Bakterieidentifikation Flashcards
Nämn några vanliga provmaterial
Urin, faeces, blod, likvor, sårmaterial, svalgsekret, nasopharynx, sputum, BAL, vävnadsbitar, cervixprov, urethraprov, miljöprover
Vilka två generella kategorier av plattor finns det?
Selektiva och icke selektiva plattor
Vad påverkar antalet plattor man odlar på?
Förväntat bakteriefynd - ju fler bakterier desto fler plattor
I vilken ordning ockuleras plattorna?
Den minst selektiva plattan först
Inkubering - vilka olika syrenivåer används? Vilka temperaturer?
Vanlig luft, endast CO2, mikroaerofil miljö, anaerob miljö
30°C, 37°C, 42°C
Vilka 4 sätt kan växten undersökas/användas för att identifiera bakterien?
Vilken syrenivå den växte på: Aerobt/anaerobt/CO2
Växt på selektiva/oselektiva plattor
Morfologi: form, storlek, färg på kolonierna
Lukt
Humanpatogener - vilken syrenivå föredrar de generellt?
De är fakultativa anaerober så de kan existera både aerobt och anaerobt
Vilka former finns för kolonimorfologin? (2D-form samt hur den står ut från plattan (3D))
2D: Rund, oregelbunden, taggig, lobformad, utflytande, filamentös
3D: Platt, upphöjd, konvex, bucklig
Hur kan koloniernas yta se ut? (kolonimorfologi)
Blank/glänsande, matt, torr, oregelbunden, frasig
Vilken storlek har G- vs G+ kolonier över lag?
G- är stora över lag
G+ är små över lag
Ge exempel på bakterier och vad de kan lukta!
Pseudomonas: söt (hallongodis) E. coli: syrligt/surt Stafylokocker: unken gammal garderob Haemofilus: snor C. difficile: stall
Vilka egenskaper kan utnyttjas för vidare identifiering av bakterier? (6 st)
- Produktion av extracellulära toxiner och enzymer
- Antibiotikakänslighet
- Antigenspecificitet hos ytmakromolekyler (serologisk typning)
- Känslighet för tillsats av selekterande eller hämmande substanser i odlingsmedier
- Biokemiska egenskaper
- Genetiska egenskaper
Hur går ett katalastest till?
Vilken egenskap undersöks?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper skiljer den åt?
En bakteriekoloni sätts på objektsglas och väteperoxid droppas över. Bildas bubblor tyder detta på att bakterien är en stafylokock (katalas +).
Det undersöker förekomst av enzymet katalas (omvandlar H2O2 till H2O + O2).
Används för att skilja på stafylokocker och streptokocker.
Hur går ett koagulastest till?
Vilken egenskap undersöks?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper skiljer den åt?
Bakterier tillsätts till ett provrör med fårplasma, inkuberas och sedan undersöks om plasman koagulerat.
Förekomst av enzymet koagulas (omvandlar fibrinogen till fibrin)
Används för att skilja S. Aureus från övriga stafylokocker (KNS)
Hur går ett oxidastest till?
Vilken egenskap undersöks?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper skiljer den åt?
En droppe av oxidastestet (lösning innehållande NNNN-tetramethyl-p-
phenylendiamin (TMPD)) droppas på läskpapper, varefter lite bakterier tillsätts. Oxidaspositiva bakterier färgas violett.
Förekomsten av enzymet indolphenoloxidas.
Neisseriabakterier, Moraxella och P. Aeruginosa bildar detta enzym och dessa kan mha oxidastest skiljas från övriga bakterier.
Hur går indol spot till?
Vilken egenskap undersöks?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper identifierar den?
En droppe sätts på läskpapper, varefter lite bakterier tillsätts. Indolspot innehåller p-dimethylaminocinnamaldehyde
(PACA) som reagerar med indol
och bildar ett blått/blågrönt ämne.
Påvisande av indol indikerar tryptofan-nedbrytning.
