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Paces 1er quad 2020 > Biocell Krejbich - Chap 3 > Flashcards

Biocell Krejbich - Chap 3 Flashcards

1
Q

Observation MP

A
  • Grande diversité de paysages
  • ø visible en MO mais en MET oui
  • Observation MET : structure tri-lamellaire (7,5 nm)
    → 2 feuillets sombres (2 nm chacun)
    → 1 feuillet clair (3,5 nm)
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Q

Modèle de choix pour l’étude de la MP

A

GR ou hématies car ce sont des ç eucaryotes sans organites

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3
Q

Après hémolyse et ultracentrifugation des GR

A
  • 40% lipides
  • 50% protéines
  • 10% glucides
    → % variables selon type çlaire
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4
Q

Structure des lipides de la bicouche

A
  • Extrémité polaire = tête hydrophile
  • Extrémité non polaire = queue hydrophobe
    → Structure amphiphile ou amphipathique
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Q

Exemples de lipides de la bicouche

A
  • Glycérophospholipides
  • Sphingolipides
  • Stérols
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6
Q

Diacylglycérol composé de…

A
  • Glycérol

- 2 AG

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7
Q

Phosphatidate composé de…

A
  • Phosphate / acide phosphorique
  • Glycérol
  • 2 AG
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8
Q

Glycérophospholipide composé de…

A
  • Amino-alcool (choline, sérine, éthanolamine, inositol)
  • Phosphate / acide phosphorique
  • Glycérol
  • 2 AG
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9
Q

Exemples de glycérophospholipides

A
  • Phosphatidyl-choline : neutre
  • Phosphatidyl-sérine : négatif
  • Phosphatidyl-éthanolamine : neutre
  • Phosphatidyl-inositol : négatif
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10
Q

Sphingolipide

A
  • Le + représenté au niveau de la membrane

- Le seul phospholipide qui ne dérive pas du glycérol

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11
Q

Sphingolipide composé de :

A
  • Sphingosine + AG (Céramide)

- Phosphate + Choline (ou Éthanolamine)

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12
Q

Maladie de Tay-Sachs

A

Accumulation de gangliosides

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13
Q

Maladie de Gaucher

A

Défaut d’élimination d’un cérébroside

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14
Q

Exemples de sphingolipide

A
  • Céramides
  • Sulfatides
  • Cérébrosides
  • Gangliosides
  • Sphingomyéline +++
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15
Q

Stérols

A
  • Dérivent d’un noyau stéroïde
  • Cholestérol = principal chez animaux
    → ø chez plupart membranes végétales
    → ø chez procaryotes sauf mycoplasmes
    → Précurseurs hormones stéroïdes et vitamine D
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16
Q

Stérols est composé de…

A
  • Tête polaire (OH)
  • Corps cyclique apolaire
  • Chaine carbonée apolaire
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17
Q

Ag oh (groupe Bombay) composé de :

A

Dans l’ordre :

  • Galactose
  • N-acétylglucosamine
  • Galactose
  • Glucose
  • Lipide
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18
Q

Passage de l’Ag oh à l’Ag H (groupe O)

A

Grâce au fucosyl-transférase

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19
Q

Ag H (groupe O) composé de…

A

Dans l’ordre :

  • Fucose
  • Galactose
  • N-acétylglucosamine
  • Galactose
  • Glucose
  • Lipide
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20
Q

Passage de l’Ag H (groupe O) à l’Ag A (groupe A)

A

Grâce au N-acétylgalactosamine-transférase

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21
Q

Ag A (groupe A) composé de…

A

Dans l’ordre :

  • N-acétyl-galactosamine
  • Galactose - Fucose
  • N-acétylglucosamine
  • Galactose
  • Glucose
  • Lipide
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22
Q

Passage de l’Ag H (groupe O) à l’Ag B (groupe B)

A

Grâce à la galactose-transférase

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23
Q

Ag B (groupe B) composé de…

A

Dans l’ordre :

  • Galactose
  • Galactose - Fucose
  • N-acétylglucosamine
  • Galactose
  • Glucose
  • Lipide
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24
Q

