C12 Vía exocítica II: Golgi

Question 1

¿Qué es un dictiosoma?

Answer 1

Pila de sacos aplanados que conforman al Golgi

Question 2

¿Cuántos Golgis tienen las células vegetales y las animales?

Answer 2

Las células animales 1 y los vegetales varios.

En las animales los dictiosomas se asocian entre sí mediante proteínas de anclaje formando solo 1 aparato de Golgi

Question 3

En células de animales, a cuál elemento del citoesqueleto se asocian las pilas del Golgi?

Answer 3

A microtúbulos y sus centrosomas

Question 4

En células vegetales, a cuál elemento del citoesqueleto se asocian las pilas del Golgi?

Answer 4

Filamentos de actina

Question 5

¿Las vías de señalización son solo desde el citosol al Golgi?

Answer 5

No, hay vías desde citosol al Golgi y otras viceversa

Question 6

Cada dictiosoma esta formado por cisternas…

Answer 6

Cis (hacia RE), mediales y trans (hacia mb)

Question 7

¿Qué función tienen las proteínas GRASP?

Answer 7

Mantienen asociadas a las cisternas cuando están desfosforiladas

Question 8

¿En qué proceso las GRASP están fosforiladas?

Answer 8

Durante la mitosis, se necesita la disociación de las cisternas

Question 9

Cuando hay mitosis el Golgi entra en….

Answer 9

Vesiculación

Question 10

¿Qué función tienen las golginas y GM130?

Answer 10

Participan del transporte de vesículas desde el RE hacia el Golgi o del Golgi a otro organelo.

Question 11

¿Las cisternas son iguales entre sí?

Answer 11

No, tienen una composición distinta, hay componentes solo en el retículo cis y otros elementos en el trans.

Question 12

¿Cuáles son las 4 funciones principales del Golgi?

Answer 12

• Modificaciones postraduccionales de proteínas: o-glicosilación y otras modificaciones como fosforilación, sulfatación, etc…
• Síntesis glicolípidos
• Síntesis polisacáridos: proteoglicanos
• Destinación proteínas

Question 13

¿Dónde ocurre la n-glicosilación y la o-glicosilación?

Answer 13

N-glicosilación: lumen RER

O-glicosilación: Golgi

Question 14

¿Las distintas cisternas se asocian a procesos diferentes?

Answer 14

Si, dependiendo si son cisternas trans, cis o mediales tendrán una determinada función

Question 15

Descripción proceso n-glicosilación

Answer 15

• Se tiene la proteína en un canal sintetizador en la mb del RER. La proteína tiene un aá señal: Asn
• Asn interactúa con grupo amino del dolicol fosfato vecino.
• Dolicol fosfato funciona como sustrato para que la oligo sacaril transferasa transfiera el oligosacárido (14 azúcares) del dolicol a la proteína en la región del Asn.
• Al adicionarse los azúcares en el mismo RER se hidrolizan 3 glucógenos y 1 manosa.
• Este producto de proteína+ 10 azúcares pasa al Golgi
• En Golgi, enzima manosidasa I hidroliza 3 azúcares más
• Otra enzima agrega n-acetilglucosamina
• Otra manosidasa saca 2 manosas +
• Se agregan + azúcares, queda oligosacárido complejo unido a la proteína.

Question 16

¿Qué debe tener la mb del RER además de dolicol para llevar a cabo la n-glicosilación?

Answer 16

Transportadores de azúcares para que entren al lumen del RER

Question 17

¿Cómo obtiene el dolicol sus 14 azúcares?

Answer 17

Mediante su movimiento flip-flop. Primero en el lado hacia el citosol une cierto número de azúcares y para completar los 14 cambia su posición hacia el lumen del RER a unir los faltantes.

Question 18

Características o-glicosilación

Answer 18

• Es en Golgi
• Azúcares se unen a ST o Tn, estos 2 tienen grupo OH que forma enlaces o-glicosílicos con los azúcares.
• Genera mayor diversidad de glicoproteínas, derivan según sus estructuras nucleares (Core) ordenadas por el Golgi.

