Virusdiagnostik Flashcards

1
Q

När sker screening?

A
  • Innan operation
  • Innan transplantation
  • Gravida kvinnor
  • Blodgivare
  • Hälsokontroll hos flyktingar
  • HPV (cervixcancer)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Ge exempel på sjukdomar som man screenar för

A
  • CNS-infektioner (encefalit, meningit)
  • Herpesvirus
  • HIV
  • Hepatit B och C
  • Luftvägsinfektioner
  • Gastroenteriter
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Ge exempel på orsaker till varför patienter kan bli immunsupprimerade

A
  • Maligniteter (cancersjukdomar)
  • Autoimmuna sjukdomar
  • Transplantation
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Vilka metoder kan man använda för att påvisa virus?

A
  • Virusisolering/ odling (görs sällan numera, mer i forskningssyfte)
  • Virusgenom (DNA/RNA) PCR sekvensering
  • Virusantigen (proteiner) serologi
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Vilka metoder kan man använda för att påvisa antikroppar?

A

Serologiska metoder som undersöker IgG och/eller IgM

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Vad betyder sensitivitet och vad innebär det?

A

Hur känsligt är testet

  • Hitta alla sant positiva prov
  • Blir några sant positiva prov negativa? (falskt negativa)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Vad betyder specificitet och vad innebär det?

A

Hur specifikt är testet

  • Hur väl lyckas testet skilja mellan de sant positiva och sant negativa proverna
  • Hur många blir falskt positiva
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Information om virusisolering/odling

A
  • Arbetskrävande
  • Utförs i cellkulturer-cytopatogen effekt
  • Begränsad sensitivitet (känslighet)
  • Behövs infektiös virus
  • Används sällan i rutindiagnostiken
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Vad används PCR för inom virusdiagnostiken?

A
  • Påvisning av virus arvsmassa (DNA/RNA)
  • Påvsar aktuell sjukdom:
    - CND-infektioner
    - Herpesvirus
    - HIV
    - Hepatit B och C
    - Luftvägsinfektioner
    - Gastroenterieter
  • Infektivitet (ex HIV)
  • Behandlingseffekt (ex HIV)
  • Monitorering/diagnosticering
    - immunsupprimerade patienter (ex EBV, CMV)
  • Screening (HPV)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Vad används serologi för inom virusdiagnostiken?

A
  • Antikropps/antigenspåvisning
  • Syfte:
    - Infektionsutredning
    - CNS-infektioner (TBE)
    - Herpesvirus
    - HIV
    - Hepatit B och C
    - Screening
    - Gravida kvinnor, innan operation/transplantation, blodgivare, hälsokontroll
    - Immunitetsprovning (leta efter antikroppar)
    - Epidemiologi
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Vad mäter de serologiska metoderna?

A

Antikroppars bindning till antigen (specifik 3D struktur) (antikropparna fäster till epitoper på viruset)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Nämn 4 vanliga serologiska metoder

A

ELISA/EIA (hög sensitivitet och specificitet)
CMIA/CLIA (hög sensitivitet och specificitet)
Western blot/LIA (konfirmationstest - hög specificitet)
Immunofluorescens (hög specificitet)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Ge exempel på 3 övriga serologiska metoder

A

Agglutination
Neutralisering
Komplementbindning

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Vad påvisar antigenpåvisning? ge exempel på vad det kan påvisa

A
Påvisar delar av virus
Används bla för att påvisa:
- Hepatit B surface antigen (HBsAg)
- Hepatit C core antigen (HCV-Ag)
- HIV p24-antigen
- Snabbtest mot SARS-CoV-2
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Vilket test gör man vid akutprov vid primärinfektion?

A

IgM-analys

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Hur görs IgG analys?

A

Via 2 provtagningar (akut och konvalenscentprov)
- primärinfektionen ger serokonversion
- Reaktivering kan ge titerstegring
IgG svaret är långvarigt (ex herpesvirus varar hela livet)

17
Q

Vilken analys görs för immunitetsfrågeställningar?

A

IgG-analys

18
Q

Vilka är de 4 olika sorter ELISA metoder?

A
  • Direct ELISA
  • Indirect ELISA
  • Sandwich ELISA
  • Competitive ELISA
19
Q

Vad betyder antikroppstiter?

A
  • Uppskattning av hur mycket antikroppar det finns i ett prov
  • Serumprov späds i tvåfaldiga spädningar
  • Varje spädning analyseras för påvisbara nivåer av antikroppar
  • Titer = tilldelat titervärde för den sista spädningen får antikroppen kan påvisas

(ex antikroppar påvisas i brunn med spädning 1:200 –> titer = 200)

Desto högre titer - desto mer antikroppar

20
Q

Vad står CMIA för?

A

Chemiluminiscent microparticle immunoassay

21
Q

Vad står CLIA för?

A

Chemiliminescence immunoassay

22
Q

Hur fungerar CMIA?

A

(ber om ursäkt ifall förklaringen är dålig)

Akrifinium-märkt Konjugat binder till provet som binder till antigen. Konjugatet binder också till antigen från provet som binder till en monoklonal musantikropp. Till detta tillsätts H2O2. Vid närvarande antigen kommer höjs pH:t av NaOH och akridium oxideras av H2O2 vilken sänder ut ljus.

Det är ljuset som avläses

23
Q

Vad är Westernblot?

Hur sker indikationen?

A

En analysteknik för att påvisa specifika proteiner eller antikroppar i ett prov.

Indikationen sker genom:

  • Molekylvikt
  • Specifik antikroppsinbindning
24
Q

Information om immunofluorescens

A
  • Lägre sensitivitet än ELISA
  • Personalkrävande, svår att automatisera
  • Helvirusantigen med risk för korsreaktivitet
  • Subjektiv optisk bedömning som bör utföras av en erfaren avläsare
  • Möjligt att de vart den virusinfekterade cellens antikroppar binder in
25
Q

Vad är agglutination?

A

Antikroppar som agglutinerar (ihopklumpning) antigen

26
Q

Vad är neutralisationsassay?

A

Funktionsstudie av antikroppar

- Analys om patienten har antikroppar som kan förhindra virusinfektion

27
Q

Vad är komplementbindning

A

Testar antikropparnas förmåga att binda komplement

28
Q

Vad finns det för fördelar med serologiska prover?

A
  • Bra för ex prevalensundersökning, screening av exempelvis blodgivare (HIV, HTLV, HBV, HCV, Syfilis)
  • Antikroppspåvisning kräver inte pågående infektion eller prov från infektionshärden
29
Q

Vad finns det för möjliga problem med virusserologi?

A
  • Kräver riktad frågeställning
  • Kan ge falskt negativa/positiva resultat
  • Serokonversion kan ta tid
  • Ospecifika reaktioner
  • Korsreaktivitet
  • Frånvaro eller fördröjning av humoralt immunsvar tex. hos små barn eller immunsuppremerade
30
Q

Vad är Placktitrering?

A

Metod för att kvantifiera mängden virus i ett prov

31
Q

Vilken enhet används vid placktitrering?

A

Mäts i plack-forming units (PFU) per milliliter

32
Q

Vilka virus kan analyseras med placktitrering?

A

Enbart virus som har cytopatogen effekt på celler

varje plack har sitt ursprung från ett virus