Si groupe sanguin A : Ag présents sur hématie est…

A

Ag A

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25
Q

Si groupe sanguin A : AC circulants est…

A

Anti-B

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26
Q

Si groupe sanguin B : Ag présents sur hématie est…

A

Ag B

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27
Q

Si groupe sanguin B : AC circulants est…

A

Anti-A

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28
Q

Si groupe sanguin AB : Ag présents sur hématie est…

A

Ag A et Ag B

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29
Q

Si groupe sanguin AB : AC circulants est…

A

ø

30
Q

Si groupe sanguin O : Ag présents sur l’hématie est…

A

Ag H

31
Q

Si groupe sanguin O : AC circulants est…

A

Anti-A et Anti-B

32
Q

Test de compatibilité : Beth-Vincent

A

= sérums test
- Sang individu + sérums (AC)
→ Mise en évidence des Ag présents sur GR

33
Q

Test de compatibilité : Simonin

A

= hématies test
- Sérum individuel (AC) + hématies (Ag)
→ Mise en évidence des AC présents

34
Q

Propriété des lipides : auto-assemblage

A
  • AG → forme conique → monocouche : film monomoléculaire → micelle
  • PLs → forme cylindrique → bicouche : film bimoléculaire → liposome (auto-fermeture)
35
Q

3 mouvements des lipides

A

1) Diffusion latérale
2) Rotation, flexion
3) Basculement / Flip-Flop

36
Q

Diffusion latérale

A
  • Changement de place dans monocouche

- Grâce agitation naturelle thermique

37
Q

Rotation, flexion

A

Par rapport à leur axe longitudinal

38
Q

Basculement / Flip-Flop

A

Changement de place entre les 2 monocouches

39
Q

Translocases spécifiques

A

→ de sens et de lipides ; ATP dép
- Flippase : in → PS, PE
- Floppase : out → PC, SM
→ Maintenir asymétrie de la MP

40
Q

Translocases non spécifiques

A

→ ni de sens, ni de lipides ; non ATP dép

- Scramblases : équilibrer [C] des lipides entre 2 monocouches

41
Q

Protéines membranaires : 2 types

A
  • Intrinsèques

- Extrinsèques

42
Q

Protéines membranaires intrinsèques

A
  • Transmembranaire

- Ancrées = monotopiques

43
Q

Protéines membranaires intrinsèques transmembranaires

A
  • Bitopiques hélice ⍺

- Polytopiques : hélice ⍺ ou feuillet 𝛃

44
Q

Protéines membranaires intrinsèques ancrées

A
  • Ancre GPI (toujours extraçlaire)

- Ancre lipidique (Majorité intraçlaire)

45
Q

Protéines membranaires extrinsèques

A
  • Extraçlaire

- Intraçlaire

46
Q

Exemples d’ancres lipidiques

A
  • Ancre myristique
  • Ancre palmitique
  • Ancre prényl (farnésyl ou géranylgéranyl)
47
Q

Ancre myristique

A

Acide myristique ajouté au N-term d’un glycocolle par liaison amide

48
Q

Ancre palmitique

A

Acide palmitique ajouté à la prot sur -SH d’une cystéine par liaison thioester

49
Q

Ancre prényl

A

Groupement prényl ajouté près extrémité carboxy-terminale par liaison thioester

50
Q

Glucides et MP

A
  • Toujours sur le côté extraçlaire de la MP
  • Réprésentent 10% MP : dont 90% glycoprot et 10% glycolipides (liaison covalente)
  • Feutrage fibrillaire épais, b
    visible en ME
  • Glycocalyx ou cellcoat
51
Q

Asymétrie de la MP est due…

A
  • Répartition des lipides
  • Orientation des protéines
  • Emplacement des glucides
52
Q

Asymétrie de la MP : répartition des lipides

A
  • Feuillet interne : PS + PE + PI

- Feuillet externe : SM + PC + glycolipides

53
Q

Asymétrie de la MP : orientation des protéines

A
  • Prots ont toujours la même orientation dans la membrane (→ mode d’insertion co-traductionnel)
  • Présence glycoprotéines uniquement côté extraçlaire
  • Environnement :
    → réducteur côté cytocol (présence SH)
    → oxydant côté extraçlaire (présence SS)
54
Q

