Réponses effectrices deuxième partie

Question 1

Rappel: que sont les cellules cytotoxiques effectrices ? (2)

Answer 1

CD8 et NK

Question 2

Rôle des LT CD8.

Answer 2

Les lymphocytes T CD8 sont essentiels pour éliminer des cellules infectées avec un virus ou des tumeurs (soi altéré). Ces lymphocytes T sont restreints aux molécules de classe I du CMH. Comme toutes les cellules nuclées expriment le CMHI, cela leur permet d’éliminer tous les types de cellules avec un soi altéré (infectées ou cancéreuses).

Question 3

Quels sont les signaux requis pour la différentiation des CTL précurseurs en CTL (CD8) ? (3)

Answer 3

1: TCR
2: co-stimulation
3: IL-2

Question 4

Comment doit être la CPA pour faire la reconnaissance antigénique à un LT ?

Answer 4

Doit être éduquée. Cette éducation peut être induite par les cellules T auxiliaires CD4 ou par les produits microbiens.

Question 5

La T CD4 via l’interaction ____ peut induire l’expression de ____ sur les CPA.

Answer 5

1: CD40L-CD40
2: CD80/86

Question 6

Quels sont les modèles d’aide des CD4 aux CD8 ? (2)

Answer 6

1: Séquentiel
2: Simultané

Question 7

Modèle séquentiel

Answer 7

La cellule T auxiliaire effectrice (Th1) va éduquer la CPA. Cela se fera via l’interaction CD40L (sur T CD4) et CD40 (sur CPA) ce qui mènera à l’augmentation de l’expression des ligands de costimulation CD80-CD86

Question 8

Modèle simultané

Answer 8

Les cellules T CD4 et CD8 interagissent sur la même CPA. La production d’IL-2 par CD4 qui aide à la différenciation des CTL

Question 9

Comment les CTLs tuent leur cible ? (2)

Answer 9

1: Libération dirigée du contenu de granules
2: Cascade de signalisation induite par Fas

Question 10

Lire

Answer 10

La reconnaissance antigénique (seul signal requis) mène à la formation d’un conjugué CTL-cible. La signalisation via le TCR augmente l’adhésion entre la CTL et la cible en faisant augmenter l’affinité de LFA-1 (sur CTL) pour son ligand ICAM-1 (sur cible). LFA-1 reste en état de haute affinité pendant seulement 5 à 10 minutes. La stabilisation de l’interaction CTL-cible permet le réarrangement du cytoplasme afin de dirigé les granules des CTL vers la cible (attaque membranaire). Suite à la diminution de l’affinité de LFA-1 pour ICAM-1, il y aura dissociation de la CTL et de la cible. La cible mourra ensuite par apoptose tandis que la CTL pourra aller à nouveau agir sur une autre cible.

Question 11

Quelles sont les étapes de la destruction des cellules cibles par un CTL ? (4)

Answer 11

1: Formation d’un conjugué
2: Attaque membranaire
3: Dissociation du CTL
4: Destruction de la cible

Question 12

Que contiennent les granules cytoplasmiques de CTL ? (4)

Answer 12

1: Médient la lésion de la cible
2: Perforines
3: Sérines protéases (granzymes)
4: Seulement CTL activés contiennent des granules

Question 13

Comment se l’orientation des granules cytotoxiques vers leur cible ?

Answer 13

Repositionnement du golgi et des granules à la jonction, relâchement dans l’espace de la jonction du contenu des granules

Question 14

Mode d’action des perforines.

Answer 14

Lorsque les monomères de perforine contactent la membrane de la cible, ils subissent un changement de conformation qui expose un domaine amphipathique qui s’insère dans la membrane. Le monomère polymérise pour former des pores de 5-20 nm de diamètre.

Question 15

Mode d’action des granzymes

Answer 15

Le granzyme pénètre dans la cellule cible grâce à un processus d’endocytose. Le granzyme se lie au récepteur de mannose 6-phosphate. Les complexes ainsi formés sont internalisés et apparaissent dans des vésicules internes.

Question 16

Action combinée perforines et granzymes.

Answer 16

La perforine internalisée en même temps va former des pores qui permettront la libération du granzyme des vésicules dans le cytoplasme de la cellule cible.

Question 17

Qu’est-ce que la granzyme B ?

Answer 17

Le granzyme B initie une cascade de réactions qui mène à la fragmentation de l’ADN en 250 pb typique de l’apoptose. Ceci fragmentera aussi l’ADN viral

Question 18

Qu’est-ce qui protège les CTL de l’action des granzymes ?

