Serología inmunológica Flashcards
Objetivos
- diagnóstico de enfermedades
- Diagnóstico de transtornos del sistema inmune
- Evaluación de respuesta a vacuna
- Tipo de sangre
- Compatibilidad de órganos
¿Qué se pueden detectar en la serología inmunologica?
Proteínas: inmunoglobulinas, hormonas peptídicas, etc.
Antígenos víricos: virus de la hepatitis B (VHB), de la inmunodeficiencia humana (VIH), etc.
Hormonas esteroideas: cortisol, testosterona, etc.
Prostaglandinas:PGE2, (PGF2α).
Medicamentos: antiepilépticos, antibióticos, etc.
Drogas de abuso, vitaminas y otras.
Célula lifática que se encarga de la formación de inmunoglobulinas
Línfocito B
¿Qué son los ac monoclonales?
Ac de una misma clona de hibridomas que solo va contra una parte del antigeno (epítopo)
Parte del antígeno que se reconoce
Epítopo
Carcterísticas de los antígenos
Estables
Afinidad
(tambien poseen epítopo)
Dos tipos de reacciones de ag - ac
Algutinación y precipitación
Aglutinación
Ac (solubles) detectan Ag (insolubles, en membrana), se unen -> se genera un gran conglemorado/macrocomplejo y hace que sea mas facil su detección)
ej. aglutinación por diferente grupo sanguineo ABO
Precipitación
Cuando ac (soluble) detecta ag (soluble, como particulas víricas) -> se unen y precipitan (se caen)-> sea más fácil la eliminación
Sistemas para determinar el grupo sanguíneo
ABO
y
RH
Anticuerpos que van en contra de la membrana
aloanticuerpos
Otro nombre con el que se identifica al RH
Antígeno D (y si da contra d, lo haces de nuevo contra antígeno D devil)
Tipo de grupo sanguíneo mas común
O+
Qué se le pone a las 3 gotas de sangre par determinar el grupo sanguíneo?
Anti A (azúl)
Anti B (amarillo)
Anti RH (transparente)
Prueba de coombs directa en que enfs se hace
Anemia Hemolítica del RN y anemias hemolíticas autoinmune
Describe brevemente la prueba de coombs directa
Se le pone el reactivo de coombs que tiene anti IgG ->van a detectar ac unidos al eritrocito y se van a aglutinar si es positiva.
Directa porque es directamente en los eritrocitos
Prueba para saber si hay inmunización Rh a la madre y para pruebas cruzadas
Prueba de coombs indirecta
Decribe brevemente la prueba de coombs indirecta
Igual reactivo de coombs pero actuan en el suero del paciente -> detectan ac flotando en sangre y se aglutinan
Indirecta por ser en suero
Pruebas para la donación de sangre
Pruebas cruzadas
Prueba de coombs indirecta es prueba cruzada basicamente
Para realizar la prueba del sistema ABO y prueba cruzada se necesita una__
Suspensión de eritrocitos al 5%
Tipos de pruebas cruzadas
Mayor: eritrocitos del donador y plasma del receptor
Menor: eritrocitos del receptor y plasma del donador
Se utiliza igual el autotestigo
Para que se utiliza el tubo de autotestigo?
Para determinar que no haya autoanticuerpos. Lleva suero del receptor con eritrocitos del receptor
La prueba cruzada se hace en que fases
Salina y Albúmina
Se pueden ver aglutinaciones de 1 a 4 cruces en la prueba dependiendo la cantidad de ac que hay y la viadez de los mismos
Tipos de pruebas de precipitación y su función
- Inmunodifusión radial (detecta IgG,M,A, ag solubres y del complemento C3 y C4)
- Inmunoelectroforesis (sobre todo para la identificación de proteínas en liquidos biológicos)
Función es cuantificar antigenos y anticuerpos
Para que usas Western Blot
Para detección de proteínas por pesos moleculares mediante un gel y electroforesis
Como para VIH (y es mas específico para detección de este)
Ojo para VIH se debe hacer elisa también
Cómo es el marcaje de micropartículas
Se usa la turbidimetría y nefelometría para la determinación de proteínas
Turbidimetría - deja pasar luz
Nefelometría - dispersa la luz
Elisa
Inmunoanalisis por marcaje el cual a menor concentración mayor señal, siendo inversamente proporcional
Competititivos
Elisa
Inmunoanálisis que es una reacción lineal, a mayor concentración, mayor señal
No competitivos (tipo sandwich)
observa
- Heterógenos se separan por lavado
- Homógenos no se separan los complejos, son menos sensibles
Inmunoanálisis que es una reacción lineal, a mayor concentración, mayor señal
No competitivos (tipo sandwich)
¿Qué se usa en el inmmunoanálisis por marcaje?
