Antibiotikaresistensbestämning Flashcards
Vad är naturlig resistens? Ge exempel på egenskaper som kan bidra till det samt bakterier som har dessa
Bakteriens egenskaper som gör att den inte är mottaglig för vissa typer av antibiotika.
Avsaknaden av cellvägg gör att Mycoplasma blir okänslig mot b-laktamantibiotika
Yttre membranet hos gramnegativa bakterier gör dem okänsliga för vankomycin
Vad är förvärvad resistens? ge exempel på effekter av dessa
Mutationer eller upptag av genetiskt material från andra bakterier medför resistens mot ett eller flera antibiotika
kan leda till:
- minskat upptag av antibiotika
- ökad utpumpning av antibiotika “efflux”
- enzymatisk inaktivering av antibiotika
- förändrade målstrukturer för antibiotika
Ge 4 anledningar till varför man gör resistensbestämning
- För att veta med vilket eller vilka antibiotika man kan behandla infektionen- testar för förvärvad resistens
- Screening av olika antibiotika med olika spektra och distribution
- Bestämning av minsta inhiberande koncentration
- Detektion av specifika resistensgener
Vad är ett smalt antibiotika spektrum?
antibiotika som är effektivt på ett litet antal mikrober
*angriper en specifik cellkomponent som bara finns i vissa bakterier
Vad är bred spektrum antibiotika?
brett aktivitetsområde
* Angriper cellkomponenter som är vanliga hos de flesta patogena bakterierna
Vad är Baktericid?
Bakteriedödande - bakterien dör helt (bra hos immunsupprimerade patienter/ nedsatt förmåga)
Vad är Bakteriostatisk
Bakteriehämmande - hämmar tillväxt av bakterier men kräver att immunsystemet kan ta hand om de bakterier som överlever
Beskriv peroral antibiotika vs intravenös antibiotika
Peroral = ges i tablett form, lätta att administreras
Intravenös = kräver ofta sjukhus, inneliggande patienter
Ge exempel på grampositiva kocker och stavar
Kocker:
- Stafylokocker (KNS och Staphylococcus aureus)
- Streptokocker
- Enterokocker
- Pneumokocker
Stavar:
- Listeria monocytogenes
- Corynebacterium dipteriae
- Bacillus
Ge exempel på gramnegativa kocker och stavar
Kocker:
- Neisseria meningitidis
- Nesseria gonorrhoeae
- Moraxella chantaralis
Stavar:
- Hemophilus influenzae
- Bordetella pertussis
- Enterobakterier: Escherichia coli, Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Salmonella, Shigella
- Campylobacter
- Pseudomonas
- Acinetobacter
Vad står MIC för och vad innebär det?
Minimum Inhibitory Concentration
Den lägsta koncentrationen av ett antibiotikum (mg/L) som krävs för att hämma växt av bakterierna
Ju lägre MIC desto känsligare är bakterierna
Ligger bakteriens MIC-värde tillräckligt lågt under den koncentration av antibiotikat som kan uppnås i kroppen vid behandling så beskrivs bakterien som känsliga för antibiotikat.
På vilken hemsida sammanfattas data och forskning gällande MIC-värden?
EUCAST
Antibiotikakänslighet klassificeras med SIR-systemet, vad står bokstäverna för?
S = Känslig, infektionen kan förväntas svara på behandling med dett antibiotikum vid normal dosering
I = Känslig vid ökad exponering (increased exposure), Infektionen kan behandlas med detta medel om exponeringen ökas, tex genom ökad dos.
R = Resistent, Klinisk effekt av behandling med detta antibiotikum är osannolik
Nämn 4 olika metoder för antibiotikaresistensbestämmning
- Kirby-Bauer, Disk diffusion
- Platt och rör spädning
- MIC bestämning
- Automatiserade instrument
- PCR
Hur fungerar diskdiffusion/lapptest?
Bakteriestammen som ska testas suspenderas i vätska som fördelas över en agarplatta.
En “disk” med antibiotika som ska testas läggs på agarplattan
Antibiotika diffunderar ut i garn från “disken” - ju längre från disken, desto lägre antibiotika koncentration
Agarplattan inkluderas i 34-36 grader över natt (16-20 timmar) så att bakterierna kan växa fram
Bakteriena växer så nära “disken” de kan, men hämmas när antibiotikakoncentrationen i agarn motsvarar dess MIC-värde för antibiotikat.
Diametern (mm) på inhibitionszonen mäts, varje mm motsvarar ett vist MIC-värde.
Stor inhibitionszon = lågt MIC-värde
Liten inhbitionszon = högt MIC-värde
När MIC metoden görs på flytande medium, hur länge och i vilken temperatur inkuberas det då?
16-20h, 37 grader
Hur fungerar plattbuljongmetoder för MIC
- Odla bakterier
- Slamma 0,5 McFarland
- Muller-Hinton Buljong
- 50-100 ul/brunn
- inkubering av platta 18-24h
Beskriv ett E-test
Bakterie inokuleras på en agarplatta. Ett strip indränkt med en antibiotikakoncentrationsgradient appliceras på plattan.
Plattan inkluderas över natt 34-36 grader och lägsta inhiberande koncentration avläses i mg/l efter 16-20h
Ge exempel på 4 automatiska system/instrument
- The MicroScanWalkAway (Siemens Healthcare Diagnostics)
- Slutet system inkubator/läsare, analyserar 40-96 microdlutons plattor MIC inom 3,5-18h - BD Phoenix Automated Microbiology System (BD Diagnostics)
- Inkubator/läsare, 99 testpaneler med 84 brunnar, Turbidometri och colorometri, MIC resultat inom 6-16h - The Vitek 2 System (BioMerieux)
- Plastreagens kort med 64 brunnar, många olika test inkl resistensbestämmning - The Sensitirre ARIS 2x (TrekDiagnostic system)
- 64-panel kapacitet, 96-well microdilution plattor 18-24h
Vad kan PCR användas för vid antibiotikaresistensbestämning?
- Bestämning av vissa resistensgener som tex MecA för MRSA och Van A och Van B för enterokocker
- Används även för att detektera olika resistensgener hos ESBL-stammar tex TEM, SHV, OXA-48
Vilken grumlighet ska inokulat ha?
McFarland 0,5-standard (0,4-0,6)
Beskriv hela processen för resistensbestämning med EUCAST lappdiffusionsmetoden
Används endast Mueller Hinton agar (MH)
En isolerad koloni plockas från en icke-selektiv agarplatta som är inkluberad över natten.
En till flera kolonier slammas i 0,85% NaCL/PBS till en homogen lösning som motsvarar McFarland 0,5-standard.
(Undantag: Streptococcus pneumoniae slammas till McFarland 0,5 från en blodplatta, men till McFarland 1,0 från en chokladplatta)
Inockulatet (det slammade) ska användas inom 15 minuter.
En bomullspinne doppas i slamningen, beroende på om det är en gram -/+ så trycks överflödig vätska bort från topsen mot kanten av röret (görs hos gram-)
Inokulatet sprids ut jämt över hela ytan.
Antibiotikalapparna ska placeras inom 15 min från att inokulatet placerats, ska vara placerade så att hämningszonerna inte överlappar varandra
Plattorna ska inkluderas inom 15 min för att förhindra prediffusion vilket kan ge för stora zoner.
Plattorna ska inkluderas i små staplar för att undvika ojämn uppvärmning
Inkuberas i luft och MH-F i luft med 4-6% CO2 i 34-36 grader.