TLC föreläsning Flashcards
Vad är TLC?
En vätskekromatografisk metod som separerar beroende på hydrofilicitet
Vad använder man TLC till?
- Separera analyter i en blandning
- Kontrollera renhet hos analyt
- Rena upp prov (preparativ TLC)
- Följa förlopp under kemisk reaktion
Ge exempel på områden där TLC används
- Klinisk diagnostik
- Läkemedelsindustri
- Livsmedelsindustri
Vad är skillnaden på en polär molekyl och en opolär? Vad är dipolmoment?
Polär molekyl: Övervägande positiv i en ände och negativ i andra. Polära ämnen är ofta lösliga i andra polära ämnen och nästan helt olösliga i opolära ämnen.
Dipolmoment: Mått på polära molekylers polaritet
Opolär molekyl: Motsatsen till polär molekyl. Laddningen är symmetrisk över hela molekylen. En opolär molekul har inga elektriskt laddade poler.
TLC består av:
Stationär fas som är:
Mobil fas som är:
Stationära fas: Någon adsorberande yta som är fast och polär
Mobil fas: Vätska som ofta är trekomponentsystem och rörlig
Skillnad på normal phase och reversed phase?
Normal phase: Separerar på grundval av hydrofila (polära) interaktioner
Reversed phase: Separerar på grundval av hydrofoba (ickepolära) interaktioner
Beskriv TLC-plattan och dess komponent
- Ett lager kiselgel (sorbent-> absorberar) täcker glas, plast eller aluminium platta
Kiselgelen: Polymer av kiseloxid som är amorft, poröst och delvis hydratiserat.
Vad menas med HPTLC=high performance TLC?
Små kiselgelkorn på plattan för extra bra separation
Hur snabbt föreningarna följer den mobila fasen beror på?
- Hur lösliga ämnena är i den mobila fasen
- Hur bra de adsorberas av den stationära fasen
Vad gör att eluering sker?
Kapillärkraften gör att eluering sker. Kontinuerlig jämvikt ställer in sig under eluering och flödet pressas samtidigt framåt
Beskriv teorin bakom TLC
- Separerar på grundval av hydrofilicitet ( separeras oga deras relativa affinitet till den stationära fasen)
- Normal phase
- Hydrofil förening adsorberas bra till stationär fasen och vandrar ej så långt då den ej löser sig bra i mobil fasen. Hydrofoba föreningar adsorberas ej bra av stationär fasen och vandrar därför längre på plattan.
Hur kan den mobila fasens polaritet påverka elueringen?
Genom att göra mobilfasen mer polär kommer affiniteten hos dem hydrofila komponenterna öka för mobilfasen vilket gör att hydrofila komponenter vandrar längre/eluerar snabbare. Samtidigt som de hydrofoba komponenterna får sämre affinitet för mobil fasen och vandra kortare.
Gör vi den mobila fasen mer opolär kommer de hydrofika vandra kortare/eluera långsammare och de hydrofoba vandra längre.
Opolära lipider gillar vad för typ av lösningsmedel?
Polära lipider gillar vad för typ av lösningsmedel?
Opolära lipider gillar gillar opolära lösningsmedel
Polära lipider gillar polära lösningsmedel
Vad är Rf-kvoten för något?
Kvoten för sträckan som provet eleuerat/sträckan som fronten har vandrat och skiljer sig för samma föreningar om olika elueringsmedel eller plattor används.
Färglösa föreningar: färgreaktion utförs för att detektera analyterna.
Det finns olika typer av färger vilka är dem och vad färgar dem?
- Orcinol färgning: infärgning av sockerinnehållande lipider
- Kopparacetat: Infärgning av organiska föreningar
- Anisaldehyd:Infärgning av lipider, olika lipidklasser ger olika färg (detta hade vi på labben)
- UV-detektion (fluorescerande ämne tillsätts)
