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UE1B - Santé, Thérapeutique, Handicap > UE1B-18 Les Analyses Biomédicales > Flashcards

UE1B-18 Les Analyses Biomédicales Flashcards

1
Q

Quelles sont les 3 phases d’une analyse de Biologie Médicale ?

A

1) Phase Pré-analytique
2) Phase Analytique
3) Phase Post-analytique

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2
Q

Par quoi est dirigé l’analyse de Biologie Médicale ?

A

Par des contraintes normatives et règlementaires strictes, afin d’en garantir la qualité.

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3
Q

Par quoi sont réglementées les analyses sur les prélèvements d’origine humaine en France ?

A

Par :
- la norme ISO-15189 du COFRAC (Comité Français d’Accréditation).
- les articles L6211-1 à L6242-5 du Code de Santé publique.

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4
Q

Qui est responsable de ces 3 phases d’Analyse de Biologie Médicale ?

A

→ Le Biologiste Médical : Médecin ou Pharmacien

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5
Q

Concernant les Tests à visée de Dépistage (TD) ou d’Orientation Diagnostique (TROD)…

A
  • PAS des Analyses Biomédicale.
  • PAS régies par les même règles.
  • Dépistage et NON PAS Diagnostic.
  • Exemple : les tests urinaire de grossesse / test antigénique du COVID-19 → permettent le Diagnostic présomptif.
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6
Q

La Phase Pré-analytique

A
  • Prescription de l’examen
  • Prise de contact par le patient et/ou le prélever extérieur au laboratoire (infirmier libéral, médecin…)
  • Acte de prélèvement
  • Identification des échantillons prélevés
  • Transport / Acheminement des prélèvements au laboratoire
  • Différentes phases de pré-traitement et d’enregistrement des échantillons au laboratoire
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7
Q

Quelles conditions doit respecter cette phase ? (5)

A

RESPECT :

  • des bonnes conditions de prélèvements
  • des conditions d’acheminements au laboratoires
  • de la cohérence de l’identité du patient entre la prescription et l’échantillon
  • de la cohérence de la description en vue du diagnostic recherché
  • de la présence des renseignements cliniques indispensables à la bonne prise en charge du prélèvement
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8
Q

Quelles sont les nombreux prélèvements qui existent ?

A
  • Ponction de sang périphérique (veine)
  • Ponction lombaire
  • Ponction pleurale
  • Ponction d’ascite
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9
Q

Quelle est la condition stricte pour que le prélèvement puisse être réalisé ?

A
  • Les prélèvements doivent être réalisés dans des conditions d’ASEPSIE (= désinfection cutanée au niveau du point de ponction), afin de limiter tout risque de propagation de germes.
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10
Q

Définition : Tube VERT

A

=> Héparinate de Lithium

  • faussera l’analyse de dosage du Lithium : qui sera anormalement élevé.
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11
Q

Définition : Tube VIOLET

A

=> complexe EDTA + Potassium

  • faussera l’analyse du dosage du Potassium : qui sera anormalement élevé.
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12
Q

Définition : Tube BLEU

A

=> Contenant du Citrate de Sodium

  • destinés aux analyses de coagulation du sang et sont toujours prélevés en premier (excepté quand il y a des hémocultures) pour éviter interaction avec les additifs des autres tubes pouvant fausser ces analyses de coagulation.
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13
Q

Pourquoi sont adaptés les tubes VERT et VIOLET ?

A
  • Pour les analyses de type ionogramme et NFS (Numération Formule sanguine)
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14
Q

Définition : Phase Analytique

A

= Processus technique permettant l’obtention d’un résultat FIABLE et PRÉCIS pour l’analyse biologique.

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15
Q

Que se passe-t-il lors de la Phase Analytique ?

A

Un ou plusieurs éléments de l’échantillon vont être dosé(s), analysé(s) ou caractérisé(s) afin de répondre aux objectifs de l’analyse biomédicale.

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16
Q

Que doit-on faire à ce processus technique ?

A
  • Il doit être STANDARDISÉ : afin de limiter le risque d’erreur (notamment lié à l’incertitude de mesure) et de permettre une reproductibilité des résultats.
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17
Q

Que met en place le laboratoire pour garantir la qualitéde ces résultats ?

