Bakteriell serologisk diagnostik Flashcards
Vad är serologi?
Vetenskaplig studie av serum och andra kroppsvätskor, men används slentrianmässigt som benämning på antikroppsbestämning i serum
Nämn några för- och nackdelar med antikroppsbestämning
- Enkelt och robust, ofta automatiserat
- Användbar då mikroben är svår/omöjlig att odla eller detektera med PCR, samt för att se vaccinationsstatus
- Antikroppsanalys kan inte påvisa pågående infektion, bara att man varit exponerad
- Inte alla infektioner ger antikroppssvar
- Korsreaktivitet mellan närbesläktade organismer, vanligt hos IgM-antikroppar
Nämn ett stort problem som finns vid alla serologiska analyser
Det är svårt att bestämma var gränsen går mellan positivt/negativt svar
I vilka kroppsvätskor mäts antikroppar?
Serum, likvor
I vilka kroppsvätskor mäts antigen?
Serum, likvor, BAL, feces, urin
I vilket material mäts interferon?
Blodceller
Vilka två övergripande kategorier av antikroppsanalyser finns?
1: Vaccinationsstatus
2: Infektion
Nämn några exempel på antikroppsanalyser för att undersöka vaccinationsstatus (sjukdom, bakterie, provmaterial, analys)
Stelkramp (clostridium tetani)
Kikhosta (Bordetella pertussis)
Difteri (Corynebacterium diphtheriae)
Alla dessa mäts i serum mha ELISA
Nämn några exempel på antikroppsanalyser för att undersöka infektion (mikroorganism, provmaterial, analys)
Grupp A streptokock: serum, neutralisationstest
Campylobacter: serum, ELISA
Borrelia: serum/likvor, kemiluminiscens
Treponema (syfilis): serum/likvor, ELISA/kemiluminiscens/agglutinationstest/flockningstest
Nämn några exempel på antigentest (mikroorganism, provmaterial, analys)
Aspergillus (Galaktomannan): serum/BAL/likvor, Sandwich-ELISA
Övriga svampar ((1,3)-Beta-D-glukan): serum/BAL, limulustest
Legionella: Urin, snabbtest
För vilken bakterie görs interferonanalyser? I vilket provmaterial? med vilken metod?
Mykobacterium tuberculosis, i blod, med ELISA eller ELISPOT
Vilka fyra sjukdomsstadier finns för syfilis?
Primärt: ett sår på könsorganet ca 3v efter smittillfället som läker på några veckor
Sekundärt: 7-10v efter smittillfället, feber+svullna lymfkörtlar + utslag. En del får inga symtom/väldigt lindriga
Latent: få/inga symtom
Tertiärt: granulom i olika organ som kan ge bl a svåra neurologiska eller hjärtrelaterade symtom
Kan syfilis odlas?
Nej
Kan syfilis diagnosticeras med PCR?
Ja, i sårvävnad. Men inte i sena stadier.
Vilka testas för syfilis?
Alla blodgivare och alla gravida, de med symtom och de i riskgrupp
För att undersöka huruvuda en patient exponerats för syfilis, hur går diagnostiken till? Beskriv de två tester som görs
Treponema: CLIA - screeningmetod där man mäter om patienten har antikroppar mot framrenade syfilisantigen. Positivt prov konfirmeras med TPPA
TPPA (treponema pallidum particle agglutination assay): “gold standard”, positivt resultat visar att patienten har eller haft syfilis. Agglutinationstest där antikroppar mot syfilisantigentäckta gelatinpartiklar mäts i en spädningsserie
För att undersöka huruvuda en patient har aktiv infektion med syfilis, hur går diagnostiken till? Vilka två tester görs? beskriv.
IgM-ELISA: bedömer om patienten har nydebuterad infektion, mäter IgM-antikroppar mot rekombinanta syfilis-antigen
VDRL (Veneral Disease Research Laboratory test): för att bedöma om patienten har pågående infektion. Ett flockningstest som mäter antikroppar mot cardiolipin, lecithin och kolesterol*. VDRL sjunker och blir ofta negativt efter behandling.
*dessa antikroppar uppstår även vid vissa andra infektioner, tex HIV.
Hur tolkas följande resultat:
1: TPPA, IgM och VDRL är negativa
2: Specifika antikroppar uppmäts (TPPA) och aktivitetsmarkör (VDRL) är positiv
3: Specifikt IgM-svar uppmäts
4: IgM svar uppmäts och aktivitetsmarkör (VDRL) är positiv
1: patienten bedöms EJ ha syfilis
2: patienten kan ha en pågående syfilisinfektion. Kontakta venerolog
3: patienten har eller har nyligen haft en syfilisinfektion. Kontakta venerolog
4: patienten har sannolikt en syfilisinfektion i tidigt skede. Kontakta venerolog
Beskriv tuberkulos. Vilken mikroorganism? Vad för smitta? Långsamt/snabbväxande?
Mycobacterium tuberculosis
Luftburen smitta
Mycket långsamväxande
Beskriv tuberkulossjukdomen. Vilka patienter får vanligast sjukdomen? Hur lång är inkubationstiden? Vanligaste lokaliseringen i kroppen? Kan den finnas latent?
- Vanligast hos patienter med immunbrist
- Inkubationstid 2-5 år, men kan dröja decennier
- Lokalisering: lungorna
- Ja, många har den latent hela livet
Vilka testas för tuberkulos?
- Alla flyktingar (frivilligt)
- Vissa som ska få anti-TNF-behandling
- Patienter med symtom
- Smittspårning
- Svenska soldater som stationeras utomlands
Vad är principen för hur TB-exponering mäts?
Patientens T-celler får reagera på specifika TB-antigen. Om immunsystemet tidigare exponerats för TB kommer T-cellerna reagera med INF-gamma-frisättning
Hur testas för TB-exponering? Hur många rör och vad innehåller varje rör? Vilken analys?
4 rör som inkuberas 16-24h och sedan tas supernatanten och testas med ELISA för gammainterferon
Rör 1: neg kontroll
Rör 2: innehåller 2 TB-antigen som aktiverar CD4+ celler
Rör 3: innehåller ett antal peptider som aktiverar CD4+ och CD8+ celler
Rör 4: innehåller mitogen - positiv kontroll
Hur ser man till att inte TB-vaccinerade patienter får positivt utslag på testet?
TB-antigenen i rör 2+3 är andra antigen än de som ingår i vaccinet, vilket gör att vaccinerade patienter inte kommer få positivt utslag
