5. Kurstag Familien Flashcards
Pseudomonadaceae, Eindordnung
Phylum Proteobacteria
Klasse Gamma-proteobacteria
Ordnung Pseudomonadales
Pseudomonadaceae, allgemeine Kennzeichen: Form, Sporen, Gram, Gärung, Oxidase, Katalase, INdol, Methylrot,
Stäbchen
keine Sporen
Gram-
keine Gärung
in geringen Mengen Säuren aus Glucose bildend, aber kein Gas; oxidativ-fermentatives Medium mit Glucose
Oxidase positiv - Katalase positiv
indolnegativ, methylrotnegativ
Familie Enterobacteriaceae, Einordnung
Phylum Proteobacteria
Klasse Gamma Proteobacteria
Ordnung Enterobacteriales
Enterobacteriaceae, Merkmale: Form, Gram, Vorkommen, Beweglichkeit, Elektronenakzeptoren, Gärung, Oxidase, Katalase, Ernährungsform
Gram-
Stäbchen
in Darm von Warmblütern, Im Boden, Wasser
durch peritrische Geißel beweglich
O2 und No3 als e-Akzeptor
Vergärung von Zucker über verschiedene Wege
Oxidase negativ
katalase positiv
Nitrat atmung bis Nitrit
Chemo-organotroph: Atmung oder Gärung
Enterobacteriaceae, 2 Hauptgruppen (Nennung, Beispiele)
Gemischte Säure-Gärung: Escherichia, Salmonelle, Shigelle
2,3-Butandiol-Gärung, Enterobacteria, Serratia, Klebsielle
Enterobacteriaceae, pathogene Vertreter
Salmonelle typhi
Almonella typhimurium - Lebensmittelvergiftung
Klebsielle pneumoniae
Yersinia pestis
gemischte Säuregärung
Essigsäure, Milchsäure, Bernsteinsäure gebildet
es entstehen EtOH, CO2, H2, kein Butandiol
Butandiolgärung
Bildung geringer Säuremengen
Hauptprodukte Butandiol, EtOH, CO2, H2
rosarote Färbung im Voges-Proskauer Test
Phylogenetische Verwandtschaftsverhältnisse / Definierung Arten
16S-rDNA Sequenzanalyse
bei 97% Homologie eine Art
Coliforme Enterobacterien
Nachweis mit welchen Agar und was passiert da
Klebsielle, Escherichia, Enterobacter aerogens
spöatet Lactose, vergären Hecosen
Nachweis mit Endo-Agar: in Gärung entsteht Acetaldehyd, das bildet mit Sulfit Additionsverbindung -> Rotfärbung; Fuchsin kann metallisch rot auskristallisieren
EMB Agar
Komplexnährboden: Lacotse, Saccharose, Eosin und Methylenblau
unterdrückt Wachstum von Gram +
Lactose verwertende Enterobakterien violett
Saccharose verwendende Enterobakterien rosa
Enterobakterien, die diese Disaccharide nicht verwerten: farblos
SIM Agar
enthält Natriumthiosulfat Na2S2O3 und NH4FeSO4
sulfatreduzierende Bakterien: S2O32- -> H2S + SO42-
Sulfat als terminaler Elektronenakzeptor
H2S + (NH4)2(Fe)(SO4)2 -> FeS schwarz
einige Bakterien setzen Tryptophan über Tryptophanase zu Indol um, das durch Kovacs-Reagenz (p-Dimethylaminobenzaldehyd) durch Rotfärbung nach
SIm Agar, Kovacs-Reagnez
Trp -> Indol + NH3 * Pyruvat
Indol + p-Dimethylaminobenzaldehyd -> Rot
Sulfid und Indol bei E. coli und C. beijerinckii
C. beijerinckii: reduziert Na2S2O3 unter Bildung von H2S, kein Indol
E. coli: beweglich, kein H2S, bildet Indol
Nachweit Nitratatmung
Nitratredukjtion bei Gram + und Gram -
Enterobacterien: Nitrat bis Nitrit
anoxische Bedingunen
NO3 bis N2 oder NH4
NO3 durch Griess-Ilosavay-Reagens rot (Essigsäure, Sulfanilsäure, alpha-Naphthylamin)
keine Reuktion: chemische Reduktion durch Zn-Staub
Nitratatmung, Beispiele
E.coli: bis NItrit, rot
Pseudomonas fluorescens: reduziert Nitrat nicht
Agrobacterium: Nitrat zu N2