Answer 18

L’expression des serines

Question 19

Vrai ou faux, dans certaines circonstances, il y a apoptose des cibles en absence de perforines et granzymes

Answer 19

Vrai

Question 20

Lire

Answer 20

Des CTLs alloréactives possédant ou non la perforine sont générées grâce à la réaction mixte lymphocytaire (panneau a). La réaction mixte lymphocytaire consiste à faire répondre les cellules T alloréactives en cultivant les cellules T possédant un haplotype du CMH donné (ici H-2b) avec des lymphocytes d’une souris possédant un autre haplotype du CMH (ici H-2d). Ceci permettra aux cellules T de la souris H-2b qui sont alloréactives envers les molécules du CMH de l’haplotype H-2d de s’activer, proliférer et se différencier en CTL. Les cellules stimulatrices, celles de la souris H-2d, sont tués (à l’aide de la mytomice C) afin d’avoir une réponse unidirectionnelle (certains lymphocytes H-2d seront alloréactifs envers H-2b)

Question 21

Lire

Answer 21

Ici on teste la capacité des CTLs à tuer des cibles
Les CTL normales (qui possèdent perforine) sont capables de tuer des cibles normales et des cibles n’exprimant pas Fas; pusiqu’elles peuvent utiliser le système perforine/granzyme pour tuer les cibles.
Les CTL déficientes en perforine peuvent tuer des cibles normales ce qui indique qu’elles possèdent un deuxième mécanisme qui lui permet de tuer des cibles.
Les CTL déficientes en perforine ne peuvent pas tuer des cibles qui n’expriment pas Fas. Ceci indique que le deuxième mécanisme permettant de tuer des cibles utilisent l’interaction FasL (exprimé par les CTL) et Fas (exprimé par les cibles).

Question 22

Donc, de quoi dépend le second mécanisme de cytotoxicité des CTL ?

Answer 22

Fas

Question 23

Qu’est-ce que l’apoptose ?

Answer 23

La mort cellulaire programmée (apoptose) est un mécanisme de mort cellulaire par lequel la cellule meure de l’intérieur et est fragmentée en vésicules associées aux membranes qui peuvent être rapidement phagocytés par les macrophages environnants. Ce type de mort mène à une inflammation minimale.

Question 24

Quelle enzyme est utilisée lors de l’apoptose ?

Answer 24

L’activation de l’apoptose fait appel à l’activation des caspases; ce sont des protéases portant des résidus cystéines dans leur site actif qui clivent après des acides aspartiques

Question 25

Voie de signalisation Fas (8)

Answer 25

La liaison au ligand, FasL, provoque la trimérisation du récepteur Fas.

Interaction entre les domaines de mort (DD, «death domain») de Fas

Permet de recruter des DD de la protéine FADD («Fas-associated death domain)

FADD contient un domain de mort effecteur DED («death effector domain»)

Ceux-ci (DED de FADD) se lient au domaine DED de la pro-caspase-8 (sous forme pro-caspase, les caspases sont inactives, elles doivent être clivés pour produire une caspase active). Ceci forme le DISC («death inducing signaling complex»; DD de Fas-FADD-pro-caspase-8)

Provoque donc la multimérisation de la pro-caspase-8 ce qui induit le clivage en caspase-8 active

La caspase-8 clive de nombreuses protéines cibles qui jouent un rôle déterminant dans l’apoptose dont le clivage des caspases effectrices 3 et 7

Résultat final: condensation du matériel nucléaire, dégradation de l’ADN nucléaire en fragment de 240pb et enfin la décomposition de la cellule en fragments entourés de membrane facilement ingérables

Question 26

Que sont les caspases ?

Answer 26

Les caspases coupent après un résidu acide aspartique. Les caspases sont présentes sous forme inactive dans la cellule, pro-caspase, qui ont besoin d’un clivage protéolytique pour devenir active. Ceci initie une cascade de clivage d’autres pro-caspases qui finit par activer une caspase effectrice (csapase 3) de l’apoptose.

Question 27

Résumé de la voie de mort Fas.

Answer 27

Lors de l’apoptose induite par Fas, la liaison de FasL mène au recrutement de la protéine FADD (protéine avec domaine de mort) au récepteur Fas, ce complexe s’associe à la pro-caspase 8 ce qui mène au clivage de la pro-caspase 8 en caspase 8 qui déclenche une cascade apoptotique

Question 28

Comment est-ce que les granzymes activent la caspase ?

Answer 28

Les granzymes sont protéolytiques et ont plusieurs cibles. Ils peuvent directement cliver la pro-caspase 3 en caspase 3 qui est la caspase effectrice de l’apoptose. Les granzymes peuvent aussi cliver Bid, ceci induit la libération du cytochrome c mitochondrial et finalement à l’activation de la caspase 9 qui elle activera la caspase 3.

Question 29

Comment se déroule la réponse immune adaptative envers un virus si la DC n’est pas infectée ?

Answer 29

La DC captera les protéines virales du milieu extracellulaire via macropinocytose. Les protéines virales seront dégradées dans l’endosome. Certains peptides du virus seront chargés sur les molécules de classe I du CMH

Lorsque la DC n’est pas infectée, elle va uniquement avoir des protéines virales dans les endosomes. Le mécanisme de la présentation croisée permettra de charger des peptides viraux sur les molécules de classe I du CMH (mécanisme unique aux DC)

Question 30

Comment se déroule la réponse immune adaptative envers un virus si la DC est infectée ?

Answer 30

La DC infectée par le virus produira des particules virales dans son cytoplasme. Certaines protéines virales seront dégradées en peptide par le protéasome. Les peptides viraux seront transportés au réticulum endoplasmique pour être chargés sur les molécules de classe I du CMH

Question 31

Qu’est-ce qui se passe finalement avec la DC en réponse immune adaptative envers un virus ?

