ELISA Flashcards
¿Cómo es el sistema inmune innato?
rápido e inespecífico
¿Cómo es el sistema inmune adaptativo?
lento y específico
Sistema inmune adaptativo (linfocitos B proceso)
reconocimiento del antígeno → activación de linfocitos B por linfocitos T cooperadores u otros estímulos → proliferación → diferenciación → resultado (secreción de anticuerpo/Ig)
Conformación de las Ig
- cadena pesada
- 2 cadenas ligeras
- cadenas unidas por puentes de disulfuro
- región variable (union del antigeno)
- región constante
Linfocito B → célula plasmática → anticuerpos (Ig)
:D
Las pruebas de laboratorio de ELISA asisten al patólogo para:
- identificación de patógenos
- medición de componentes de la sangre
- examinar los detalles microscópicos o la arquitectura de un tejido
¿Qué es el epitope?
regiones del antígeno que puede ser reconocida por un anticuerpo
antigenos tienen diferentes epitopes con diferentes formas
¿Qué es monoclonal y policlonal?
- monoclonal: anticuerpo viene de 1 celula (reconocen 1 epitope)
- policlonales: anticuerpo viene de 2 o más células (reconcen más epitopes)
¿Para qué es la ELISA?
ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
- reconocer antígeno
- interacción antígeno-anticuerpo
- anticuerpos utilizado: monoclonales
Tipos de ELISA
- directo
- indirecto
- sandwich (directo/indirecto)
ELISA directo
- 1 anticuerpo primario marcado con enzima que reconoce antígeno
- 1 antígeno (inmovilizado en placa)
- proteínas de las muestras y los antígenos se quedan en el fondo
- se cuantifican antígenos
- menor sensibilidad
ELISA indirecto
- 2 anticuerpos (primario y secundario “marcado con enzima para unirse al primario”)
- 1 antigeno (inmobilizado en una placa)
- se cuantifican antígenos y concentracion del anticuerpo en muestra
- procedimiento largo
- posible reacción cruzada
- alta sensibilidad
el que hicimos en lab
ELISA sandwich directo
- 2 anticuerpos (anticuerpo y anticuerpo primario)
- 1 antigeno
ELISA sándwich indirecto
- 3 anticuerpos (de captura, de detección, secundario)
- 1 antigeno
- análisis de muestras complejas
- alta sensibilidad y especificidad
- Ac de captura se inmobiliza en placa
- Ac de captura + Ag
- Ac de deteccion se une al Ag y su Ac de captura
- Ac secundario se une al de detección
- se cuantifican Ag
¿Qué es la citometría de flujo?
- se ven poblaciones, propiedades y etapa de diferenciación celular
- método rápido y cuantitativo
- células en medio líquido (buffer de fosfatos)
- como en fila india