Abbau von Malonat und Phenylalanin
Medium enthält nur Malonsäure (Propandisäure) und L-Phe und anorg. N-Quelle, Bromthymolbalu
Malonatverwertung: Umschlag Grün - Blau
Desaminierung von Phe + N HCl + FeCl3 -> grün
Abbau von Malonat und Phe, E. Coli, S. fonticola, P. putida
E. coli: keine Verwenrtung
S. fonticola: Malonatverwerting, keine Desaminierung von Phe
P. putida: Malonatverwertng, Bildung Phenylüpyruvat, Desaminierung von Phe
Toxische Formen von o2
normal: Triplettsauertstoff
Singulettsauerstoff: hochenergetisch, unerwünschte oxidationen
Superoxidanion O2-
H2O2
hadroxylradikal OH*
Entsorgung von toxischem O2
Katalase: H2O2
Peroxidase:H2O2
Superoxiddismutase: Superoxid
Superoxidismutase/Katalse in Kombi: Superoxid
Superoxidreduktase: O2–> H2O2, bei vielen obligat anaeroben
Aerotoleranz nach O2-Anteil (%)
obligat aerbob: 15-21
mikroaerophil <15
fakultativ anaerob: 0-21
aerotolerant anaerob: 0-10
oligat anaerob: 0-1
aerobier und fakultative aerobier haben welche Enzyme?
Superoxid Dismutase und Katalase
Harnstoffspaltung
Ureasetest: Harnsotff + Wasser -> NH3 + CO2
Phenolrot Indikator schlägt von orange nach rosarot um
bei Urease-negativen bakterien Umschlag zu gelb, wenn Säure aus Glucose gebildet
obligate Anaerobier, warum
keine Superoxiddismutase -> O2 tosisch
aerotolerant eAnaerobier
z.B. Milchsäurebakterien
keine SUperoxiddisumutase, Os- mit proteinfreiern Mn-Komplexen abgebaut
Cytochromoxidase
unterschiedliche Elektronen-Carrier und Oxidoreduktase in MO
P. fluorescens: Cytochromoxidase
E.coli: keine Cytochromoxidase
Oxidasetest
Unterscheidung Enterobacertia und Pseucomonadeceae
beie Gram-, beweglich, Katalse positiv, Stäbchen
weist Vorhandensein von Cytochrom c in atmungskette nach
Teststreufen blau positiv
Exoproteasen
Fähigkeit, Casein abzubauen
B. subtilis
erkennbar an Höfen um KOloien im GGs zur Träbung der Bereiche mit nicht abgebautem Casein nach Zugabe von Essigsäure
B. subtilis positiv
Bildung von Lipasen
Mycobacterium pflei
Präzipitate von Calciumoleat um Kolonien = positiv
Nachweis von Harnstoffspaltung
e. coli und Staph xylosus
Harnstoffboullon
pH hoch = positiv = rosa rot
negativ = pH niedrig = gelb
E.coli negativ
S. xylosus positiv
oxidativer / fermantativer Abbau von Kolehnhydraten
E coli vs Pseudomonas fluorescens
wachstum Überall: fermentativ
Wachstum nur oben: oxidativ
E.coli: aerober Abbau und Vergärung
P. fluorescens: obligat aerob
fermentative Verwertung von Glucose, Phenolrot Bouillon
E coli und P. fluorescens
fermentativ: Farbumschalg rot-> gelb
Gasbildung positiv
E. coli: Vergärung
P. fluorescens nicht
fermentative Lactoseverwertung auf Endo-Agar
E. coli
Nachweis coliformer Enterobacterien
coliform: Lactose spalten, Hexosen vergären
Rotfärbung von E.coli: Acetaldehyd bildet mit Sulfit Additionsverbindungen -> Fuchsin freigesetzt
bei starkem Substratumsatz kristallisiert Fuchsin aus > roter metallischer Glanz
Lactose-negative bakterien: farblose Kolonien
Gram-psoitive Bacterien: Wachstum durch Fuchsin und Sulfit gehemmt
Gram-negative Darmbakterien, die Lacotse fermentativ nutzen
Verwertung von Lactose und Saccharose auf EMB Agar
e coli vs M luteus
für Gram - Darmbakterien
e. coli wächst
M luteus nicht