A
  • Des procédures de « Validation des méthodes»
  • Des procédures de «Contrôles de qualité»
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18
Q

Comment peuvent être les «Contrôles de Qualités» ? (2)

A
  • INTERNES (CQI) : «intra-laboratoire» : vérifier que le résultat obtenu dans MON LABORATOIRE est cohérents à l’échantillon de référence.
  • EXTERNES (EEQ) : «inter-laboratoire» : vérifier que les AUTRES LABORATOIRES trouvent la même chose que mes résultats.
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19
Q

Quelles sont les 2 techniques permettant le dosage ou la caractérisation d’un élément contenu dans un liquide biologique ?

A
  • Néphélométrie
  • Turbidimétrie
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20
Q

Sur quel principe reposent ces 2 méthodes ?

A

Sur le principe selon lequel la LUMIÈRE, traversant un milieu contenant des particules dont l’indice est différent de celui du milieu, diminue en intensité du fait d’un phénomène de dispersion.

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21
Q

Définition : Turbidimétrie

A

(Technique de Routine)
- on mesure la lumière TRANSMISE
→ facile, rapide, peu coûteux

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22
Q

Processus de Turbidimétrie

A

On envoie un faisceau de lumière à travers la solution.

La lumière traverse la solution et certaines particules vont absorber une partie de cette lumière.

  • Plus il y a de particules, Plus il y a une absorption importante.

La lumière restante qui traverse la solution est détectée par un capteur placé de l’autre côté du verre.
→ grâce à ce capteur on peut mesurer indirectement la concentration des particules.

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23
Q

Définition : Néphélométrie

A

(Technique de Référence)
- on mesure la lumière DIFFUSÉE : dans un angle donné α par rapport à la direction de la lumière incidente
→ long, coûteux

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24
Q

Processus de Néphélométrie

A

On place le capteur sur le côté de la solution.

Lorsque la lumière traverse la solution, les particules vont diffuser la lumière selon un angle.

  • Plus il y a de Solution, Plus la quantité de lumière est importante.

→ On compare l’angle de diffusion à une valeur de référence.

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25
Q

Que permettent de réaliser ces 2 méthodes ?

A

Des dosages immunologiques de protéines spécifiques dans différents liquides biologiques : quantifier les particules contenu dans ma solution.

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26
Q

Exemple de ce qu’on peut quantifier

A
  • les complexes immuns (Anticorps/Antigènes) :
    présence d’une infection ?
  • l’albumine, pré-albumine, CRP :
    présence d’une dénutrition ? ou d’une inflammation ?
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27
Q

Exemple : Dosage de l’Albumine

A

=> Permet de nous orienter sur : soit un état nutritionnel, soit une inflammation.

  • La Turbidimétrie permet de mesurer la concentration d’Albumine de manière rapide et précise = technique de routine, couramment utilisée dans les laboratoires cliniques.
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28
Q

En cas d’Hypoalbuminémie ?

A

< 35 g/L dans le sang.

→ État de dénutrition.

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29
Q

En cas d’Hypoalbuminémie chez la personne âgée ?

A

< 30 g/L dans le sang.

→ État de dénutrition sévère chez la personne âgée.

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30
Q

Si l’ «Albumine» est BASSE et la «Protéine C Réactive» HAUTE ?

A

= Inflammation

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31
Q

Si l’ «Albumine» est BASSE et la «Protéine C Réactive» NORMALE ?

A

= Dénutrition

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32
Q

La Phase Post-analytique comporte 3 éléments :

A

1) Validation
2) Interprétation contextuelle du résultat
3) Communication appropriée du résultat au prescripteur

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33
Q

Quelles conditions, la Phase Post-analytique doit-elle respectée ?

A

Les conditions fixées à l’Article L. 1111-2, du Code de la Santé Publique.

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34
Q

Quelle est l’utilité de la Phase Post-analytique ?

A
  • Transforme les résultats vérifiés par Analyse → Validés et Interprétés par les Biologistes médicaux.
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35
Q

Que retrouve-t-on dans cette Phase Post-analytique ?

A
  • Les règles de traitement des échantillons parés analyse
  • La conservation des échantillons
  • L’élimination des échantillons
  • L’archivage des enregistrements
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36
Q

En quoi la Phase Post-analytique est-elle cruciale ?

