Diagnostic de laboratoire

Question 1

Identifiez les différentes phases du cheminement diagnostique en infectiologie.

Answer 1

Phase pré-analytique
Phase analytique
Phase post-analytique

Question 2

Quelles sont les étapes de la phase pré-analytique du cheminement diagnostique en infectiologie?

Answer 2

Patient consulte avec des symptômes/signes d’une maladie infectieuse
Diagnostic clinique tentatif
Prescription de prélèvement de culture
Prélèvements identifiés au nom du patient puis acheminés au laboratoire avec la demande d’analyses
Réception des prélèvements au laboratoire

Question 3

Quelles sont les étapes de la phase analytique du cheminement diagnostique en infectiologie?

Answer 3

Examen direct sur le prélèvement
Rapport partiel émis au médecin : interprétation
Mise en culture du prélèvement
Incubation des milieux ensemencés
Lecture des milieux (le lendemain)
Identification bactérienne
Rapport partiel : interprétation
Finalisation de l'identification

Question 4

Quelles sont les étapes de la phase post-analytique du cheminement diagnostique en infectiologie?

Answer 4

Émission du rapport final

Interprétation finale du médecin

Question 5

Quelles peuvent être les différentes raisons pour effectuer un examen direct?

Answer 5

Quantifier les globules blancs présents dans le prélèvement : ceci nous informe sur la réponse inflammatoire et la purulence de l’échantillon
Quantité de polynucléaires présents dans le prélèvement
Déterminer le type de micro-organisme responsable de l’infection
Évaluer la qualité du prélèvement pour décider si le résultat final sera fiable

Question 6

À quoi servent les examens directs sur le sérum physiologique?

Answer 6

Observer la mobilité de certains micro-organismes

Évaluer rapidement les micro-organismes avec des formes particulières

Question 7

À quoi servent les examens directs faits avec de l’hydroxyde de potassium (KOH)?

Answer 7

KOH 10% digère la kératine

Utile pour diagnostiquer des éléments mycéliens (champignons) à partir de prélèvement (ongles, peau, cheveux)

Question 8

À quoi servent les examens physiques faits avec de l’iode?

Answer 8

Colore les noyaux et organelles cytoplasmiques

Utilse pour colorer rapidement les selles d’un patient et diagnostiquer la présence de protozoaires

Question 9

À quoi servent les examens physiques faits sur fond noir?

Answer 9

Utile pour mettre en évidence des micro-organismes mal visualisés en microscopie optique standard et qui se colore difficilement

Question 10

Quel est le principe de la coloration Gram?

Answer 10

Les parois pauvres en en lipides retiennent plus de colorant cristal violet (Gram +)
Quand la paroi est riche en lipides, le cristal violet ne s’imprègne pas de façon permanente. Le colorant le déloge (Gram -).

Question 11

Quelle est la technique de la coloration Gram?

Answer 11

Étaler sur une lame une couche mince du prélèvement à colorer
Fixer à la chaleur
Cristal violet (1 min)
Laver
Iode (1 min) pour bien fixer le cristal violet
Décolorer quelques secondes à l’acétone alcool
Laver
Safranine (1 min)
Laver, assécher
Lire au microscope

Question 12

Dans la coloration Gram, qu’est-ce qui implique une bactérie de couleur bleue?

Answer 12

Cristal violet n’a pas été décoloré par l’acétone alcool, donc la contre-coloration à la safranine (rose) a été inefficace
Couleur finale = bleue
Paroi pauvre en lipides : Gram +

Question 13

Dans la coloration Gram, qu’est-ce qui implique une bactérie de couleur rose?

Answer 13

Paroi riche en lipides
Cristal violet facilement libéré de la paroi par le décolorant
Contre-coloration avec la safranine est possible
Bactérie Gram -

Question 14

Quelles sont les différentes utilités de la coloration Gram?

Answer 14

Reconnaitre rapidement le ou les bactéries possiblement pathogènes
Présence ou absence de flore normale
Évaluer la réponse inflammatoire car les globules blancs sont colorés dans le processus
Quantifier de façon relative les polynucléaires versus les cellules mononucléées (distinguer infections bactériennes des infections virales)

Question 15

Expliquez le principe de la coloration de Ziehl-Neelsen.

