diagnostic de labo des infection s Flashcards
cheminement dx en infectio?
3 grandes phases :
1- phase pré analytique
pts consulte, ddx du MD, prélèvement fait et acheminé au labo avec demande d’analyse recu au labo
2- phase analytique
examen direct sur prélèvement : rapport parti émis et interpréter par le md.
mise en culture puis lecture des milieux le lendemain avec identification bactérienne puis un 2e rapport partiel qui est interprété par le md.
on finalise l’identification
3- phase post analytique
rapport final émis et interprétation finale
raison pour faire un examen direct ?
- quantifier les globule blanc pour nous informer sur réponse inflammatoire et purulence de l’échantillon
- exprimer en reponse relative le nb de polynucléaire présent (bactérie + poly que virale)
- observé des micro organisme pour poser un dx présomptif
- évaluer la qualité du prélèvement pour savoir si le résultat final sera fiable (trop de cell epithéliales = mauvaise qualité)
types d’examens directs sans coloration?
- sur le sérum physiologique (voir motilité ou forme particulière ex. LEVURE)
- KOH (voir element mycélien sur prélèevement ongle, peau, cheveux car koh digère la kératine)
- iode (PARASITE: colore rapidement les selles (noyau et organelle) d’un pts)
- fond noir (chose qui se colore mal ou se voit mal en microscopie optique ex. spirochète)
examens directs avec coloration: gram ?
1- gram : paroi riche en lipide retiennent moins bien le cristal violet alors que les pauvre en lipide le retiennent.
fixe chaleur, cristal violet 1min, laver, iode 1min pour fixer cristal violet, décolorer a l’éthanol, laver, safranine 1 min : lire
bleue = gram +
rose (safranine, contre colorant) = gram -
utilité :
- reconnaitre rapidement les bact possiblement pathogènes
- évaluer la présence/absence dune flore normale
- evaluer reponse inflammatoire car GB seront coloré
- qte relative entre polynucléaire et cell mononuclées (distinguer infection viral de bactériennes)
examens direct avec coloration : ziehl neelsen
principe zielh = bact a paroi épaisse et cireuse ne se colore pas facilement mais une fois coloré, elle sont acido-alcoolo résistant (BAAR)
- carbol fushine, acide alcool, bleu de methylène, lire.
rose = capté carbol fushine = paroi epaisse et cireuse : bacille acido alcoolo résistant ex. mycobactérie
bleue = pas un BAAR car paroi mince a été décoloré
utilité : identification présomptive des mycobactérie sans identifié l’espèce
utilité culture ?
caractéristique macroscopique
forme, couleur et grosseur de la colonie + présence d’hémolyse autour de la colonie.
étape de l’identification finale (phase analytique )?
test chiochimique a partir des colonies –>rapport partiel
identification finale de la bact
performance antibiogramme –>rapport final
liquides stérils ?
sang et liquides biologiques sang liquide cephalo rachidien synovial pleural
si un ou + germes présents : lire rapport attentivement.
si un pathogène classiquement associé à une infection d’un liquide stérile est mis en évidence : la clinicien considère l’INFECTION CONFIRMÉ.
dautre germe peuvent être trouvé, parfois il ne sont pas considéré pathogène (ex. on pique a travers la peau et on retrouve des germe de peau dans liquide)
liquide et patho classique ?
LCR : meningocoque
synovial : staph aureus
pleural : pneumocoque
prélèvement sur site non stéeril (connu pour avoir une florenormale) ?
bouche, vagin, peau, rectum, selle
il faut :
- connaitre la flore normal de ces sites
- porter attention juste aux bact anormal connue pour causée des infection
vagin : N (lactobacilles), patho (levure) : vaginite candida
selles : N (entérobact), patho (campylobacter): gastro
methode dx rapide ?
1- détection rapide d’antigène
2- méthode moléculaire type PCR :
amplifier (faire plusieurs copies d’un segment du genome)
appliquer une méthode de détection de génome pour confirmer présence du pathogène
utile : germe qui se cultive mal ou en faible qte dans le prélèvement. ex. virus herès simplex qui cause encéphalite dans le LCR)
méthode sérologique ?
preuves indirectes de la présence d’un agent infectieux : détecter présence d’anticorps spécifiques produit par le pts.
utilité surtout pour dx infection virale (virus + long et dure a mettre en culture)
serologie = meilleure méthode pour :
VIH, hepatite (a,b,c), rougeole, rubéole, varicelle
deux types d’ac ?
type d’ac demandé pour sérologie ?
1- IgM = apparaissent en phase aigue : témoigne d’une infection actuelle ou très récente.
ex. on demande IgM pour hepatite A
2- IgG = en phase de convalescence : confère immunité à long terme
au debut infection : IgG absent.
2e serum prévelever 2 semaines + tard montre des IgG positif.
passage IgG neg à positif = SÉROCONVERSION
principe de seroconversion ?
passage IgG negatif a IgG positif : s’applique a la vaccination :
anticorps dans 1er echantillon avant vaccin = -
anticorps 2e echantillon post vaccin = +
utilité examen direct labo ?
évaluer rapidement la reponse de l,hote a infection, la qualité des echantillons et identifier agent causale présumé