A

Permet de répondre à une question : comme un diagnostic d’une infection grave ou le dosage d’un médicament et permet au médecin d’adapter en fonction sa prise en charge.

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37
Q

Comment doit-être la communication, pour qu’elle soit efficace ?

A

Doit être précise, aisément compréhensible par le prescripteur, et réalisée dans un délai adapté à la prise en charge du patient.

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38
Q

Définition : Dialogue Clinico-Biologiste

A

= la communication entre le Biologiste Médical et le Prescripteur.

→ une activité essentielle et quotidienne du Biologiste.

  • c’est à ce moment que s’installe la relation de CONFRATERNALITÉ avec les autres médecins/biologistes.
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39
Q

Que permet le Dialogue Clinico-Biologique ?

A

Permet de conseiller le médecin clinicien sur le meilleur examen à prescrire (en fonction de l’objectif recherché), et/ou réaliser un diagnostic « para-clinique » modifiant la prise en charge du patient.

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40
Q

Définition : Biochimie Clinique

A

= La biochimie appliquée à un processus physiopathologique humain.

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41
Q

Quel est le but de la Biochimie Clinique ?

A

De déterminer un mode efficient dépistage, un diagnostic, un pronostic, de suivre l’évolution d’une maladie de même que l’efficacité d’un traitement.

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42
Q

Quelles sont les 3 sous-unités de la Biochimie Clinique ?

A
  • Biochimie Générale
  • Biochimie Spécialisée
  • Biologie Délocalisée
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43
Q

Définition : Biochimie Générale

A

= le plus gros volume des analyses de biologie médicale.

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44
Q

Exemples des Analyses les plus courantes

A
  • le ionogramme : dépister un trouble hydro-électrolytique dans l’organisme
  • le dépistage : de troubles métaboliques = Diabète / Dyslipidémie / Dénutrition
  • le dépistage d’une dysfonction d’organe
  • le dépistage d’une infection ou d’un syndrome inflammatoire biologique
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45
Q

Quel est le cation le plus abondant dans l’organisme ?

A

Le POTASSIUM (ion K+)

→ 98% intracellulaire : présence d’une pompe Na/K ATPase sur les membranes des cellules.

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46
Q

Concernant l’excrétion du Potassium…

A

90% du Potassium ingéré est excrété par les reins, grâce à une sécrétion tubulaire distale médiée par l’adostérone.

47
Q

Qu’est-ce qui peut modifier les échanges au niveau du Néphron ?

A

De nombreux médicaments / hormones.

48
Q

Définition : AUGMENTATION du Potassium dans le sang

A

HYPERKALIÉMIE (K+ > 4,5 mmol/L)

49
Q

Définition : DIMINUTION du Potassium dans le sang

A

HYPOKALIÉMIE (K+ < 3,5 mmol/L)

50
Q

Que faut-il faire pour interpréter un trouble de la Kaliémie ?

A

Doser la kaliurèse = la concentration du potassium dans les urines.

  • afin de déterminer l’origine de l’augmentation ou de la diminution de la kaliémie.
51
Q

Pourquoi le Potassium est-il important dans notre corps ?

A

Joue un rôle important dans le bon fonctionnement de notre corps : au niveau des muscles et système cardiovasculaire.

52
Q

Quelles sont les manifestations cliniques d’une Hypokaliémie ? (5)

A
  • Asthénie
  • Faiblesse musculaire, myalgie, crampes
  • Constipation
  • Troubles du rythme cardiaque (certains graves pouvant aller jusqu’à la fibrillation auriculaire ou ventriculaire et engendrer un arrêt cardio-respiratoire)
  • Syndrome poly-uro poly-dypsique
53
Q

Quelles sont les manifestations cliniques d’une Hyperkaliémie ? (2)

A
  • Troubles neuro-musculaires : paresthésies, parésie voire tétraparésie (des 4 membres).
  • Troubles cardiaques : trouble de la conduction et du rythme pouvant également aboutir à une
    fibrillation ventriculaire.
54
Q

Quelles sont les causes principales d’une Dyskaliémie ? (3)

A
  • Troubles des apports de potassium
  • Troubles des pertes de potassium
  • Trouble de répartition du potassium entre le milieu intra- et extra-cellulaire (ou shift cellulaire)
55
Q

La Biochimie Spécialisée : Amélioration du diagnostic anténatale de Trisomie 21

A
  • Triple Test
    OU
  • Test combiné des marqueurs sériques maternels au 1er semestre de grossesse associé à la mesure de clarté nucale

→ pas cher et non invasif

56
Q

Quel est l’objectif de ces tests ?

