Рестриктази

Question 1

Рестриктази история

Answer 1

• откритие на разкъсващи ДНК ензими в бактерийни клетки 1978 Ноб. наг.
• развитие на рекомбинантни ДНК технологии
• първоначално се е смятало че разкъсват попаднала в бактерии чужда ДНК на произволно място, но се открива че става при точно определени нк последователности

Question 2

Рестриктази същност

Answer 2

• разкъсване на ДНК при изследвания
• разпознават специфични последователности от ДНК - 4-6 нуклеотида
• палиндромни последователвости (в двете посоки са еднакви)

Question 3

Пример за широко използвана рестриктаза

Answer 3

EcoR I - изолирана от чревната бактерия ешерихия коли

Question 4

Принцип на действие на рестриктази

EcoR I

Answer 4

• разрязване на веригите до получаване на малки едноверижни участъци
• те могат да се свързват комплементарно с други едноверижни участъци от разрязване с рестриктазата
• > наричат се лепливи краища

Question 5

Използване на разрязване и лепливи краища в науката

Answer 5

• при разрязване на кръгова молекула ДНК - отново се стреми да заеме кръгова форма чрез коплементарно свързване на краища
• > използва се за свързване на фрагменти от различни ДНКи, разкъсани от еднакви рестриктази с комплементарни лепливи краища

Question 6

Значение на рестриктази

Answer 6

• рекомбинантни ДНК технологии за получаване на рекомбинантни ДНК молекули

Question 7

Финал на разрязване

Answer 7

Двата комплементарни фрагмента се зашиват с 5¹-3¹ фософдиестерни връзки от ДНК лигаза