Morfologisk metodik 1 Flashcards
Vad betyder morfologi?
Läran om organismens yttre form och inre struktur
Vad menas med morfologisk metodik?
Hantering, preparation av cell och vävnadsprover inför mikroskopisk analys
Vad är histoteknik?
hantering, preparation av vävnader
Vad är cytoteknik?
Hantering, preparation av celler i kroppsvätska
Vad betyder histologi?
vävnadslära, ses makro- och mikroskopiskt
Vad betyder patologi?
läran om de sjukliga förändringarna i kroppen
Vad menas med histopatologi?
de sjukliga vävnadsrubbningarnas histologi
Vad menas med cytologi?
Cell-lära, är läran om enskilda celler.
Vad betyder PAD?
Patologisk Anatomisk Diagnos
Vad för typer av patient prov till patologisk anatomisk diagnos?
Avtryck, utstryk, biopsier-provexcision, operation-autopsy
Vad kan hända vid biopsi av tumör/cysta och vad skall du tänka på vid biopsi av tumör/cysta vad gäller nål placering?
- Runt tumören/cystan finns de inflammatorisk vävnad vilket betyder att du endast kommer att få inflammatoriska celler om du missar tumören/cystan.
- Sticker du i mitten av tumören kommer du få nekrotiska celler pga att nekros.
- Det kan också finnas intralesional blödning, träffar du detta område kommer du bara att få ut blod.
Du skall inte placera nålen i mitten utan strax om mitten för att få en så bra biopsi som möjligt.
Hur skall du tänka vad gäller val av prepareringsmetod?
Vilken frågeställning som skall besvaras, typ av vävnad samt vilket analysinstrument som skall användas
Beskriv prepareringsmomenten som ingår i rutinförförandet av PAD
- Provtagning
- utskärning
2.Fixering
- Inbäddning
- Dehydrering (kem fix.)
- Klaring (kem. fix)
- infiltrering (kem. fix)
- Inbäddning (kemisk fix.) - Snittning
- uppläggning
- bränning/fasttorkning - Visualisering
- Montering
Vad skall operationspersonal göra vid operationsögonblicket vad gäller prov omhändertagande?
De skall frysa provet i flytande kväve så de fixeras eller fixera provet med hjälp av kemisk fixering ex formalin.
Vad skall du beskriva vid utskärningen?
Makroskopisk bedömning: vävnadsbit/organ samt sjukliga förändringar beskrivs (storlek, färg, vikt, form, hur stor förändringen)
Vad skall du tänka på vid en utskärning?
Att jag skär lämpliga bitar c:a 15x15x4 mm tjocklek samt att jag skär på rätt sätt med tanke på organets olika lager.
Jag skall tänka på om jag ska använda mig av längdsnitt eller tvärsnitt, resektionsranden och den sjukliga förändringen om det ses någon sådan.
Vad är resektionsrand och vad använder man den till?
Ett randområde mellan patologiska förändringen och normalvävnad. Detta använder man för att se att hela förändringen är borttagen från patienten. Ses exempelvis ingen frisk vävnad vid resektionsrand finns sjuklig förändring kvar på/i patient
Vilket är de viktigaste momentet vid prep.framställning?
Fixering
Vad händer vid en fixering?
- Proteiner och protoplasmatiska substanser stabiliseras och vävnad hårdnar
- Enzymernas aktivitet minskas och autolys förhindras.
- Bakterier kommer ej kunna fästa på de fixerade cellerna vilket gör att ingen förruttnelse sker.
- Cellulära substanser ges olösliga och motståndskraftiga mot precessing i kommande lösningar.
- Förbereda så att ett färgat prep tydligt visar cellkärnans mönsterr, de epiteleliala cellmembranen och cytoplasman
Vad är artefakter?
Detta är veck på preparat som gör att du t.ex. kan se dubbla cell lager, detta är ej önskvärt!
Hur väljer du fixeringsmedel och fixeringsmetod?
Detta beror på val av prepareringsmetod. Man väljer fixmedel beroende på vad de är man skall leta efter; proteiner, fetter och kolhydrater.
Vad betyder fixering?
Ett avstannande i livsprocessen med minsta möjliga förändring av vävnaden.
Vad är skillnaden på immersionsfixering och perfussionsfixering?
Immersionsfixering: innebär att vävnad, som avlägsnas från en död eller
levande (biopsi) organism, genast placeras i fixativ.
Perfussionsfixering innebär att fixativ pumpas in i en levande organism via blodomloppet, hjärtat eller aortan. Fixativet tränger omedelbart in i vävnaderna via kapillärerna men det är inte någon behaglig död!!!
Vad finns de för typer av fixeringsmedel?
gelerande eller koagulerande fixeringsmedel.
Exempel på gelerande fixeringsmedel?
Formalaldehyd, glutaraldehyd, osmiumtetraoxid
Berätta om gelerande fixeringsmedel
Det är ett additivt fixeringsmedel. Metylenbryggor bildas mellan proteinerna, strukturen bibehålls och det blir ingen denaturering av proteinerna.
De gelerande fix.medlen är att föredra, dessa ger minst strukturförändringar i vävnad och är till viss del reversibla.
Berätta om koagulerande fixeringsmedel
Dessa denaturerar vävnaden genom dehydrering. De ändra proteinstrukturern och skapar en irreversibel reaktion.