Question 19

¿Puede haber ambos tipos de glicosilaciones en una misma proteína?

Answer 19

Sí, depende si tiene Asn y Tn o ST

Question 20

¿La generación de vesículas es espontánea?

Answer 20

No, recordar que las membranas están en estado líquido, se forman cubiertas en regiones particulares de las mb que son sitios de salida para la formación de vesículas.

Question 21

¿Qué son las proteínas cargo?

Answer 21

Las transportadas por las vesículas a un organelo de destino

Question 22

Con qué transporte se relaciona la cubierta COPII?

Answer 22

Transporte del RER hacia Golgi

Question 23

Con qué transporte se relaciona la cubierta COPI?

Answer 23

Transporte entre región cis y trans del Golgi y del Golgi al RER

Question 24

Con qué transporte se relaciona la cubierta de clatrinas?

Answer 24

Desde Golgi trans a su destino final

Question 25

Pasos formación y fusión vesículas

Answer 25

1) Yemación
2) Transporte mediante MT
3) Reconocimiento y ensamblaje
4) Acoplamiento
5) Fusión

Question 26

Función proteínas Sar1 y ArfGTPasas

Answer 26

Atraen cubiertas de las vesículas

Question 27

Función RabGTPasas

Answer 27

Participa de reconocimiento entre vesículas y mb

Question 28

Función SNARE

Answer 28

Receptores de fusión, permiten que ambas mb se acerquen y se fusionen

Question 29

Mecanismo cubierta COPII

Answer 29

• Activación de Sar1 depende del ciclo GTP-GDP (necesita GTP).
• GTPasas regulan este ciclo GTP-GDP: GAP saca GTP y entrega GDP, mayormente en citosol y GEF dan GTP, mayormente en mb.
• Cuando GEF esta en la mb transforma GDP a GTP y produce cambio conformacional en Sar1, logrando que esta se una a la mb.
• Al unirse a mb Sar1 atrae a elementos que forman la cubierta de COPII (sec 24, 23, 31, 13).

Question 30

Mecanismo cubierta COPI

Answer 30

• Intercambiador p200 cambia GDP por GTP.
• Cuando Arf1 esta con GTP se activa y se une a mb
• Las proteínas de la cubiertas no llegan de a una si no que se organizan en coatómero y se unen a Arf1.

Question 31

Mecanismo cubierta clatrina

Answer 31

• A Arf1 GTP se le une un sistema adaptador al que se une la clatrina.
• Clatrina forma de hexágonos y pentágonos, su formación es espontánea

Question 32

¿Qué receptores son los que logran vencer la repulsión entre membranas?

Answer 32

SNARE

Question 33

¿Cómo es la fusión entre mb?

Answer 33

• SNARE v (unido a vesícula) es reconocido por Rab-GTP (en la misma vesícula).
• Por MT la vesícula se mueve hacia la mb de destino.
• Al acercarse SNARE v a la mb, interacciona con SNARE t y luego se le une (proceso dependiente de Ca+), acercando a la vesícula al destino y también con el acercamiento Rab GTP se une a su receptor en la mb.
• La interacción entre SNAREs es tan fuerte que se fusionan ambas mb, fusión es espontánea.

Question 34

Luego de fusionarse las mb, ¿cómo se desensambla el complejo?

Answer 34

-Proteínas NSF y alfa-SNAP, en presencia de ATP, se unen a los complejos para desarmarlos, hay liberación de estructuras SNARE (alfa hélice).

Question 35

¿Por qué la fusión puede no ser espontánea? ¿Cómo sería no espontánea?

Answer 35

Porque está regulada por una maquinaria, para evitar fusión en cadena entre gránulos de secreción hay proteínas moduladoras (Mu) que se unen a SNARE t para bloquear la interacción entre SNARE v y t y así evitar la fusión.

Question 36

Características secreción constitutiva y controlada

Answer 36

• Constitutiva: flujo de vesículas, no es regulada, asociada a recambio moléculas en mb y recambio de mb.
• Controlada: vía secretora son los lisosomas, es en respuesta a una señal externa, requiere de receptores en su mb para recibir señal.