Antibiotikaresistensbestämning Flashcards

1
Q

Vad är naturlig resistens? Ge exempel på egenskaper som kan bidra till det samt bakterier som har dessa

A

Bakteriens egenskaper som gör att den inte är mottaglig för vissa typer av antibiotika.

Avsaknaden av cellvägg gör att Mycoplasma blir okänslig mot b-laktamantibiotika

Yttre membranet hos gramnegativa bakterier gör dem okänsliga för vankomycin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Vad är förvärvad resistens? ge exempel på effekter av dessa

A

Mutationer eller upptag av genetiskt material från andra bakterier medför resistens mot ett eller flera antibiotika

kan leda till:

  • minskat upptag av antibiotika
  • ökad utpumpning av antibiotika “efflux”
  • enzymatisk inaktivering av antibiotika
  • förändrade målstrukturer för antibiotika
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Ge 4 anledningar till varför man gör resistensbestämning

A
  1. För att veta med vilket eller vilka antibiotika man kan behandla infektionen- testar för förvärvad resistens
  2. Screening av olika antibiotika med olika spektra och distribution
  3. Bestämning av minsta inhiberande koncentration
  4. Detektion av specifika resistensgener
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Vad är ett smalt antibiotika spektrum?

A

antibiotika som är effektivt på ett litet antal mikrober

*angriper en specifik cellkomponent som bara finns i vissa bakterier

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Vad är bred spektrum antibiotika?

A

brett aktivitetsområde

* Angriper cellkomponenter som är vanliga hos de flesta patogena bakterierna

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Vad är Baktericid?

A

Bakteriedödande - bakterien dör helt (bra hos immunsupprimerade patienter/ nedsatt förmåga)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Vad är Bakteriostatisk

A

Bakteriehämmande - hämmar tillväxt av bakterier men kräver att immunsystemet kan ta hand om de bakterier som överlever

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Beskriv peroral antibiotika vs intravenös antibiotika

A

Peroral = ges i tablett form, lätta att administreras

Intravenös = kräver ofta sjukhus, inneliggande patienter

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Ge exempel på grampositiva kocker och stavar

A

Kocker:

  • Stafylokocker (KNS och Staphylococcus aureus)
  • Streptokocker
  • Enterokocker
  • Pneumokocker

Stavar:

  • Listeria monocytogenes
  • Corynebacterium dipteriae
  • Bacillus
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Ge exempel på gramnegativa kocker och stavar

A

Kocker:

  • Neisseria meningitidis
  • Nesseria gonorrhoeae
  • Moraxella chantaralis

Stavar:

  • Hemophilus influenzae
  • Bordetella pertussis
  • Enterobakterier: Escherichia coli, Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Salmonella, Shigella
  • Campylobacter
  • Pseudomonas
  • Acinetobacter
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Vad står MIC för och vad innebär det?

A

Minimum Inhibitory Concentration

Den lägsta koncentrationen av ett antibiotikum (mg/L) som krävs för att hämma växt av bakterierna

Ju lägre MIC desto känsligare är bakterierna

Ligger bakteriens MIC-värde tillräckligt lågt under den koncentration av antibiotikat som kan uppnås i kroppen vid behandling så beskrivs bakterien som känsliga för antibiotikat.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

På vilken hemsida sammanfattas data och forskning gällande MIC-värden?

A

EUCAST

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Antibiotikakänslighet klassificeras med SIR-systemet, vad står bokstäverna för?

A

S = Känslig, infektionen kan förväntas svara på behandling med dett antibiotikum vid normal dosering

I = Känslig vid ökad exponering (increased exposure), Infektionen kan behandlas med detta medel om exponeringen ökas, tex genom ökad dos.

R = Resistent, Klinisk effekt av behandling med detta antibiotikum är osannolik

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Nämn 4 olika metoder för antibiotikaresistensbestämmning

A
  • Kirby-Bauer, Disk diffusion
  • Platt och rör spädning
  • MIC bestämning
  • Automatiserade instrument
    - PCR
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Hur fungerar diskdiffusion/lapptest?

A

Bakteriestammen som ska testas suspenderas i vätska som fördelas över en agarplatta.

En “disk” med antibiotika som ska testas läggs på agarplattan

Antibiotika diffunderar ut i garn från “disken” - ju längre från disken, desto lägre antibiotika koncentration

Agarplattan inkluderas i 34-36 grader över natt (16-20 timmar) så att bakterierna kan växa fram

Bakteriena växer så nära “disken” de kan, men hämmas när antibiotikakoncentrationen i agarn motsvarar dess MIC-värde för antibiotikat.

Diametern (mm) på inhibitionszonen mäts, varje mm motsvarar ett vist MIC-värde.