A

Évaluer le risque de Trisomie 21

57
Q

Définition : Trisomie 21

A
  • Aneuploïdie (anomalie de nombre)
    => 3 chromosomes 21
  • risque augmente avec l’âge
  • Test non invasif
58
Q

Quels sont les 3 paramètres qui ce Test prend en compte ?

A
  • 2 paramètres biologiques : Marqueur PAPP-A et Bêta-HCG libre
  • 1 marqueur échographique : Mesure de la clarté nucale
59
Q

Valeur de la clarté nucale NORMALE

A

< 3,5 mm

60
Q

Valeur de la clarté nucale FŒTUS TRISOMIQUE

A

> 3,5 mm

61
Q

Valeur du groupe NON À RISQUE de Trisomie 21

A

< 1/1000

62
Q

Valeur du groupe à risque INTERMÉDIAIRE

A

Entre 1/51 et 1/1000 = test d’ADN libre circulant fœtale peut être proposé

63
Q

Valeur du groupe à risque ACCRU

A

> 1/50 = Amniocentèse pour établir le caryotype du fœtus

64
Q

Définition : Amniocentèse

A

= Prélèvement de liquide amniotique (geste invasif) afin de récupérer de l’ADN fœtal dans le cadre d’analyse (caryotype) de maladie génétique en vue d’établir un diagnostic.

65
Q

Le test a une sensibilité de 85-87%

A
  • Probabilité d’être positif lorsqu’on est malade.
66
Q

Le test a une spécificité de 95%

A
  • Probabilité d’être testé négatif lorsqu’on est pas malade.
67
Q

Définition : Hématologie

A

= Discipline de la biologie médicale qui étudie les maladies du sang = hémopathies.

68
Q

Quel est le but de l’Hématologie ?

A

De diagnostiquer les anomalies (quantitatives ou qualitative) des 3 lignées sanguines.

69
Q

Quelles sont les 3 lignées sanguines ?

A
  • Érythroblastique (Globule rouge/Hématies)
  • Granulocytaires
  • Mégacarocytaire (Plaquettes)
70
Q

L’Hématologie s’intéresse également à une autre spécialité, laquelle ?

A

=> l’Hémostase : intérêt pour les anomalies de la «coagulation du sang»

71
Q

À quoi sont liés le plus souvent les Hémopathies ?

A

À une anomalie de l’Hématopoïèse.

72
Q

Définition : Hématopoïèse

A
  • Synthèse des cellules sanguines dans les organes lymphoïdes primaires : moelle osseuse et thymus
  • Différenciation au niveau des organes lymphoïdes secondaires (rate, ganglions lymphatiques)
73
Q

Quelle est l’une des anomalies les plus fréquentes en l’hématologie ?

A

L’ANÉMIE
→ taux d’hémoglobine inférieur aux valeurs normales.

74
Q

En fonction de quoi évolue le taux d’hémoglobine normal ?

A
  • du sexe
  • de l’âge
75
Q

Quelle est la méthode de référence utilisée pour doser l’hémoglobine pour pouvoir diagnostiquer une Anémie ?

A

La Méthode de Drabkin.

76
Q

Quelles sont les différentes étapes de ce dosage par la Méthode de Drabkin ?

A

1) Ajout du réactif de Drabkin et Hémolyse : les globules rouges libérant l’hémoglobine.

2) Oxydation de l’hémoglobine : en Méthémoglobine (Fe3+), par les ions ferricyanures.

3) Formation d’un complexe : la cyanméthémoglobine, grâce aux ions cyanures.

77
Q

Processus de détermination de la quantité d’Hémoglobine

A

=> Après la formation du complexe : Cyanméthémoglobine.

