Fixation, préparation des tissus et colorations usuelles - Dre Marjorie Perron Flashcards
Quel est le principal but de la fixation tissulaire?
Conserver les tissus en prevenant l’autolyse et la putréfaction
Quels sont les facteurs influençant la fixation?
- Type de fixateur (pH, concentration)
- Volume de fixateur
- Durée de fixation
- Température
- Vitesse de pénétration
- Épaisseur tissulaire
- Densité tissulaire
Comment classifie-t-on les fixateurs selon leur action sur les protéines?
Coagulants et non coagulants
Nommez des exemples de fixateurs coagulants.
Méthanol
Éthanol
Acétone
Acide nitrique
Acide chlorhydrique Acide trichloroacétique Acide picrique
Acide chromique Chlorure mercurique
Ne fait pas partie de l’examen
Nommez des exemples de fixateurs non coagulants.
Formaldéhyde
Glutaraldéhyde
Acide acétique
Tétroxyde d’osmium
Bichromate de potassium
Ne fait pas partie de l’examen
Comment classifie-t-on les fixateurs selon leur composition?
Simples ou composés
Nommez des exemples de fixateurs simples.
Formaldéhyde
Glutaraldéhyde
Méthanol
Éthanol
Tétroxyde d’osmium
Bichromate de potassium
Chlorure mercurique
Acide picrique
Acide acétique
Nommez des exemples de fixateurs composés
B5
Zenker
Helly
Bouin
Bouin-Hollande
Carnoy
Méthacarn
Quel est le mode d’action des fixateurs du type aldéhyde?
Crosslinking
Fixation sans dénaturation des protéines
Nommez une indication, avantage et incovénient du formaldéhyde.
Indications
- Fixateur de routine
Avantages
- Peu couteux et stable
- Fixateur standard pour colorations, IHC et analyses d’ADN
Inconvénients
- Temps de fixation minimal de 6-8h
- Surfixation ou sous-fixation
- Cancérigène
Nommez une indication, avantage et incovénient du glutaraldéhyde.
Indication
- Microscopie éléctronique
Avantages
- Fixe rapidement
- Excellente préservation des détails ultrastructuraux cytoplasmiques et nucléaires
Inconvénients
- Mauvaise pénétration (petit fragments)
- Très couteux
- Entreposage et stabilité
Nommez des exemples de fixateurs contennent de l’acide picrique.
Bouin
Bouin-Hollande
Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs contennant de l’acide picrique.
Indication
- Tous les tissus, surtout biopsies
Avantages
- Décalcification
- Beaux détails nucléaires
Inconvénients
- Explosif (conserver humide)
- Déconseillé pour IHC
Nommez des exemples de fixateurs contennant du mercure.
B5
Zenker
Helly
Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs contennant du mercure.
Indication
- Organes lymphoïdes et hématopoïétiques
Avantages
- Fixe les tissus rapidement
- Détails histologiques excellents
Inconvénients
- Dépots de fixation
- Difficulté d’entreposage et de disposition
Nommez des exemples de fixateurs à base d’alcool.
Méthanol
Éthanol
Carnoy
Methacarn
Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs à base de méthanol/éthanol.
Indication
- Frottis cytologiques, les empreintes et les congélations
Avantages
- Antigènes bien préservés
- Fixe rapidement
Inconvénients
- Faible pénétration
- Temps de fixation doit être monitoré rigoureusement
Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs Carnoy/Methacarn.
Indication
- Examens extemporanés
Avantages
- Antigènes bien préservés (mieux avec Methacarn)
- Fixe rapidement
Inconvénients
- Artefactes de rétraction (plus avec Carnoy)
- Dissout les lipides
Quels sont les types de dépots pigmentés causés par les fixateurs?
Pigment de formaldéhyde
Pigment de mercure
Pigment de chrome
Pigment coloré
Nommez deux agents fixateurs qui sont aussi des décalcifiants.
Bouin
Zenker
Quels sont les inconvénients de la décalcification?
Altération des antigènes nucléaires (ER, PR, p53 et Ki-67)
Altération de l’ADN
Quelles sont les prinicpales étapes dans la préparation des tissus pour produire une lame?
- Mise en cassette
- Fixation
- Circulation
- inclusion en paraffine
- Coupe au microtome
- Étalement
- Séchage
- Coloration
- Montage
Quelles sont les propriétés de la coloration à hématoxyline et éosine?
Hématoxiline
- Colorant basique
- Colore les composants cellulaires basophiles (acides)
- Teint les noyaux
- Nuances de bleu (après étape de bleuissement)
Éosine
- Colorant acide
- Colore les composant cellulaires acidophiles (basiques)
- Teint le cytoplasme et fibres du tissu conjonctif
- Nuances de rose vers rouge
Quel est le résultat attendu d’une coloration H&E adéquate?
Résultat final
Bleu: noyaux
Rose (de + pâle à + foncé): cytoplasme, fibres conjonctives (surtout le collagène), fibrine
Rouge intense: érythrocytes, colloïde et éosinophiles
Quel est le résultat attendu d’une coloration HPS adéquate?
Résultat final
Bleu: noyaux
Rose: cytoplasme, fibres musculaires et fibres élastiques
Rouge: érythrocytes, fibres musculaires
Jaune (safran): fibres de collagène
