Proteómica 2.4

Question 1

Cual es la técnica utilizada para la purificación de proteínas, tambien aplicado a metabolómica (asilar metabolitos) *fase liquida.

Answer 1

Cromatografía de Intercambio Iónico

Question 2

Explica esta técnica de purificación de proteínas

Answer 2

Aplicada a gases o liquidos, se basa en tecnología de intercambio ionico: avienta corriente electrica & registra espectro de absorvancia de la luz, para identificar moléculas pequeñas.

*cromatografo-alcohol.

Question 3

Tipos de Cromatografía de Intercambio Iónico

Answer 3

• *iones
  *exclusión tamaño (identifica proteínas presentes por absorvancia, y las separa por peso molecular)
• afinidad (membrana que es afin a ciertas moleculas de interés- carga negativa o positiva )

Question 4

Se puede acoplada a cromatografia de gases, es para metabolitos que no conocemos.

Answer 4

Espectometría de masas

Question 5

Etsudiantes quieren identificar biomarcadores tempranos para cancer de colon, lo quieren hacer hacer mdiienco el cnjunto total de metabolitos en una muestra de sangre. ¿cual es la metodología ma sporpiada para identificar los metabolitos?

Answer 5

Espectometría de masas acoplada a cromatografía de gases

Question 6

Técnica
Usa una reacción antigeno anticuerpo, se acoplan a un cromogeno/sustancia que cambia de color. Sumamante especifica para proteínas particulares como las SPIKE.

Answer 6

Elisa

Answer 7

PCR

Question 8

Tecnica que utiliza la unión de Anticuerpos monoclonales a Antígenos en placa.

Answer 8

Elisa

*colorimetrico

Question 9

Permite identificación de proteínas base a su masamolécular finidad por anticuerpos. usa gel de acrilamida.

Answer 9

Western blot

*acrilamida

Question 10

Se puede acoplada a cromatografia de gases, es para metabolitos que no conocemos.

Answer 10

Espectometría de masas

Question 11

Tecnica que se basa en afinidad antigeno anticuerpo que permite analizar varias proteínas en paralelo.

Answer 11

Micorareglos

Va a utilizar anticuerpos primarios en una matriz. Determinas a la parla asuencia o presencia de varias proteónas que hibridan a la vez.

Question 12

Malditof

Answer 12

Con un laser indica diferente coloración dependiendo el metabolito y su espectro de absorvancia.

forma de
espectometria de masas acoplada cromatografo de gases.

Combinación de fase liquida Y fase gaseosa.
la proteínas estan a la misma carga en el campo elétrico. No hay variaciones en carga.

Question 13

IMG

Answer 13

gráfico M/Z
por Malditof

Question 14

Tecnicas para validación de otras tecnicas o ausencia y presencia de patogenos

Answer 14

ELISA , WESTERN BLOT; MICROARREGLOS

Question 15

Caracterización de proteínas

Answer 15

M = masa
Z = carga elétrica

m/z= punto isoelétrico

Question 16

Técnicas para caracterizar proteínas

Answer 16

Basadas en gel & computacionales

*usas espectometrias para ver que hay “mineria de datos” es proceso mas amplio, si solo quieres un resultado usas las técnicas de caracterización gel mas espeficio (sabes que buscas)

Question 17

• Electroforesis en gel de poliacrilamida (identifica M)
• Electroforesis el gel bidimencional (2Dpage-en poliacrilamida identifica Z & M)

Answer 17

Basadas en Gel

proteínas mas pesadas hasta arriba

Question 18

Permite identificar proteínas en base a su carga y masa elétrica basada en gel

Answer 18

2D page

Question 19

Metodo para conocer la secuencia de aminoacidos de una proteína, los marca & separa de la cadena peptídica con trisina.

Answer 19

Secuenciación edman

Consistia en fragmentar una proteína en 50-60 aminoácidos, a traves de proteasas (tripsina). Se les marcan con diocionalato.

Question 20

Cuantificación de proteínas en tejidos vivos/estudios dinámicos
usando isotopos radioactivis

Answer 20

ICAT, SILCO, ITRAQ

Question 21

Marca a la cisteína con diferentes isotopos radioactivos (carbonos).
IMG

carbono diferente a carbono 14

Answer 21

ICAT

cada isotopo da diferentes espectros de absorvancia, presencia a ousencia de proteínas. al analizar con espectometría de masas, relación M/Z.

Question 22

Fase previa de gel de acrilamida (2D-page), una vez que las proteinas estan identificadas/separadas por m/z. Tomas las proteínas con caracteristicas comunes. Despues Marca a la cisteína con diferentes isotopos radioactivos

Answer 22

SILAC

SILCOuarcANEEEE

Question 23

ICAT masivo & paralelo

Answer 23

ITRAQ

Nos permite hacer los mismo que ICAT, utilizando diferentes isotopos radioactivos de manera masiva. diferenciar varias muestras.

Question 24

Técnicas de proteomica estrutural tridimensional

Answer 24

• Cristalografía de rayos X
• Resonancia magnética nuclear

Question 25

Involucra a las Proteínas en forma cristalina expuestas a un rayo x, por un patron de bifracción de la luz pueden determinar su estructura proteíca.
su estructura tridimencional de proteínas

Answer 25

Cristalografía de rayos X

*la más estudiada.

Question 26

Base de datos de proteínas

Answer 26

UNiprot

Question 27

Aplica campo magnetico que hace resonar a los atomos presentes en la molécula, se termina las partes por millon de los atomos y distribución espacial.
su estructura tridimencional de proteínas

Answer 27

Resonancia Magnética Nuclear