  • On va déterminer la Densité Optique ou Absorbance de cette solution.
    → on utilise un Phonomètre à la longueur d’onde d’absorption maximal de la cyanméthémoglobine (540 nm).
78
Q

Que nous dis la Loi de Beer Lambert sur le lien Absorbance / Densité Optique et la Quantité d’hémoglobine ?

A

Il y a proportionnalité entre l’Absorbance / Densité Optique et la Quantité d’hémoglobine.

79
Q

Que va-t-on réaliser afin de déterminer la quantité d’hémoglobine ?

A

Une courbe de calibration.

→ La quantité d’hémoglobine est déterminée par comparaison avec les Densités Optiques mesurées pour des concentrations connues d’hémoglobine.

80
Q

À quoi fait référence l’Anémie ?

A
  • À une diminution de la quantité d’hémoglobine.
    OU
  • À une diminution du nombre de Globules Rouges dans le sang (hypoxémie).
81
Q

Qu’entraîne l’Anémie ?

A

→ une diminution de l’apport en oxygène dans les tissus = HYPOXIE.

82
Q

Quels sont les signes cliniques de l’Anémie ?

A
  • Signes Physiques : (médecin)
    - pâleur cutanéo-muqueuse
    - souffle cardiaque systolique
  • Signes Fonctionnels : (patient)
    - asthénie
    - dyspnée d’effort puis de repos
    - tachycardie
    - vertiges
    - céphalées
83
Q

Définition : Anémies Centrales

A

→ atteinte au niveau de la moelle osseuse.

→ taux de Réticulocytes constamment bas : < 150 x 10^9/L.

= Anémies Arégénératives

84
Q

Quelles sont les causes de ces Anémies Arégénératives (centrales) ? (6)

A
  • Disparition des cellules souches de la moelle osseuse : responsable de la production de Globules Rouges.
  • Dysfonctionnement médullaire (de la moelle osseuse).
  • Envahissement de la moelle osseuse : cancer.
  • Diminution de la stimulation hormonale.
  • Manque de matière première : carences nutritionnelles.
  • Production d’inhibiteurs de l’érythropoïèse.
85
Q

Définition : Anémies Périphériques

A

→ la moelle fonctionne de manière NORMALE

→ le taux de Réticulocytes élevé : > 150 x 10^9/L.

= Anémies Régénératives

86
Q

Quelles sont les causes de ces Anémies Régénératives (périphériques) ? (6)

A
  • Perte excessive du sang.
  • Hémolyse des Globules Rouges avant leur durée de vie normale (environ 120 jours).
87
Q

Quelles sont les 4 sous-disciplines de la Microbiologie Clinique ?

A
  • la Bactériologie
  • la Virologie
  • la Mycologie-parasitologie
  • l’Hygiène hospitalière
88
Q

Quel est l’objectif de la Microbiologie Clinique ?

A

=> de Détecter un agent infectieux, Évaluer les alternatives thérapeutiques : pour traiter l’infection et limiter sa propagation.

89
Q

Quelles sont les 2 méthodes de détection d’un micro-organisme ?

A
  • Méthodes DIRECTES
  • Méthodes INDIRECTES
90
Q

Définition : Méthodes Directes

A

=> On met directement en évidence le microorganisme
(examen direct au microscope, culture, mise en évidence d’un antigène, mise en évidence du génome par amplification génique…)

91
Q

Définition : Méthodes Indirectes

A

=> mise en évidence d’une conséquence de la présence du microorganisme dans l’organisme hôte :
- la sérologie = la mise en évidence des anticorps dirigés contre les antigènes du microorganisme infectant.

92
Q

Quelles sont les 3 étapes de la Bactériologie Médicale ?

A
  • J0 = Examen Direct : le jour de réception de prélèvement au laboratoire.
  • J1 = Identification d’une culture bactérienne (pour les bactéries cultivables) : un jour après la réception du prélèvement.
  • J2 = Évaluation de la sensibilité aux antibiotiques de la Bactérie mis en évidence : un jour après la réception du prélèvement.
93
Q

Étape du J0

A

=> observer directement le prélèvement sous le Microscope + Examen Direct Simple : État Frais ou Coloration.

94
Q

Que permet l’État Frais ?

A

=> permet de mettre en évidence de gros microorganismes : les levures.

