Virusdiagnostik Flashcards
När sker screening?
- Innan operation
- Innan transplantation
- Gravida kvinnor
- Blodgivare
- Hälsokontroll hos flyktingar
- HPV (cervixcancer)
Ge exempel på sjukdomar som man screenar för
- CNS-infektioner (encefalit, meningit)
- Herpesvirus
- HIV
- Hepatit B och C
- Luftvägsinfektioner
- Gastroenteriter
Ge exempel på orsaker till varför patienter kan bli immunsupprimerade
- Maligniteter (cancersjukdomar)
- Autoimmuna sjukdomar
- Transplantation
Vilka metoder kan man använda för att påvisa virus?
- Virusisolering/ odling (görs sällan numera, mer i forskningssyfte)
- Virusgenom (DNA/RNA) PCR sekvensering
- Virusantigen (proteiner) serologi
Vilka metoder kan man använda för att påvisa antikroppar?
Serologiska metoder som undersöker IgG och/eller IgM
Vad betyder sensitivitet och vad innebär det?
Hur känsligt är testet
- Hitta alla sant positiva prov
- Blir några sant positiva prov negativa? (falskt negativa)
Vad betyder specificitet och vad innebär det?
Hur specifikt är testet
- Hur väl lyckas testet skilja mellan de sant positiva och sant negativa proverna
- Hur många blir falskt positiva
Information om virusisolering/odling
- Arbetskrävande
- Utförs i cellkulturer-cytopatogen effekt
- Begränsad sensitivitet (känslighet)
- Behövs infektiös virus
- Används sällan i rutindiagnostiken
Vad används PCR för inom virusdiagnostiken?
- Påvisning av virus arvsmassa (DNA/RNA)
- Påvsar aktuell sjukdom:
- CND-infektioner
- Herpesvirus
- HIV
- Hepatit B och C
- Luftvägsinfektioner
- Gastroenterieter - Infektivitet (ex HIV)
- Behandlingseffekt (ex HIV)
- Monitorering/diagnosticering
- immunsupprimerade patienter (ex EBV, CMV) - Screening (HPV)
Vad används serologi för inom virusdiagnostiken?
- Antikropps/antigenspåvisning
- Syfte:
- Infektionsutredning
- CNS-infektioner (TBE)
- Herpesvirus
- HIV
- Hepatit B och C
- Screening
- Gravida kvinnor, innan operation/transplantation, blodgivare, hälsokontroll
- Immunitetsprovning (leta efter antikroppar)
- Epidemiologi
Vad mäter de serologiska metoderna?
Antikroppars bindning till antigen (specifik 3D struktur) (antikropparna fäster till epitoper på viruset)
Nämn 4 vanliga serologiska metoder
ELISA/EIA (hög sensitivitet och specificitet)
CMIA/CLIA (hög sensitivitet och specificitet)
Western blot/LIA (konfirmationstest - hög specificitet)
Immunofluorescens (hög specificitet)
Ge exempel på 3 övriga serologiska metoder
Agglutination
Neutralisering
Komplementbindning
Vad påvisar antigenpåvisning? ge exempel på vad det kan påvisa
Påvisar delar av virus Används bla för att påvisa: - Hepatit B surface antigen (HBsAg) - Hepatit C core antigen (HCV-Ag) - HIV p24-antigen - Snabbtest mot SARS-CoV-2
Vilket test gör man vid akutprov vid primärinfektion?
IgM-analys
Hur görs IgG analys?
Via 2 provtagningar (akut och konvalenscentprov)
- primärinfektionen ger serokonversion
- Reaktivering kan ge titerstegring
IgG svaret är långvarigt (ex herpesvirus varar hela livet)
Vilken analys görs för immunitetsfrågeställningar?
IgG-analys
Vilka är de 4 olika sorter ELISA metoder?
- Direct ELISA
- Indirect ELISA
- Sandwich ELISA
- Competitive ELISA
Vad betyder antikroppstiter?
- Uppskattning av hur mycket antikroppar det finns i ett prov
- Serumprov späds i tvåfaldiga spädningar
- Varje spädning analyseras för påvisbara nivåer av antikroppar
- Titer = tilldelat titervärde för den sista spädningen får antikroppen kan påvisas
(ex antikroppar påvisas i brunn med spädning 1:200 –> titer = 200)
Desto högre titer - desto mer antikroppar
Vad står CMIA för?
Chemiluminiscent microparticle immunoassay
Vad står CLIA för?
Chemiliminescence immunoassay
Hur fungerar CMIA?
(ber om ursäkt ifall förklaringen är dålig)
Akrifinium-märkt Konjugat binder till provet som binder till antigen. Konjugatet binder också till antigen från provet som binder till en monoklonal musantikropp. Till detta tillsätts H2O2. Vid närvarande antigen kommer höjs pH:t av NaOH och akridium oxideras av H2O2 vilken sänder ut ljus.
Det är ljuset som avläses
Vad är Westernblot?
Hur sker indikationen?
En analysteknik för att påvisa specifika proteiner eller antikroppar i ett prov.
Indikationen sker genom:
- Molekylvikt
- Specifik antikroppsinbindning
Information om immunofluorescens
- Lägre sensitivitet än ELISA
- Personalkrävande, svår att automatisera
- Helvirusantigen med risk för korsreaktivitet
- Subjektiv optisk bedömning som bör utföras av en erfaren avläsare
- Möjligt att de vart den virusinfekterade cellens antikroppar binder in