Stor inhibitionszon = lågt MIC-värde
Liten inhbitionszon = högt MIC-värde

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

När MIC metoden görs på flytande medium, hur länge och i vilken temperatur inkuberas det då?

A

16-20h, 37 grader

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Hur fungerar plattbuljongmetoder för MIC

A
  • Odla bakterier
  • Slamma 0,5 McFarland
  • Muller-Hinton Buljong
  • 50-100 ul/brunn
  • inkubering av platta 18-24h
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Beskriv ett E-test

A

Bakterie inokuleras på en agarplatta. Ett strip indränkt med en antibiotikakoncentrationsgradient appliceras på plattan.

Plattan inkluderas över natt 34-36 grader och lägsta inhiberande koncentration avläses i mg/l efter 16-20h

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Ge exempel på 4 automatiska system/instrument

A
  • The MicroScanWalkAway (Siemens Healthcare Diagnostics)
    - Slutet system inkubator/läsare, analyserar 40-96 microdlutons plattor MIC inom 3,5-18h
  • BD Phoenix Automated Microbiology System (BD Diagnostics)
    - Inkubator/läsare, 99 testpaneler med 84 brunnar, Turbidometri och colorometri, MIC resultat inom 6-16h
  • The Vitek 2 System (BioMerieux)
    - Plastreagens kort med 64 brunnar, många olika test inkl resistensbestämmning
  • The Sensitirre ARIS 2x (TrekDiagnostic system)
    - 64-panel kapacitet, 96-well microdilution plattor 18-24h
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Vad kan PCR användas för vid antibiotikaresistensbestämning?

A
  • Bestämning av vissa resistensgener som tex MecA för MRSA och Van A och Van B för enterokocker
  • Används även för att detektera olika resistensgener hos ESBL-stammar tex TEM, SHV, OXA-48
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Vilken grumlighet ska inokulat ha?

A

McFarland 0,5-standard (0,4-0,6)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Beskriv hela processen för resistensbestämning med EUCAST lappdiffusionsmetoden

A

Används endast Mueller Hinton agar (MH)
En isolerad koloni plockas från en icke-selektiv agarplatta som är inkluberad över natten.
En till flera kolonier slammas i 0,85% NaCL/PBS till en homogen lösning som motsvarar McFarland 0,5-standard.
(Undantag: Streptococcus pneumoniae slammas till McFarland 0,5 från en blodplatta, men till McFarland 1,0 från en chokladplatta)
Inockulatet (det slammade) ska användas inom 15 minuter.
En bomullspinne doppas i slamningen, beroende på om det är en gram -/+ så trycks överflödig vätska bort från topsen mot kanten av röret (görs hos gram-)
Inokulatet sprids ut jämt över hela ytan.

Antibiotikalapparna ska placeras inom 15 min från att inokulatet placerats, ska vara placerade så att hämningszonerna inte överlappar varandra

Plattorna ska inkluderas inom 15 min för att förhindra prediffusion vilket kan ge för stora zoner.
Plattorna ska inkluderas i små staplar för att undvika ojämn uppvärmning
Inkuberas i luft och MH-F i luft med 4-6% CO2 i 34-36 grader.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Vad innebär det att växten ska vara konfluerande?

A

Innebär att det ska vara en jämn tillväxt av bakterier över hela plattan, får ex inte finnas tydliga hålrum. (Därför viktigt att göra en ordentlig odling)

24
Q

Hur ska zonerna avläsas för bästa resultat?

A

Mot en mörk bakgrund

25
Q

Vad finns det för felkällor hos antibiotika-lappar?

A
  • Fel antibiotikalapp (fel lapp eller fel lappstyrka)
  • Antibiotikainnehåll (felaktig förvaring, känsliga antibiotika, passerat utgångsdatum)
  • Lapparna är inte rumstempererade när behållaren öppnats
  • För många lappar på plattan (interaktion mellan lappar)
26
Q

Vad finns det för felkällor med kontroll-stammar?

A
  • Fel kvalitetskontrollstam
  • Mutation
  • Kontamination
  • För gammal kultur
27
Q

Vilka är de 4 vanligaste diskdiffusions-resistensbestämmningarna?

Hur går man vidare efteråt?

A

MRSA - tex oxacillin, cefoxitin (FOX)
VRE - vancomycen
ESBL - tex cefadroxil, cefotaxime
Carbapenemaser - meropenem eller imenpenem

Går vidare med fenotypiska och genotypiska teste tex DDT, PCR mm

28
Q

Vad står MRSA för?

A

Meticillin-resistenta S.aureus

29
Q

Mot vilken grupp av antibiotika har MRSA resistens?

A

Resistens mot alla betalaktamantibiotika

30
Q

Vad kodar MecA-genen för? Och vad ger det?