=> permet d’évaluer la mobilité des bactéries.

95
Q

Quelle est la coloration principale utilisée en Bactériologie ?

A

La coloration de GRAM : permet de différentier les microorganismes en fonction de leur FORME (bacille qui signifie bâtonnet ou cocci qui signifie boule) et de leur COULEUR.

96
Q

Comment apparaissent les Bactéries «à GRAM positif» ?

A

En violet.

97
Q

Comment apparaissent les Bactéries «à GRAM négatif» ?

A

En rose clair.

98
Q

Définition : Staphylocoques

A

= des cocci à Gram positif : « en amas » ou « en grappe de raisin » ou « en tétrade ».

99
Q

Définition : Streptocoques

A

= des cocci à Gram positif : « en chainettes ».

100
Q

Étape du J1

A

→ Spectométrie de masse type MALDI-TOF

= identifier/analyser les macromolécules organiques/protéines du micro-organisme à partir de ma culture

  • FACILE
  • RAPIDE
  • FIABLE
101
Q

Processus de la technique de MALDI-TOF : Source MALDI

A
  • préparation de l’échantillon : dépôt d’une quantité de macromolécules sur la MATRICE.
  • le laser envoie un faisceau très puissant vers la matrice contenant les macromolécules.

=> l’interaction LASER/MATRICE = vaporisation, ionisation et stabilisation de ces macromolécules.

102
Q

Processus de la technique de MALDI-TOF : TOF

A

→ les Biomolécules chargées (ions) crées sont propulsées dans un tube TOF (Time Of Flight).

  • cheminent dans ce tube : atteignent un DÉTECTEUR à l’extrémité.
103
Q

Processus de la technique de MALDI-TOF : ANALYSE

A
  • le détecteur mesure le temps qu’il faut aux ions des bactéries pour parcourir le tube en vol : en fonction de leur poids et de leur charge.

→ retranscription sous forme de courbe = SPECTRE.

104
Q

Comment on identifie la bactérie à partir de son spectre ?

A

Chaque bactérie a un profil propre, donc chaque bactérie mettra un certain temps pour atteindre le détecteur.

Ce temps de vol est ensuite comparé à une base de données contenant les temps de vol de nombreuses bactéries connues
= indice de FIABILITÉ.

105
Q

Étape du J2

A

=> Évaluation de la sensibilité du mircoorganisme aux antibiotiques.

  • Réalise un ANTIBIOGRAMME :
    → suspension de la bactérie sur une gélose
    → disposition de disques d’antibiotiques
    → observation des diamètre d’inhibition
106
Q

Plus le diamètre d’inhibition est GRAND…

A

Plus la bactérie est SENSIBLE à l’antibiotique testé.

107
Q

Quels sont les 3 seuils de sensibilité du diamètre ?

A
  • Sensible
  • Sensible à forte exposition
  • Résistante à l’antibiotique
108
Q

Par rapport à la CMI = Concentration Minimale Inhibitrice

A

=> Plus la CMI est FAIBLE, Plus la bactérie est SENSIBLE.

  • Si on a un GRAND diamètre d’inhibition = petite CMI.
109
Q

Définition : CMI

A

→ Concentration Minimale Inhibitrice

= Faible concentration en antibiotique capable d’inhiber toute une culture visible après 18h d’incubation.

110
Q

Quelles sont les disciplines spécialisées de la Biologie Médicale ?

A
  • la Génétique
  • la Biologie de la reproduction
  • le Laboratoire HLA
  • l’Immunologie clinique dont l’Immuno-hématologie
111
Q

Pourquoi les 3 phases de l’Analyse Biomédicale sont-elles essentielles ?

A

Pour que celle-ci soit FIABLE et REPRODUCTIBLE !

  • Pré-analytique
  • Analytique
  • Post-analytique
112
Q

Qu’a permis l’évolution importante des techniques depuis les années 2000 ?

A

Une optimisation et une diversification des Analyses Biomédicales.

  • la Biologie Médicale est aujourd’hui ESSENTIELLE dans la prise en charge des patients.
113
Q

Quelle est l’étape ESSENTIELLE pour définir une analyse la plus adaptée et un communication des résultats optimale ?

A

Le Dialogue Clinico-Biologique !

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