Lactose -, Saccharose -: transpartent
Saccharose + rosa
Lactose +, coliform: violett
E coli Metallglant
Gram +: Wachstum durch Farbstoffe gehemmt
Stärkeabbau
B subtilis vs E coli
NW mit Lugolscher Lösung
positiv: nicht blau
B subtilis positiv
E coli negativ
Bildung von Sulfit und Indol
E coli und Clostridium beijerinckii
Solfitbildung: schwärzung
Indolbildung: Rotfärbung
E coli: bilet Indol
C. beijerinckii: bildet H2S, kein Indol
Nachweis Nitratatmung
E coli, P luorescens, agrobacterium radiobacter
Nititredutkion: Rotfärbung
Zugabe Zn: Rotfärbung bei negativ
E. coli: reduziert zu Nitrit, rot
P fluorescens: nagtiv, rot nach Zn
A radiobacter: reduziert zu N2, kein rot
Abbau Malonat und Phenylalanin
Serratia fonticola, e coli, p putida
Maltabbau: Farbumschalg grün -> blau
Phenylalanindesaminierung: Ansäuern, adnach FeCl3 -> Grün
E. coli: keine Verwertung
S fonticola: Malonatverwertung, keine Desmainierung von Phe
P putida: Malonatverwetung, Bildung Phenylpyruvat
Katalase - NW
P. fluorescens, Lactobacillus pentosus
H2O2 Zugabe
Pseudomonas positiv
Nachweis Cytochromoxidase
E coli, P fluorescens
mit Teststreifen
blau- positiv- P fluorescens
Verhaltung von hefe ggb Sauerstoff
fakultativ anaerob
vibroid
beweglich durch polare geißeln an einem ende
respiratorischer stoffwechsel
zwingend auf O2 angewiesen
bei Pseudomonaden
Enterobacterien
Gram, Sporen, Atmung
Gram-
keine SPoren
O2 und No3 Atmung
Verhalten von Clostridium ggb o2
obligat anaerob
obligat aerob
15-21% O2
M luteus
mikroaerophil
<15% Sauerstoff
bruachen weniger O2
Spirillium volutans
in Wasser
fakultativ anaerob
0-21%
e coli
aerotolerant anaerob
Milchsäurebaktirien
0-10%
obligat anaerob
0-1%
mathanobacterium formicicum
EMB-Agar (Skript)
Eosin Methylenblau Lactose Saccharose Agar
Nährboden zur Differenzierung von Enterobakterien
Salmonellen und Shigellen negativ (farblos)
Lactose-positive coliforme Enterobaktierien (violett)
Saccharose positiv pink
aus Pepton, Kaliumhydrophenphosphat, Lactose, Saccharose, Eosin, Methylenblau
Wachstum Gram positiver Organismen gehemmt
Endo-Agar (Skript)
Selektivnährboden, coliforme Bakterien
aus Pepton, Hefeektrakt, Lactose, Kaliumhydrogenphsophat, Fuchsin, Nasulfat
Acetaldeyhd bilt mit Fuchsin additionsverbindung, rotes Fuchsin vergesetzt
bei starkem Umsatz von Lactose kristallisiert Fuchsin aus
Gram+ durch Sulfit und Fuchsin gehemmt
Harnstoffbouillon (Skript)
zum Nachweis von Urease
aus HE, Kaliumphosphat, Harnstoff, Phenolrot
Harnstoff zu CO2 und NH3 -> Phenolrot Umschlag
Lactose Bouillon
Test auf coliforme Bakterien
aus Pepton, fleischextrakt, Lactose
Vergärung führt zur Gasbildung -> Durham Röhrchen
Nitrat-Bouillon
Nachweis der dissimilatorischen Nitratreduktion
0,15KNO3, Pepton, NaCL
Zugabe von Griess Reaganz (Essigsäure, Sulfanilsäure, 1-Naphthylamin), bilden Azofarbstoff
SIM Agar
Sulfid Infol Mobility
NAchweis von Sulfid Bildung, Indol Produktion, Beweglichkeit
aus Pepton aus Fleisch und Casein, (NH4)2Fe(SO4)2, Na2S2O3
Sulfatreduzierende Baktieren könnnen Thiosulfat zu H2S und Sulfat disproportieiren, Sulfat als terminaler Elektronenaktzeptor zu H2S; H2S bildet schwarzes FeS
L-Trp mit Trpase zu Indol, Pyruvat, NH3 umgesetzt, Indol mit Kovacs Reagenz rot