Radioisótopos, fluorescencia, inmunoadsorción ligado a enzimas y electroquimioluminiscencia
Orden del Inmunoanalisis no competitivo tipo sandwich
Anticuerpos en soporte
Añadir muestra
Añadir nuevo anticuerpo marcado
Inmunoanálisis competitivo
- Compiten antígeno y anticuerpo
- Ag inversamente proporcional al ac unido al ag
Método para la cuantificacion de analitos
RIA
IRMA
Inmunonefelometría
Electroquimioluminiscencia
Errores preanalíticos
- Anticuerpos Heterófilos HAMA
- Factor reumatoide
- Gamaglobulinas
- Ancianos
- Autonticuerpos
Principal error analítico
Por calibración
La inmunocromatografía permite diagnóstico rápido de:
(muestras de saliva, sangre orina, etc)
- Hormonas
- Drogas
- Marcadores cardiacos
- Marcadores tumorales
- Antígenos virales
Zonas de la prueba de inmunocromatografía
- Zona 1
- Zona 2 (diagnóstico)
- Zona 3 (control)
Anticuerpo del síndrome de Sjörgen
Anticuerpos Anti-SSA/Ro y AntiSSB/La
Anticuerpos para lupus
Anticuerpos antinucleares positivos
Y anticuerpos Anti SM
C3 y C4 disminuidos (indican la respuesta inmune exacerbada)
ANti LKLM 1 se asocia a
Hepatitis autoinmune tipo 2 y hepatitis C
Anti LMK-2
Anti LMK 3
- hepatitis inducida por halotano
- Virus D
Anticuerpos antimúsculo liso (ASMA) se asocia con
hepatitis crónica autoinmune de tipo 1
Subtipo: anticuerpos antiactina.
Qué es el factor reumatoide
Enfs a las que se relaciona
- Anticuerpos dirigidos contra la porción Fc de la Ig
- Artritis reumatoide 90% Síndrome de Sjögren 75 - 95%, Enfermedades pulmonares inflamatorias o fibrosante y cirrosis biliar primaria
no es TAN especifico
Anticuerpos anti CCP (Antipéptico citrulinado)
Artritis reumatoide
Enfermedad
Anticuerpos dirigidos contra fosfolípidos aniónicos o proteínas plasmáticas unidasafosfolípidos aniónicos. (Cardiolipinas)
Sx de antifosfolípidos
Cuadro clínico: trombosis, tanto arteriales como venosas, abortos de repetición y trombocitopenia
Tipos de AC antifosfolípidos
1- Anticoagulante lúpico
2. Anticuerpos anticardiolipina
3. Anticuerpos anti B2 glucoproteina
Principales ac antieritrocitarios
- Autoanticuerpos calientes frente a eritrocitos: anemias hemolíticasautoinmunes
- Hemolisinas de Donath-Landsteiner: IgG’s se fijan a los hematíes en frío yprovocan hemólisis a 37 °C (hemoglobinuria paroxística a frigore).
Ac presentes en Sx de Raynaud
Crioglobulinas
Son Inmunoglobulinas que precipitan por exposición al frío y que se redisuelven por calentamiento
Anticuerpos se dirigen contra múltiples antígenos plaquetarios (glucoproteínas IIb/IIIa, Ib/IX, Ia/IIa, IV, V,
Ac presentes en DM1
- Ac antiplaquetarios -> púrpura trombocitopénica ideopática
- Anticuerpos antiislotes pancreáticos
Anticuerpo para transplantes y en alergias
trasplantes HLA, Alergias IgE
Identificación, cuantificación y clasificación de células individuales en una muestra, basada en su fluorescencia.
Correlacionan tamaño con granularidad específica de cadasubtipo leucocitario, así como su capacidad de emitirfluorescencia
Citometria de flujo
Usos de la citometría de flujo
- Evaluación de enfermedades hematológicas
- Evaluación de inmunodeficiencias
- Trasplante autólogo/alogénico hematopoyético
- Enfermedades autoinmunes
Enf en la que se suele medir el CD4 en una citometría de flujo
VIH
