pueden llegar a transformación neoplásica
Tipos básicos de infección viral
Lítica y lisogénica (integrativa)
Infección viral lítica
Secuestra actividades de síntesis normales de la célula y las reorienta para formar viriones
La célula se lisa liberando nuevas partículas
Infección viral lisogénica
El ADN del virus se integra en el genoma celular, como lo hacen los provirus
Después de infectar la célula, tiene un periodo de inactividad durante el cual el material genético del virus se incorpora al material genético de la célula huésped y se reduplica con ésta durante generaciones
Propiedades virales y su uso en taxonomia
Los virus provienen de múltiples linajes independientes más que de un ancestro común
ARN mensajero
Cadena positiva y llega a los ribosomas
Retrovirus
Cadena positiva pero no van directamente a los ribosomas
¿Cómo se clasificarían los virus de acuerdo a su familia y géneros?
Morfología del virus, organización del genoma, método de replicación, número y tamaño de proteínas estructurales y no estructurales
¿Cómo se clasificarían los virus de acuerdo a las especies del mismo género?
Secuencia de genoma, tropismo celular y tisular, patogenicidad, citopatología, modo de transmisión, propiedades fisioquímicas y antigénicas
Nucleocápside
Compuesta por un ácido nucleico rodeado de una cápside proteica
Cápside
Compuesta de protómeros que se autoensamblan mediante enlaces covalentes
Virus desnudos
Su estructura viral completa consta únicamente de la nucleocápside
Virus envueltos
Además de la nucleocápside consta de una envoltura de origen celular que la rodea
Bicapa lipídica del virus
Le permite virus fusionarse con la membrana celular de una célula del huésped por medio de proteínas virales
¿Cómo obtienen los virus envueltos su envoltura membranal?
En el proceso de liberación por gemación
¿Qué se inserta en la envoltura membranal de los virus envueltos?
Glicoproteínas virales que participan en el reconocimiento de receptores específicos de la superficie celular
Protómero
Subunidad proteica que se asocia en una estequiometría definida para formar la cápside viral
Tipos de simetría de la cápside viral
Icosaédrica y helicoidal
Capsómero
Unidad formada por 5 o 6 protómeros (pentones o hexones)
Subunidades morfológicas de la cápside que se autoensamblan para formarla
Simetría helicoidal
Son nucleocápsides filamentosas tubulares
Pueden estar encerradas dentro de un envoltura que confiere a la partícula forma esférica o de bastón
Clasificación viral de Baltimore
En base a la naturaleza del genoma
Clase I: ADN bicatenario
Clase II: ADN monocatenario
Clase III: ARN bicatenario
Clase IV: ARN monocatenario positivo
Clase V: ARN monocatenario negativo
Clase VI: ARN monocatenario retrotranscrito
Clase VII: ADN monocatenario retrotranscrito
Ejemplos de la clase I: ADN bicatenarios
Herpesviridae
Adenoviridae
Iridoviridae
Chordopoxviridae
Poxviridae
Papovavirus
Ejemplos de la clase II: ADN monocatenario
Parvoviridae
Chordoparvoviridae
Circoviridae
Ejemplos de la clase III: ARN bicatenario
Aquabirnavirus
Rotavirus
Aquareovirus
Avibirnavirus
Orbivirus
Coltivirus
Ejemplos de la clase IV: ARN monocatenario positivo
Calciviridae
Astroviridae
Picornaviridae
Togaviridae
Ejemplos de la clase V: ARN monocatenario negativo
Orthornyxoviridae
Bornaviridae
Arenaviridae
Paramyxoviridae
Rhabdoviridae
Ejemplos de la clase VI: ARN monocatenario retrotranscrito
Retrovirus
Ejemplos de la clase VII: ARN bicatenario retrotranscrito
Hepadnaviridae
Variabilidad en poblaciones virales
El genoma viral presenta más variabilidad que el de una célula (procariota o eucariota)
No todos los virus pueden neutralizarse por el mismo antiviral
Tasa de mutación en virus
Les otorga una ventaja selectiva en su vialibilidad biológica
Es menor en virus de ADN porque sus enzimas son más precisas que las de los virus de ARN y porque sí cuentan con proofreading
Todos los virus de ARN codifican sus propias polimerasas
Recombinación
Intercambio de material genético entre virus que comparten regiones de cierta homología y coinfectan una célula en cierto momento
Cuasiespecies virales
Mezcla de virus relacionados presentes en un hospedero en momento determinado
Se comportan como si fueran de un solo tipo de molécula, pero sus genomas son variaciones
Susceptibilidad de una célula a una infección
No garantiza la replicación viral ni que el individuo sufra la enfermedad
Efectos citopáticos
Cambios morfológicos visibles en microscopía óptica, así como bioquímicos, moleculares y de viabilidad celular
EJemplos de efectos citopáticos
Pérdida de adherencia al sustrato e inhibición por contacto, redondeamiento celular, agregación celular, formación de sincitios y cuerpos de inclusión
Purificación del virus
Las partículas virales son de gran tamaño con respecto a los componentes moleculares de la célula y más estables
Se usa la centrifugación diferencial
Compuestos que promueven un gradiente de concentración continuo en la centrifugación en gradiente de densidad
Sacarosa o cloruro de cesio
Tipos de titulación de virus
Físicos: no distingue partículas infecciosas de no infecciosas
Biológicos: distingue partículas infecciosas de no infecciosas
Procedimientos físicos de titulación de virus
Microscopía electrónica
Hemaglutinación
qPCR
Medición de la densidad óptica
qPCR (PCR en tiempo real)
Número de genomas virales por célula
Medición de la densidad óptica
Espectrofotometría; la turbidez aumenta en la medida en que hay más virus
Procedimientos biológicos de titulación de virus
Método de punto final
Concentraciones de unidades infecciosas (PFU y ensayo de enfoque)
Método de punto final
Réplicas de diluciones seriadas que son inoculadas y permite determinar la dilución que resultó en la infección del 50% de las réplicas
Titulación viral por microscopía electrónica
Muestra del stock viral mezclada con una concentración conocida de partículas de látex
Titulación viral por hemaglutinación
Los virus expresan proteínas de unión a la célula a través del reconocimiento del ácido siálico, presente en eritrocitos
Si no hay virus, los eritrocitos NO se aglutinan
Cuando se aglutinan, forman una especie de red y no se van al fondo de los pozos
Unidad de hemaglutinación (UHA)
Titulación viral por PFU
- Cultivo celular en cajas Petri con un volumen determinado de diferentes diluciones seriadas 1:10 del stock viral
- Se agrega un medio semisólido (agar o carboximetil celulosa) evitando que las partículas virales se dispersen libremetne por todo el medio líquido infectando nuevas células lejanas
- Aparecen placas líticas debido a que el virus se replica activamente, y se cuentan
- El número de placas líticas observado en la monocapa celular va en relación con el número de partículas virales viables que había en la suspensión viral
Cálculos de la titulación viral por PFU
PFU/ml = (PFU/VOL ml) (DL)
Titulación viral por ensayo de enfoque
Es para virus transformantes; consiste en que las células crecen como pilas de células que se tiñen y pueden ser contadas
Oncoproteína del VPH
Inhibe a Rb, permitiendo que la célula progrese a través del ciclo celular en ausencia de signos mitogénicos normales
Inhibe a p53
p53
Factor de transcripción para la apoptosis celular
Multiplicidad de la infección moi
Cantidad de virus promedio que se adiciona por c/célula en una infección
Asegura que todas las células en cultibo estén infectadas y sincronizadas posibles