A

Kodar för nytt PBP (PBP2a/PBP2’)

Ger resistens mot samtliga betalaktamantibiotika med undantagen ceftarolin och ceftobiprol

31
Q

Med vilket antibiotika testas känsligheten för betalaktamantibiotika hos S.aureus

A

Med antibiotikat cefoxitin

32
Q

Ge exempel på betalaktamantibiotika

A

Cefalosporiner

Karbapenemer

33
Q

Vid misstänkt MRSA, hur bekräftas det och vad letar man efter?

A

Genom PCR
Letar efter:
- mecA-gen - resistensgen
- nus-gen - specifik för S.aureus

34
Q

Hur sker MRSA-Screening?

A

Sker på ett speciellt labb

  • Odling i FOX-buljong
  • Screening med PCR, Nuc-genen
  • Odling på MRSA-Chrom-agar
  • MecA-PCR
  • Vanlig resistensbestämmning enligt diskdiffusion
35
Q

Vad står VRE för?

A

Vankomycinresistenta enterokocker

36
Q

Vad är der som gör att enterokockerna blir resistenta mot vankomycin?

A

De har förändrade peptidkedjor i peptidoglukanet, Terminalt alanin är ersatt med laktat vilket gör att vankomycinet inte kan binda.

37
Q

Hur sprids vanA och vanB-genkluster som tillåter VRE?

A

genom transposoner plasmider

38
Q

Hur bekräftas misstänkt VRE? vad letar man efter?

A

Genom PCR-analys, letar efter vanA och vanB generna,

39
Q

Hur sker VRE-screening?

A
  • Odling i vancomycin-buljong
  • Screening I PCR
  • Odling på VRE-Chrom-agar
  • Resistensbestämning
40
Q

Vad är betalaktamaser?

A

Enzymer som bryter upp betalaktamringen utan att inaktiveras

41
Q

Vad står ESBL för?

A

Extendend spectrum betalactamases

42
Q

Vad ger ESBL resistens mot?

A

Cefalosporiner (även ceftazidim och cefotaxim) + penicilliner

43
Q

Var förekommer ESBL?

A

hos E.coli, Klebsiella och andra Enterobacteriaceae

44
Q

Vad står pAmpC för?

A

Plasmid-buren AmpC

45
Q

Vad ger pAmpC?

A

Ger resistens mot cefalosporiner

46
Q

Var förekommer pAmpC?

A

E.coli, Klebsiella och andra Enterobacteriaceae (inte lika vanliga som “klassiska” ESBL)

47
Q

Vad är DDT?

A

Dubbeldisktest

48
Q

Vad innebär synergi vid DDT test?

A

Att zonerna växer ihop

49
Q

Karbapenemaser gör resistens (eller känslighet) mot?

A

Karbapenemer (meropenem, imipenem) (ofta resistens mot cefalosporiner, penicilliner)

50
Q

Vad betyder CPO?

A

Carbapenemase producing organisms (karbapenemas-bildande bakterier)

51
Q

Vilka bakterier testas för karbapenemaser (ESBLcarba)?

A

Alla Enterobacteriaceae-stammar med förhöjt MIC-värde för meropenem (MIC meropenem > 0,125 mg/l, zondiameter < 28mm) undersöks avseende karbapenemas

52
Q

Vad letar man efter när man undersöker för karbapenemas?

A

AmpC + förändringar i bakteriens cellvägg

ESBL + förändringar i bakteriens cellvägg

53
Q

Vilka olika typer av screening finns för karbapenemaser?

A
  • Screening ab - meropenem/imipenem
  • Rosco-lapp-test
  • Snabbtest
  • Genetisk konfirmationstest för resistensgener
54
Q

Vilka tre olika ämnen inaktiverar karbapenaser, vilka karbapenaser inaktiverar respektive ämne?

A

Dipikoliksyra - Inaktiverar NDM, VIM, IMP och andra klass B-karbapenemaser (metallokarbapenemaser)

Borsyra - Inaktiverar KPS och andra klass A-karbapenemaser, men även AmpC

Kloxacillin - Inaktiverar AmpC men EJ klass A och klass B-karbapenemaser

55
Q

Vilka antikroppar mot karbapenaser används vid snabbtest?

A
KPC
OXA-48
VIM
IMP
NDM
56
Q

Hur fungerar karbapenas snabbtestet

A

Antikroppar fästa på olika linjer i ett membran. Färgreaktion när antikroppar binder till karbapenemas.

57
Q

Hur motverkar man uppkomst och spridning av antibiotikaresistens?

A
  • Restriktiv antibiotikaanvändning
  • Rätt antibiotikum
  • Rätt dosering, rätt dosintervall
  • Så smalt antibiotikum som möjligt
  • Antibiotikum som påverkar normalfloran så lite som möjligt
  • Antibiotikum med som kort “ekoskugga” som möjligt
  • Förhindra smittspridning