Answer 31

La DC percevra le signal danger via les PRR ce qui provoquera sa maturation: gain de l’expression de CD80/CD86, augmentation de l’expression à la surface cellulaire du CMHI et II, et migration au ganglion lymphatique drainant le site d’infection

Question 32

Comment se fait l’activation des T naïfs par la DC ?

Answer 32

Au sein de la zone T du ganglion lymphatique, les DC matures et exprimant des complexes peptide viral-CMHI et peptide viral-CMHII pourront activer les lymphocytes T naifs CD4+ (via peptide viral-CMHII) et CD8+ (via peptide viral-CMHI)

Question 33

Que font les CD8 une fois activée par la DC ?

Answer 33

Les CD8 eff (ou CTL) produites dans le ganglion lymphatique vont migrer au tissu infecté via le sang. Ils entreront uniquement dans le tissu infecté via les vaisseaux sanguins inflammés (à cause de l’infection). Dans le tissu infecté, les CTL vont tuer les cellules épithéliales infectées via la reconnaissance par le RCT des complexes peptide viral-CMHI exprimés à la surface cellulaire des cellules infectées. Les CTL vont tuer les cibles infectées via perforine/granzyme ou FasL/Fas

Question 34

Que font les CD4 lorsqu’ils sont activés par la DC ?

Answer 34

Les anticorps neutralisant, produits grâce à la formation du centre germinatif dans le ganglion lymphatique via l’aide des cellules T CD4+ Tfh, vont empêcher l’infection de nouvelles cellules en bloquant l’interaction du virus avec son récepteur sur les cellules épithéliales. Les anticorps produits circulent dans le sang.

Question 35

Que sont les cellules NK ?

Answer 35

Les cellules NK sont la première ligne de défense contre les pathogènes intracellulaires. Elles controlent l’infection pendant que la réponse adaptative se met en branle.

Question 36

Quels sont les cibles des cellules NK ?

Answer 36

Les cellules NK jouent un rôle majeur dans la défense contre les cellules infectées, les cellules stressées et les cellules tumorales

Question 37

Quel pourcentage des lymphocytes sont des NK ?

Answer 37

Les cellules NK représentent 5 à 10% des lymphocytes circulants

Question 38

Comment est-ce que les NK sont activés ?

Answer 38

Les cytokines de l’immunité innée (IFN-alpha, IFN-beta et IL-12) activent les cellules NK.

Question 39

Où se développent les cellules NK ?

Answer 39

Les cellules NK ne se développent pas dans le thymus, pas de réarrangement de leur récepteur, la reconnaissance de leur cible n’est pas restreinte au CMH.

Question 40

Comment est-ce que les cellules NK tuent les cellules infectées ?

Answer 40

Les NK tuent des cibles infectées comme les CTL à l’aide de granzyme/perforine et Fas/FasL. Par contre, les NK n’ont pas besoin d’être préalablement activées pour devenir cytotoxiques, elles ont toujours les granules cytotoxiques dans leur cytoplasme

Question 41

Comment est-ce qu’une cellule NK reconnaît sa cible ?

Answer 41

Les cellules NK différencient les cellules saines des cellules infectées ou cancéreuses en controlant et en intégrant les deux ensembles de signaux. Le fait qu’une cible soit tuée ou non dépend de l’équilibre entre les signaux activateurs et inhibiteurs. Puisque les signaux inhibiteurs ont un pouvoir veto sur les signaux activateurs les cellules exprimant des taux normaux de CMHI peuvent ainsi échapper à la destruction médiée par les cellules NK

Question 42

Quelles sont les catégories de récepteurs de cellules NK ? (2)

Answer 42

1: récepteur qui délivre des signaux d’inhibition
2: récepteur qui fournit des signaux d’activation

Question 43

Vrai ou faux, cellules NK expriment plusieurs récepteurs inhibiteurs et activateurs

Answer 43

Vrai

Question 44

Vrai ou faux, signaux d’inhibition ont un pouvoir de veto sur les signaux des récepteurs activateurs

Answer 44

Vrai

Question 45

Caractéristiques du récepteur activateur (RA). (4)

Answer 45

1: Certains sont des lectines de type C (ex NKG2D)

2: Certains sont des membres de la famille des récepteurs KIR

3: Les ligands de NKG2D (MIC-A, MIC-B, ULPB) sont induits par le stress cellulaire
-Dommage à l’ADN
-Infection

4: La majorité des autres ligands sont inconnus

Question 46

Caractéristiques du récepteur activateur (RI). (3)

Answer 46

1: Produisent des signaux d’inhibition lorsqu’ils reconnaissent les molécules de classe I du CMH

2: Empêchent la destruction médiée par la cellule NK, la prolifération et la libération de cytokines par les cellules NK

3: Deux groupes de RI

-Lectines de type C
-Superfamille des Ig, connus sous le nom de récepteur d’inhibition des cellules tueuses, KIR (chez l’humain ce sont la majorité des RI)

Question 47

Relire la fin de pp

Answer 47

À partir de la diapo 30