Examen de laboratoire - Dermatologie / Vénérologie

Question 1

Quels type d’agent infectieux peut-on trouver avec un prélèvements superficiels ? 4

et ce qu’on cherche à voir ?

1. 3
2. 3
3. 2
4. 2

Answer 1

1. Agents infectieux mycologiques
   
   1. Filament mycélien :
   2. Recherche de levures
   3. PMN /spores / Coques et bâtonnets
2. Agents infectieux bactériens
   
   1. Flore / pathogènes courants: gram/culture
   2. Gonocoques : gram, culture
   3. Identification tréponème pâle : microscope fond noir, PCR
3. ​Agents infectieux parasitaires
   
   1. Gale : test à l’encre, squames
   2. Leishmaniose cutanée : empreinte + MGG
4. Virus :
   
   1. Immunofluorescence directe
   2. PCR

Question 2

Les différents types de prélèvements superficiels (13)

Answer 2

1. Biopsie
2. Culture
3. Frottis
4. Blankophor
5. PCR : 24-48h
6. IF directe (recherche virale) : 60 min, assez rapide, bonne spécificité mais sensibilité moins bonne
7. IF directe (recherche d’autoimmunité)
8. Sérologie
9. Immuno-sérologie (recherche d’autoimmunité)
10. Microscopie électronique
11. Western Blots
12. ELISA
13. Dosage métaboliques …

Question 3

Examens complémentaires suspicion HSV (2)

Answer 3

1. en premier IF direct –> + rapide env 60min
   si negatif alors :
2. PCR

Question 4

Examens complémentaires lésion syphilitique (2)

Answer 4

1. Examen fond noir : via l’exsudat entre lame et lamelle –> mobilité du tréponème visible pour attester lésion syphilitique
2. PCR Treponema pallidum : via génome, 24-48h —> notamment syphilis primaire encore non bruyante

Question 5

Examen complémentaire urétrite à gonocoque 3

Answer 5

1. Frottis => Gram
2. Culture recommander pour antibiogramme
3. PCR

​Diplocoque G- (fuchsia) intracellulaire (PMN)

Question 6

Examens complémentaires Leishmaniose 2

Answer 6

1. Frottis pour gram - Coloration May Grundwald Giemsa –> microscope
2. Biopsie déposée sur lame et le reste au formol : coloration spécifique –> corps de Leishman, leucocytes…

Question 7

Examens complémentaires lésions mycotiques

Answer 7

1. Blankophor : micelles visibles
   + Na2S : dissocie les liaisons disulfutres kératines –> permet au blankophor d’accéder aux champignons
2. Culture : 8-10j, sur milieu riche
   PUIS 2nd culture pour identification morphologie grâce aux spores –> doit stresser = changer boite

Question 8

Clinique gale (sarcopte) 2 et EC 2

Answer 8

1. Lésions papuleuse
2. Prurit généralisé principalement nocturne (épargne le visage)
3. Encre de chine –> sillon scabieux
4. Examen direct sur prélèvement de squames avec oeufs

Question 9

Clinique punaise de lit clinique 4

Answer 9

1. Pique surtout la nuit
2. avec +/- tâches de sang sur les draps
3. Prurit érythémateux
4. Lésions maculo-papuleuses avec point hémorragique

Question 10

Méthode immunofluorescence directe 3

Answer 10

• Biopsie péri-lésionnelle
• Coupes congelées, incubée avec un anticorps fluorescent
• puis examen microscope

Question 11

But IF directe

Answer 11

Mettre en évidence et caractériser les auto-anticorps déposés au niveau de la peau = Ac épidermique in vivo

Question 12

Exemple d’IF direct : spécificités :

1. Pemphigus
2. Dermatite herpétiforme
3. Lupus
4. Pemphigoïde

Answer 12

1. dépôt des Ig en maille de fillet (IgG intercellulaire)
2. dépôt papillaire épidermique (IgA)
3. dépôt JDE plus granulaire (IgM, IgG, +/- IgE et C3)
4. dépôt JDE moins granulaire, linéaire (IgG)

Question 13

Méthode immunosérologie 3

Answer 13

1. IF indirecte (via fluorochrome)
2. Méthodes enzymatiques :
   
   1. ELISA,
   2. immunoblot

Question 14

But immunosérologie

Answer 14

Identification, classification, dosage des auto-anticorps circulants = sériques

Question 15

Méthode IF indirecte

Answer 15

Coupe de tissu puis lecture au microscope : consiste en la réalisation sur peau normale clivée = antigène (peau humaine témoin, oesophage de singe, vessie de rat) d’un examen du sérum du patient à la recherche d’autoanticorps circulants dirigés contre la membrane basale de l’épiderme

Question 16

Méthode ELISA

Answer 16

Utilise des antigènes / protéines purifiés ou recombinants comme substrats (BP180 par ex.) sur lesquels est incubé le sérum des patients.

Les anticorps du sérum sont ensuite révélés par un procédé enzymatique.

Question 17

Technique immunoblot

Answer 17

Echantillons protéiques sont déposés sur un gel d’électrophorèse séparés selon leurs caractéristiques de migration

Une fois migrées : transférées sur une membrane qui peut être composée de nitrocellulose ou de polyfluorure de vinylidène (PVDF)

Détection : appliquer sur la membrane des anticorps marqués spécifiques des protéines que l’on veut observer. On pourra ainsi observer leur position sur le gel.

Question 18

Types de maladies bulleuses (4) et cible des Ac

Answer 18

• Pemphigus vulgaire : Ag attaqué = desmogléine 3 (entre les kératinocytes) => clivage le plus superficiel
• Pemphigus foliacé : attaque de desmogléine 1 (aussi entre les kératinocytes)
• Pemphigoïde bulleuse : attaque de BP180 et 230 à perte de liaison de la lame basale
• Pemphigoïde cicatricielle : attaque de laminine 5 et collagène 7 –> perte de liaison de la lame basale