Answer 15

Paroi de certains micro-organismesest épaisse et cireuse et ne se colore pas facilement. Une fois les parois colorées par cnotres, elles résistent à la décoloration par un solvant tel l’acide-alcool. Ce sont des bacilles acido-alcoolo résistants.

Question 16

Dans la coloration de Ziehl-Neelsen, que signifique une bactérie de couleur rose?

Answer 16

Paroi épaisse et cireuse a capté la coloration

Bacille acido-alcoolo résistant

Question 17

Dans la coloration de Ziehl-Neelsen, que signifique une bactérie de couleur bleue?

Answer 17

Paroi plus mince de la bactérie a pris le carbol fuchsin mais n’a pas résisté à la décoloration
Contre coloration avec bleu de méthylène a été possible
Pas un bacille acido-alcoolo résistant

Question 18

Quelles sont les différentes caractéristiques macroscopiques d’une culture bactérienne?

Answer 18

Forme de la colonie
Couleur de la colonie
Grosseur de la colonie
Présence ou non d’hémolyse autour de la colonie

Question 19

Donnez des exemples de liquides biologiques qui sont normalement stériles.

Answer 19

Sang
Liquide céphalo-rachidien
Liquide synovial
Liquide pleural
Si un ou plusieurs germes sont identifiés à partir de ce type de prélèvement, il faut toujours lire les rapports attentivement.

Question 20

Comment fait-on pour prélever le liquide céphalorachidien?

Answer 20

On pique à travers la peau vis-à-vis la colonne lombaire

Question 21

Qu’arrive-t-il si la ponction lombaire est difficile et qu’il faut piquer plusieurs fois avant d’obtenir du liquide?

Answer 21

On peut introduire des germes dans le liquide qu’on prélève et le germe identifié n’est pas considéré comme pathogène.

Question 22

Qu’est-ce qu’un site non stérile. Donnez des exemples.

Answer 22

Il est connu qu'une flore normale s'y trouve.
Bouche
Vagin
Peau
Rectum ou selles

Question 23

Comment interprète-t-on les résultats de cultures obtenues à partir de sites non stériles?

Answer 23

Connaitre la flore normale de ces sites
Porter attention seulement aux bactéries qui ne font pas partie de cette flore ou qui sont reconnues pour causer des infections

Question 24

Quelles sont les étapes du diagnostic rapide par méthode moléculaire (PCR)?

Answer 24

Amplification de la partie du génome du germe à identifier

Détection de la portion du génome pour confirmer la présence d’un pathogène

Question 25

Dans quelles circonstances le diagnostic rapide par méthode moléculaire (PCR) est-il particulièrement utile?

Answer 25

Quand le germe à détecter se cultive difficilement ou se trouve en faible quantité dans un prélèvement

Question 26

Quel est le principe de la sérologie?

Answer 26

Au lieu de détecter le germe directement, il s’agit de détecter la présence d’anticorps spécifiques produits par le patient colonisé ou infecté par un germe.

Question 27

Pour quel type d’infection la sérologie est-elle particulièrement utile?

Answer 27

Infections virales

Question 28

Quels sont les deux types d’anticorps utilisés en microbiologie diagnostique?

Answer 28

IgM

IgG

Question 29

Que révèle la présence d’IgM?

Answer 29

Apparaissent en phase aiguë de la maladie
Indique une infection actuelle ou très récente
Une fois la phase aiguë passée, ce type d’anticorps disparait

Question 30

Que révèle la présence IgG?

Answer 30

Apparaissent en phase de convalescence
Confèrent une immunité long terme contre l’agent infectieux en question
Absents au début de l’infection

Question 31

Décrivez le principe de séroconversion.

Answer 31

Au début de l’infection, les IgG sont absents

Un deuxième sérum prélevé au moins deux semaines plus tard révèle la présence d’IgG

Question 32

Vrai ou faux? Le principe de la séroconversion s’applique à la vaccination.

Answer 32

Vrai

Question 33

Comment se fait la détection rapide d’antigènes?

Answer 33

Par agglutination sur une base commerciale