methode exploration de la cellule Flashcards

1
Q

def electrophorese

A

séparation des molécules selon leurs poids moléculaires

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

def culture cellulaire

A

culture de cellules vivantes in vitro
avec des éléments nutritifs ( eau acide aminée glucose …)
à 37C°
+ supplément sérum de veau fœtal
ajout de substance nutritive
insuline + transferrine + Albumine
facteur de croissance: EGF NGF IL-2
EGF : endothelial grown factor
NGF: neuronal grown factor
IL-2 interleukine 2

ajout d’un indicateur coloré : le rouge phénol
condition : 37C° avec un CO2 de 5%

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

principe du sérum de veau fœtal

A

ajouter en supplément pour la division lors de la culture cellulaire

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

la couleur du rouge phénol peut varier selon le pH comment ?

A

orange si PH < 7
route si PH =7,2-7,4
violet si PH = 7,8

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

quelles sont médicale peut-on obtenir après une culture cellulaire ?

A

FIV
vaccin
thérapie cellulaire production de molécule

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

lors de la culture cellulaire que se passe t’il en culture primaire

A

la sénescence = dégradation plus rapide et ralentissement des divisions

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

étapes de l’isolement des cellules à partir d’un tissus

A

1) dissociation mécanique
2) dissociation enzymatique par des protéines
3) identifier et enrichir

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

c’est quoi la dissociation mencanique

A

c’est des prélèvement on prélève des tissus d’où le nom mécanique

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

c’est quoi la dissociation enzymatique

A

pour obtenir des cellules isolée :

cellule de la matrice extra cellulaire : avec l’enzyme trypsine qui digère al matrice
cellule de jonctions : avec EDTA agent chelateurs de Ca**

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

quel est le but d’identifier et enrichir ( 2 méthodes) ?

A

différences de propriété physique :
taille adhérence densité
ou en utilisant des anticorps qui vont reconnaître des antigènes spécifiques

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

deux méthodes pour utiliser des anticorps spécifique pour reconnaître un antigène

A

soit couplé à un support
soit couplé à un colorant fluorescent

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

principe de la cytometrie en flux =FACS

A

mesure des propriétés optiques de cellule transporté par un liquide vecteur : FLUX

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

ça veut dire quoi LASER

A

light amplification by stimulated émission or radiation

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

que permet la technique de cytometrie en flux ? et quels sont les avantages

A

d’analyser les cellules individuellements de façon automatique .

avantages :
-rapides
-applicable aux cellules vivantes
-haut débit
-marquage multiple ce qui permet d’obtenir des populations très spécifiques
- cellules vivantes peuvent être remise en culture ( si couplé à un trieur de cellule )

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

mesure vision œil nu MO ME

A

œil nu 0,2 mm 200 micron
MO 0,2 micron 200 nanomètre
ME 0,2 nanomètre si coupe biologique 2 nm

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

quelles est la différences de résolution entre ME et MO

A

facteur 100

17
Q

méthode MO (3)

A

epiflurescence
confocale
lumière blanche

18
Q

MO c’est que des cellules mortes ?

A

oui le microscope optique observe que des cellules mortes

19
Q

grossissement du MET et du MEB

A

MET 1500 a 500 000x
MEB 20 a 400 000x

20
Q

résolution du MET et du MEB

A

MET —> 2nm
MEB—> 10nm

21
Q

fonctionnement du MET

A

passage d’un faisceau d’électron à travers une coupe ultra fine
le faisceau est agrandit par les électroaimants et vient former une image sur un écran fluorescent

22
Q

fonctionnement du MEB

A

technique privilégié pour observer des surfaces relief et forme
obtention d’une image 3D

⚠️PAS DE COUPE
préparations échantillons :
-déshydratation ( à l’acétone par exemple )
donc ex fixation au glyceraldehyde et déshydratation à l’acétone
- dépôt d’or ou de platine
les électrons sont réfléchis sur l’objets et repris par un détecteur

23
Q

quelles méthode on utilise pour étudier l’ADN l’ARN et les protéines

A

southern blot : ADN (suD)
northerblot: ARN (noRd)
western blot : protéine western= Pistolet

24
Q

grâce à quelle méthode on réalise une exploration moléculaire

A

grâce au fractionnement subcellualaite

25
but de fractionnement subcelluaire et étapes
but : séparer , isoler , purifier les organites et macromolécules étape: 1) homogénéisation 2) centrifugation ultracentrifugation
26
qu’est ce qu’on obtient à une centrifugation de 1000g 10 min
noyaux et débris cellulaire
27
qu’est ce qu’on obtient à une cebtrifugation de 20 000g 20 min
mitochondries lysosomes peroxysomes
28
que est ce qu’on obtient lors d’une centrifugation de 80000g 60 min
mircrosomes RE fragmenté
29
qu’est ce qu’on obtient lors d’une ultarcentrifugation de 150 000 durant 3h
ribosomes virus macromolécules cytosol
30
quelle sont les méthodes pour analyser l’ADN (4etapes)
1) electrophorèse (séparation selon le poids moléculaire ) 2) transfert 3) hybridation 4) révélation chromatographie electrophorese séquençage des protéines
31
grâce à quoi a lieu l’hybridation quand on veut étudier l’ADN dans le cas de western Blot ?
grâce a des anticorps alors que de base on utilise des sondes spécifique !