HIBRIDOMA Flashcards
Células que han sido diseñadas para producir un anticuerpo en grandes cantidades (anticuerpos monoclonales)
hibridoma (fusion de células)
se replican continuamente
¿Por quién son producidos los anticuerpos monoclonales?
por la tecnología del hibridoma
1975 Köhler y Milstein
¿Qué hacian Köhler y Milstein?
- investigaban los mecanismos moleculares de anticuerpos
- necesitaban producir una célula B inmortal
¿Cómo son los anticuerpos de las células plasmáticas?
policlonales
Procedimiento del hibridoma
bazo → muchos tipos de células (anti. policlonales) → se toma 1 sola célula → se fusiona con tumor “mieloma” → estas células hibridas se cultivan y se analizan de forma individual → se crea un anti. monoclonal para clonarse in vivo o in vitro (porque hay algunas del mielona que no se fusionan y otras si)
Relación entre mieloma, la enzima y el linfocito
- células del mieloma afectan a a una enzima HGPRT
- HGPRT → sintetiza nucleotido
- enzima HGPRT muta a un nucleótido (no tendrá el gen) por eso se fusiona con linfocito (porque este si tiene todos los nucleótidos y tendrá el gen)
¿Con qué se separan las células fusionadas (tumor-linfocito)?
citrómetro de flujo (para analizarlas y hacer un anti. monoclonal)
¿Qué hace el fago M13?
- es un virus bacteriano
- se toma gen de anticuerpo monoclonal
- vector: bacteriofago para clonación
- le quitamos el ADN del bacteriofago
- ADN recombinante
- le pones el ADN de nuevo con bacteriofago
- célula se duplica con la información recombinada
se infecta E. coli para producir nuevos fagos que expresen anticuerpos
¿Qué es el ribosoma display?
- tubo con ribosomas
- se pone ARNm directamente
- ribosomas leen ARNm y producen proteínas
- es una síntesis de anticuerpos monoclonales in vitro
- aisla el gen de los Ac de células humanas mediante PCR
¿Cómo es el anticuerpo monoclonal crimerico?
- region variable: ratón
- region constante: humano
- potencial inmunigénico intermedio
- terminacion mab
- inicia con “xi” (quimerico)
ximab = 66% humanos (rituximab)
¿Cómo es el anticuerpo monoclonal humanizados?
- region complementaria determinante: ratón
- terminacion mab (monoclonal antibodies)
- potencial inmunogénico bajo
- inicia con “zu”
zumab = 90% humanos (alemtuzumab)
¿Cómo es el anticuerpo monoclonal murino?
- region constante y variable son de ratón
- potencial inmunogénico alto
- terminacion mab (monoclonal antibodies)
- inicia con “o” (mouse)
momab = 0% humano (muromonomab)
¿Cómo es el anticuerpo monoclonal humano?
- aminoácidos enteramente humanos
- terminacion mab (monoclonal antibodies)
- potencial inmunogénico muy bajo
- inicia con “u”
umab = 100% humanos (adalimumab)
¿Para qué se usan los anticuerpos monoclonales?
- uso en investigación
- determinar concentración de proteínas
- tratamientos para cardio, reuma, rechazo a transplantes y oncohematologicas
Mecanismo de acción de anticuerpos monoclonales
unión de los anticuerpos monoclonales a:
* receptores de membrana
* proteínas circulantes
causan efecto directo o indirecto sobre la función de un tejido