Ge exempel på koagulerande fixeringsmedel
Etanol, metanol, veton och piktinsyra
Vad är skillnaden på denaturernade fix.medel och gelerande fix.medel vad gäller förändring av proteinernas form?
De denaturerade fix.medlen förändrar proteinernas form medan de gelerande inte gör de.
Epitoper hos antigen kan maskeras, hur då?
Beroende på bindningar inom och mellan proteinerna
Vad är skillnaden på koagulerande/denaturerande och okoaguelerande/gelerande fixativ?
De okoagulerande fixativen: tetriärstrukturen behålls med interna tvärbindingar och hydrofila grupper exponeras.
Koagulerande fixmedeln: tetriärstruktur öppnas, hydrofila och hydrofoba grupper exponeras.
Vad skall du tänka på vid kemisk fixering?
Volym av fixeringsmedel i förhållande till vävnad. Det skall vara neutralt 4% neutralt buffrad formalin och bör vara 10-20 ggr större än provetsvolym.
Penetrationshastigheten ca 1mm/tim
Fixtiden är 1-2 dygn
Tempratur: rumstemp
Vilka vävnadstyper kräver längre dehydreringstider?
Feta vävnader, ex bröst
Hur skall du tänka om du får in hård vävnad, exempel ben eller förkalkad vävnad?
Denna behöver urkalkas så att vävnaden blir mjuk innan bäddning.
Ge exempel på urkalkningsmedel som är starka resp svaga. När skall svag syra resp stark användas?
Svag syra = Myrsyra, vid små prep
Stark syra = decalc, parengy, vid stora prep
Vad skall du tänka på om du urkalkar med starka syror?
Vävnaden kan förstöras så att vi får en sämre histologi
Varför är EDTA-lösningar bra att använda vid urkalkning?
Dessa bevarar proteinstruktur och är bra vid immunhistokemi
Kan du påskynda en urkalkning på något sätt?
Genom mha värme eller mikrovågor
Kan du bädda hårda vävnader på något annat sätt än i parafin?
Ja, i ett hårdare material som plast
Vad ska du tänka på vad gäller fysikalisk fixering?
Jag använder mig av flytande kväve eller torris. Vid sittning använder jag kryostat. Detta är en snabb metod, men en sämre histologi kommer ses i ljusmikroskop. Det är en bra metod för vissa fortsatta preparerings och visualiseringsmetoder ex; för känsliga vävnader.
Vad är torris?
Kolsyreis och isopentan
Hur fungerar vatten vid fysikalisk metod, dvs frysning av vävnad?
Vattnet fungerar som inbäddningsmedel och stabiliserar vävnaden och proteinerna, tillsammans med inbäddningen med OCT eller Tragaant
Vad måste ske med vattnet i vävnaden vid paraffin eller plastinbäddning?
Vattnet måste avlägsnad från vävnaden genom dehydrering som är en kemisk metod, aha dehydrering med ökande alkohol koncentration.
Vad används vid klaring?
Intermedium medel, blandbart med både dehydreringsmedel och infiltrationsmedel. ex: xylen och histoclear.
Vad används vid infiltration?
inert och stabiliserande medel, ex paraffin
Vad används vid bäddning?
paraffin
Vad ska du tänka på vid färsk och frusen vävnad?
Att de finns smittorisk!
Vad skapar visualisering/färgningsmetoder och lösningar?
Kontrast mellan vävnadernas olika strukturer, celler och organeller.
Varför används täckglas?
De skyddar mot uttorkning och repor. De skapar också ett brytningsindex.
Vad för monteringsmedel används och vad skapar monteringsmedelt ?
Det skall vara inert och de skapar ett riktigt brytningsindex
Vad kan fel vid fixering orsaka?
Svårt att se detaljer i prep
Vad kan ske om fel fix.med används?
De kan bli omöjligt att reparera skadan som uppstår i vävnaden.
Vad kan ske om du skär fel vid utskärning?
Den sjukliga förändringen missas.
Vilka patientprov till cytoplasmatisk diagnos?
Abrasion, exfoliation, aspiration, smear, vätskebaseerad cytologi
Vad är abrasio prover för något?
Skrapning aha borstar för cytologiska prov ex; körtlar och gynekologiska prover
Vad är en exfoliation?
Uppsamling av vätska från kroppen innehållande celler som naturligt lossnat från epitelytan ex; upphostning eller urin
Var är aspiration?
Utsugning av vätska ex: från cysta eller benmärg
Vad finns de för typer av biopsinålar?
Biopsi-spinalvätska, biopsi-finnål, biopsi-sternal
Vad är smetar-prover?
Utstrykningsprover
Vad är en cyto-spatula?
Spatel som används vid gynekologiska prov av ex px portion och cervix
Varför är vätskebaserad cytologi så bra?
De ger en bättre provkvalitet och har automatiserad preparering
Vad ska du tänka på vid användning av formalin?
Hälsovådligt, de skall samlas i särskild behållare.
Vad ska du tänka på vid användning av xylen?
Brandfarligt, undvik inandning och hudkontakt. Skickas till destruktion.
Vad ska du tänka på vid användning av etanol?
Brandfarligt
Vad skall du tänka på vid användning av mayers HTX?
Starkt oxiderande, kan ge frätskador
Vad ska du tänka på om du använder DAB?
Cancerogent, skall skickas till destruktion
