TLC laboration

Question 1

Du behöver elueringsmedel för analysen kallat A och B.

A: n-heptan, dietyleter, HAc i volymförhållandena 90:10:1

B: Kloroform, metanol, H2O, HAc i volymförhållande 65:28:5:4

Hur bereder du dessa? du behöver ca 100 ml av vardera.

Answer 1

Question 2

Gå igenom labbens steg :)

Answer 2

:)

Question 3

Hur ska du markera på kiselgel plattorna?

Platta A: 5 prov

Platta b: 6 prov

Answer 3

• Markerar med blyerts (tryck ej för hårt-> skadar kiselgelen)
• Appliceringsstället bör vara 0,3-0,5 cm mellan appliceringar. Ca 1,5 cm från nedre kant och bör ej appliceras nära kanten

Question 4

Vad använder du för att applicera dina prover på kiselgelplattan?

Vad ska du tänka på?

Vad ska du göra mellan varje applicering?

Hur tvättar du appliceringsmatrialet?

Answer 4

Hamiltonspruta.

Du kan ej applicera allt med en gång gå längst ditt sträck och akta kiselgelen, låt de lufttorka mellan appliceringarna.

Sprutan ska sköljas med metanol mellan varje applicering så ta fram bägare med metanol och en bägare som kan användas till slask.

Tvättas genom att den sköljs med metanol 10-15 ggr

Question 5

Vilket vätskedjup ska finnas i elueringskärlen?

Answer 5

ca 0,5 cm

Question 6

Varför förvarar du ditt elueringsmedel i glasflaska med propp?

Answer 6

För att etern annars dunstar bort och vi får ett felaktigt förhållande

Question 7

Hur länge låter du eleuering fortgå? Vad gör du när du avbryter den?

Answer 7

Tills lösningsmedelt nått ca 1 cm från övre kanten vilket tar 20-25 minuter beroende på eleueringsmedel.

Plattorna tas upp med tång och får lufttorka i dragskåp.

Question 8

Hur framkallar du plattorna?

Answer 8

Sprutar färgreagens i dragskåp över plattan, de får ej rinna men hela plattan ska ha reagens över sig. Sätter sedan in i värmeskåp på 180-200 grader i någr amin tills banden framträder.

Question 9

Är dina kiselgelplattor polära (hydrofil) eller opolära (hydrofob)?

Answer 9

Dem är polära (hydrofila)

Question 10

Vilka lipider kommer vandra med opolärt lösningsmedel resp mer polärt lösningsmedel?

Answer 10

Opolärt lösningsmedel: mer opolära lipider

Polärt lösningsmedel: polära lipider

Question 11

Vilka lipider vandrar som dubbelband på plattan?

Answer 11

Sfingomyelin, pga att den har 2 isomerer

Question 12

Vilka lipider ses i plasma och erytrocyter?

Answer 12

Question 13

Använder man sig av normal phase eller reversed phase vid tlc?

Answer 13

Normal phase

Question 14

Vad beror separationen på i TLC?

Answer 14

Den separerar beroende på hydrofilicitet

Question 15

Den mobila fasen är ofta:

Answer 15

trefaskomponentsystem

Question 16

Vad beror vandringen på platta på?

Answer 16

Hur bra komponenterna löser sig i mobilfas och hur bra de absorberas av stationär fas.

Question 17

Varför ska du använda glasvaror i denna analys?

Answer 17

Lösningsmedlet smälter plasten

Question 18

Vad innebär normal phase?

Answer 18

Stationär fas: polär

Mobil fas: opolär

Question 19

Varför ska du sätta på lock på eleueringkärlen och vänta en liten stund innan du sätter ner plattorna?

Answer 19

För att luften i kärlet ska mättas med eluering