Asymétrie de la MP : emplacement des glucides

A
  • Présence des glucides uniquement côté extraçlaire

- Glycoprot, glycolipides, glycanes, protéoglycanes = cell coat = glycocalyx

55
Q

Mosaïque fluide par…

A

Singer et Nicholson

56
Q

Fluidité de la MP dépend de…

A
  • La T°
  • La composition en lipides
  • Cholestérol
57
Q

Fluidité de la MP : T°

A
  • Implique transition de phase due à la mobilité accrue autour des liaisons C-C des chaines aliphatiques des AG
  • ↗︎° T° = ↗︎° fluidité = état désordonné
  • ↘︎° T° = ↗︎° viscosité = état visqueux
    NB : ↗︎° T° = ↗︎° mvts lipidiques (rotation et diffusion latérale)
58
Q

Fluidité de la MP : Composition en lipides

A
  • Nature des AG : + AG insaturés → + MP fluide

- Longueur chaines hydrocarbonées : + chaine C courtes → + MP fluide

59
Q

Fluidité de la MP : Cholestérol

A

⚠️ Effet dépend de la composition en AG de la MP

60
Q

Cholestérol : Si MP riche en AG saturés

A

Si MP riche en AG saturés = visqueuse

Alors cholestérol s’intercale en PL : ↘︎° interactions hydrophobes et ↗︎° fluidité

61
Q

Cholestérol : Si MP riche en AG insaturés

A

Si MP riche en AG insaturés = fluide

Alors cholestérol s’intercale entre PL : ↗︎ interactions hydrophobes et ↘︎° fluidité

62
Q

Cryofracture et cryodécapage : généralités

A

Permet d’observer des plans de fractures internes et non des surfaces

63
Q

Cryofracture et cryodécapage : déroulement

A

1) Congélation du tissu
2) Fracture en 2 fragments
Facultatif) Cryodécapage
3) Réplique
4) Dissolution du matériel biologique
5) Observation de la réplique au ME

64
Q

Cryofracture et cryodécapage : étape 1

A

Congélation du tissu : Fréon (-100°) ou Azote (-192°)

65
Q

Cryofracture et cryodécapage : étape 2

A

Fracture en 2 fragments : Plan de fracture traversant la bicouche

66
Q

Cryofracture et cryodécapage : facultatif

A

Cryodécapage : Par sublimation de la glace en surface (creusement des reliefs)

67
Q

Cryofracture et cryodécapage : étape 3

A

Réplique :

  1. A) Contraste par ombrage métallique : vaporisation oblique d’un métale
  2. B) Réalisation de l’empreinte : vaporisation perpendiculaire d’un film de carbone
68
Q

Cryofracture et cryodécapage : observations de liposomes et membrane biologique

A
  • Liposomes : plans de fracture lisse

- Membrane biologique : plans de fracture granuleux

69
Q

Technique hétérocaryons (ç hybrides)

A
  • A fourni preuve directe que les prots de la MP sont mobiles dans le plan de la membrane
    1) On fusionne ç souris + ç humaine = hétérocaryon
    2) On incube AC (fluo vert) contre prots de souris + AC (fluo rouge) contre prots humaines
    3) On se rend compte que les prots se sont déplacées
70
Q

Technique FRAP

A

= Récupération de fluorescence après photoblanchiment

1) Marquage prots avec AC fluo ou GFP
2) On blanchie une partie de ces molécules fluo
3) On remarque que les molécules blanchies sortent par diffusion de zone irradiée et les molécules non blanchies y entrent par diffusion

71
Q

Technique FLIP

A

= Perte de fluorescence après photoblanchiment

1) Marquage prots avec AC fluo ou GFP
2) Une petite surface est irradiée de façon continue
3) On mesure fluo dans une autre zone
4) On remarque fluo diminue dans cette autre zone : prots fluo en sortent par diffusion et molécules blanchies y entrent
5) À la fin toutes les molécules sont blanchies

72
Q

Technique IFRAP

A

= Inverse de FRAP

Au lieu de blanchir une zone, on blanchit toute la surface en laissant une zone fluo

Paces 1er quad 2020 (16 decks)

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