Används för att påvisa E. coli
Vad innehåller en DNAas-platta?
Vilken egenskap undersöks?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper identifierar den?
Det är en vanlig agarplatta med tillsats av DNA.
Mörk färgning påvisar förekomst av DNAas
Används för differentiering av bakterier som producerar DNAas, tex S. Aureus
Vad innehåller en Esculin-platta och hur funkar den?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper identifierar den?
Vanlig agar med tillsats av esculin (en glukosid) och ett järnsalt (järncitrat). Vid nedbrytning bildas ett svartfärgat ämne (esculetin).
Används för identifiering av enterokocker
Vad innehåller en Drigalski-platta?
Vilken egenskap undersöks?
Vad används det för, dvs vilka bakterier/bakteriegrupper identifierar den?
Det är en selekterande och differentieraned platta innehållande kristalviolett och laktos
För påvisning av laktosjäsning (ger gul färg).
Påvisar laktosjäsare som E. coli, klebsiella, icke-proteus och pseudomonas
Vad är bacitracin och vilka bakterier hämmas av det?
Ett antibiotikum
Hämmar växt av ß-streptokocker grupp A (ibland även C och G)
Vad är oleandomycin och vilka bakterier hämmas INTE av det?
Ett antibiotikum
Används för att hämma alla bakterier förutom Haemophilus. Även nesseria kan växa i hämningszonen
Vad är novobiocin och vad används det för?
Ett antibiotikum som används för att skilja S. saprofyticus från övriga KNS. Saprofyticus är ej känslig till skillnad från de andra.
Vad är tobramycin/gentamycin och vad används det för?
Ett antibiotikum som används som indikator för anaeroba bakterier
Hur testar man för MRSA/VRE/ESBL?
Odling på MH-platta med antibiotikalappar. Efter inkubering mäts zonstorleken och jämförs med givna siffror för att se om den är resistent eller inte.
Vad används oxacillin för?
Resistensbestämning av pneumokocker. Påvisar betalaktamas
Vad används Nitrocifintest för?
Resistensbestämning. Detektion av betalaktamas
Vad används Cefoxitin (Fox-30) för?
Resistensbestämning. Detektion av MRSA
Vad används Cefadroxil för?
Resistensbestämning. Detektion av ESBL.
Vad är agglutinationstest? Vilken princip baseras de på?
Ge 2 exempel på tester
Kommersiellt tillgängliga kit för snabb bestämning av bakterietyp.
De baseras på agglutination av färgade latexpartiklar täckta med specifika antikroppar och bakterier, tex clumping factor och kolhydratstrukturer
Streptex: gruppbestämmer streptokocker
Stahaurex: urskiljer S. Aureus
Vad är XV-faktortest?
Vilka faktorer testas, dvs vad betyder X, V och XV?
Vilka bakterier identifieras?
Ett test som bygger på vilka faktorer olika Haemophilusbakterier behöver för att växa. 3 små lappar läggs på plattan och inkuberas, dagen efter undersöks runt vilka lappar det finns växt.
X=Hemin, V=NAD, XV=båda
H. influenzae behöver XV
H. ducreyi behöver X
H. parainfluenzae behöver V
Vad är ett amningstest? Hur går det till? Vilka bakterier identifieras?
Ett test för att skilja mellan H. influenzae/parainfluenzae
På en blodagarplatta stryks misstänkt H. influenzae/parainfluenzae ut. S. aureus stryks i en rak linje genom det tidigare stryket. Efter inkubering undersöks plattan för att se om bakterien “ammar” på S. aureus, dvs om den bara växer precis runt linjen.
Amning = H. influenzae
Inte amning = H. parainfluenzae
Vad betyder hemolys?
Vilka bakterier orsakar hemolys? Vilka sorters hemolys finns?
Hemolys: nedbrytning av blod
Streptokocker
Alfa, beta, gamma hemolys finns