Diagnostic de laboratoire Flashcards
Identifiez les différentes phases du cheminement diagnostique en infectiologie.
Phase pré-analytique
Phase analytique
Phase post-analytique
Quelles sont les étapes de la phase pré-analytique du cheminement diagnostique en infectiologie?
Patient consulte avec des symptômes/signes d’une maladie infectieuse
Diagnostic clinique tentatif
Prescription de prélèvement de culture
Prélèvements identifiés au nom du patient puis acheminés au laboratoire avec la demande d’analyses
Réception des prélèvements au laboratoire
Quelles sont les étapes de la phase analytique du cheminement diagnostique en infectiologie?
Examen direct sur le prélèvement Rapport partiel émis au médecin : interprétation Mise en culture du prélèvement Incubation des milieux ensemencés Lecture des milieux (le lendemain) Identification bactérienne Rapport partiel : interprétation Finalisation de l'identification
Quelles sont les étapes de la phase post-analytique du cheminement diagnostique en infectiologie?
Émission du rapport final
Interprétation finale du médecin
Quelles peuvent être les différentes raisons pour effectuer un examen direct?
Quantifier les globules blancs présents dans le prélèvement : ceci nous informe sur la réponse inflammatoire et la purulence de l’échantillon
Quantité de polynucléaires présents dans le prélèvement
Déterminer le type de micro-organisme responsable de l’infection
Évaluer la qualité du prélèvement pour décider si le résultat final sera fiable
À quoi servent les examens directs sur le sérum physiologique?
Observer la mobilité de certains micro-organismes
Évaluer rapidement les micro-organismes avec des formes particulières
À quoi servent les examens directs faits avec de l’hydroxyde de potassium (KOH)?
KOH 10% digère la kératine
Utile pour diagnostiquer des éléments mycéliens (champignons) à partir de prélèvement (ongles, peau, cheveux)
À quoi servent les examens physiques faits avec de l’iode?
Colore les noyaux et organelles cytoplasmiques
Utilse pour colorer rapidement les selles d’un patient et diagnostiquer la présence de protozoaires
À quoi servent les examens physiques faits sur fond noir?
Utile pour mettre en évidence des micro-organismes mal visualisés en microscopie optique standard et qui se colore difficilement
Quel est le principe de la coloration Gram?
Les parois pauvres en en lipides retiennent plus de colorant cristal violet (Gram +)
Quand la paroi est riche en lipides, le cristal violet ne s’imprègne pas de façon permanente. Le colorant le déloge (Gram -).
Quelle est la technique de la coloration Gram?
Étaler sur une lame une couche mince du prélèvement à colorer
Fixer à la chaleur
Cristal violet (1 min)
Laver
Iode (1 min) pour bien fixer le cristal violet
Décolorer quelques secondes à l’acétone alcool
Laver
Safranine (1 min)
Laver, assécher
Lire au microscope
Dans la coloration Gram, qu’est-ce qui implique une bactérie de couleur bleue?
Cristal violet n’a pas été décoloré par l’acétone alcool, donc la contre-coloration à la safranine (rose) a été inefficace
Couleur finale = bleue
Paroi pauvre en lipides : Gram +
Dans la coloration Gram, qu’est-ce qui implique une bactérie de couleur rose?
Paroi riche en lipides
Cristal violet facilement libéré de la paroi par le décolorant
Contre-coloration avec la safranine est possible
Bactérie Gram -
Quelles sont les différentes utilités de la coloration Gram?
Reconnaitre rapidement le ou les bactéries possiblement pathogènes
Présence ou absence de flore normale
Évaluer la réponse inflammatoire car les globules blancs sont colorés dans le processus
Quantifier de façon relative les polynucléaires versus les cellules mononucléées (distinguer infections bactériennes des infections virales)
Expliquez le principe de la coloration de Ziehl-Neelsen.
Paroi de certains micro-organismesest épaisse et cireuse et ne se colore pas facilement. Une fois les parois colorées par cnotres, elles résistent à la décoloration par un solvant tel l’acide-alcool. Ce sont des bacilles acido-alcoolo résistants.
Dans la coloration de Ziehl-Neelsen, que signifique une bactérie de couleur rose?
Paroi épaisse et cireuse a capté la coloration
Bacille acido-alcoolo résistant
Dans la coloration de Ziehl-Neelsen, que signifique une bactérie de couleur bleue?
Paroi plus mince de la bactérie a pris le carbol fuchsin mais n’a pas résisté à la décoloration
Contre coloration avec bleu de méthylène a été possible
Pas un bacille acido-alcoolo résistant
Quelles sont les différentes caractéristiques macroscopiques d’une culture bactérienne?
Forme de la colonie
Couleur de la colonie
Grosseur de la colonie
Présence ou non d’hémolyse autour de la colonie
Donnez des exemples de liquides biologiques qui sont normalement stériles.
Sang Liquide céphalo-rachidien Liquide synovial Liquide pleural Si un ou plusieurs germes sont identifiés à partir de ce type de prélèvement, il faut toujours lire les rapports attentivement.
Comment fait-on pour prélever le liquide céphalorachidien?
On pique à travers la peau vis-à-vis la colonne lombaire
Qu’arrive-t-il si la ponction lombaire est difficile et qu’il faut piquer plusieurs fois avant d’obtenir du liquide?
On peut introduire des germes dans le liquide qu’on prélève et le germe identifié n’est pas considéré comme pathogène.
Qu’est-ce qu’un site non stérile. Donnez des exemples.
Il est connu qu'une flore normale s'y trouve. Bouche Vagin Peau Rectum ou selles
Comment interprète-t-on les résultats de cultures obtenues à partir de sites non stériles?
Connaitre la flore normale de ces sites
Porter attention seulement aux bactéries qui ne font pas partie de cette flore ou qui sont reconnues pour causer des infections
Quelles sont les étapes du diagnostic rapide par méthode moléculaire (PCR)?
Amplification de la partie du génome du germe à identifier
Détection de la portion du génome pour confirmer la présence d’un pathogène
Dans quelles circonstances le diagnostic rapide par méthode moléculaire (PCR) est-il particulièrement utile?
Quand le germe à détecter se cultive difficilement ou se trouve en faible quantité dans un prélèvement
Quel est le principe de la sérologie?
Au lieu de détecter le germe directement, il s’agit de détecter la présence d’anticorps spécifiques produits par le patient colonisé ou infecté par un germe.
Pour quel type d’infection la sérologie est-elle particulièrement utile?
Infections virales
Quels sont les deux types d’anticorps utilisés en microbiologie diagnostique?
IgM
IgG
Que révèle la présence d’IgM?
Apparaissent en phase aiguë de la maladie
Indique une infection actuelle ou très récente
Une fois la phase aiguë passée, ce type d’anticorps disparait
Que révèle la présence IgG?
Apparaissent en phase de convalescence
Confèrent une immunité long terme contre l’agent infectieux en question
Absents au début de l’infection
Décrivez le principe de séroconversion.
Au début de l’infection, les IgG sont absents
Un deuxième sérum prélevé au moins deux semaines plus tard révèle la présence d’IgG
Vrai ou faux? Le principe de la séroconversion s’applique à la vaccination.
Vrai
Comment se fait la détection rapide d’antigènes?
Par agglutination sur une base commerciale